龙胆碱的质研究及发展.doc

龙胆碱的性质研究及发展齐齐哈尔大学 龙胆碱的性质研究及发展 学 院：食品与生物工程学院班 级： 生工102班 姓 名： 陈妮妮 学 号： 2010053089 2020年1月25日目录龙胆碱的性质研究及发展- 1 -引言- 1 -一 龙胆碱的结构和理化性质- 1 -二 龙胆碱的提取和含量测定- 2 -2.1龙胆碱的提取- 2 -2.2含量测定- 3 -三 龙胆碱的机理作用研究进展- 4 -3.1对消化道的影响- 4 -3.2利胆和保肝作用- 4 -3.3利尿作用- 4 -3.4抗菌作用- 5 -3.5对中枢神经系统的作用- 5 -3.6 其他作用- 5 -结束语- 5 -参考文献- 6 -龙胆碱的性质研究及发展陈妮妮 学号2010053089 （齐齐哈尔大学食品与生物工程学院生工102班）摘要：龙胆(Radix et Rhizoma Gentianae)为龙胆科植物龙胆Gentiann scabra Bge的根及根茎。具有清热燥湿，泻肝胆火的功效。近期研究表明，龙胆碱具有一定抗惊厥及脑保护作用。龙胆碱的提取方法，多以龙胆苦苷的提取为前提，经碱化处理即得 ，亦有从碱化的秦艽中分离获得龙胆碱。龙胆碱为龙胆中获取的一种活性成分，龙胆碱具有一定的解热作用，但龙胆碱的解热作用强于后者，龙胆碱可能是中药龙胆解热作用的更直接物质。将在医学有广泛应用前景。关键字：龙胆碱、增强免疫、镇静作用 、抗菌作用、解热作用。引言龙胆碱具有一定的抗高热惊厥及神经元保护作用 、利胆和保肝作用、有明显的解热作用、对消化道的影响等功效。因此，本研究对龙胆碱的解热作用及机制研究用干酵母制备发热模，比较龙胆水提液，龙胆碱及龙胆苦苷解热作用的差异，初步探讨龙胆碱的解热作用及机制，为高热惊厥的预防给药提供依据。一 龙胆碱的结构和理化性质龙胆碱又称龙胆宁碱，秦艽碱甲。针状结晶(由乙醚或石油醚中)。熔点8283。易溶于碱液中，属吡啶衍生物类生物碱。其盐酸盐为针状结晶(由乙醇-乙醚中)，熔点169170(分解)。龙胆碱结构式（1-1）植物来源有龙胆科植物龙胆(Gentiana scabra Bge.)的根。秦艽（图1-2）、白花龙（图1-3）(G.algida Pall.)和大叶龙胆（图1-4） (G.mdcrophylla Pall.)等多种植物，也可化学合成。具有抗炎、抗变态反应、抗溃疡和抑制胃液分泌作用，还能增强催眠镇痛药的药效及升高血糖和降低血压的作用。 秦艽（图1-2） 白花龙（图1-3）大叶龙胆（图1-4） 二 龙胆碱的提取和含量测定2.1龙胆碱的提取龙胆药材于碱性醇环境下能够分离得到龙胆碱，且提取溶剂的量及提取时的温度对龙胆碱的含量影响不大。称取适量龙胆药材，水煎煮后以16层纱布过滤，烘干成干膏后取适量加09生理盐水配成4 000 mgL 的溶液。用时均以09 生理盐水配成200 mgL 的溶液。龙胆碱溶液的制备依据前期实验 ，其简要过程为：称取适量龙胆药材，粉碎，过(2040)目筛，以乙醇与某溶剂按一定比例浸泡，80 下回流提取3次，抽滤，减压回收，得浸膏，烘干至恒重，用酸水溶解，过滤去沉淀，得红棕色液体；将上述液体倒人预先装好的阳离子交换树脂柱中，以适量溶剂梯度洗脱，减压回收得粗品；粗品进行硅胶柱层析，然后依次改变洗脱液极性，薄层定性后合并相同组分，减压回收，得白色针状结晶，即为龙胆碱单体。2.2含量测定2.2.1标准品溶液的制备精密称取龙胆碱标准品25 mg，置于10 mL的容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，静置15 rain即得。取10 L按下述色谱条件测定。2.2.2色谱条件色谱柱为DiamonsilC18(250mm46mm，5m)，流动相为甲醇一水在20 rain内从40：60到60：40梯度洗脱，检测波长为220 nm，流速为1 mLrain-1，柱温为28 。色谱见图1。2.2.3标准曲线的制备以上述标准品溶液为母液进行倍稀释，得浓度分别为0015 75、0031 25、006 25、0125、025mgmL 的系列溶液，精密吸取各浓度标准品溶液10 L，按上述色谱条件进行测定。以峰面积积分值(y)为纵坐标，检测浓度(X)为横坐标，进行线性回归，得回归方程Y=880 1379X+8 23809(r=0999 2)。结果表明，龙胆碱在15250 gmL。检测范围内与峰面积积分值呈良好线性关系。2.2.4样品含量测定分别取上述各组供试品溶液适量，采用045 m微孔滤膜过滤，备用。按上述色谱条件进样10 L测定。2.2.5精密度试验取标准品溶液重复进样5次测定。结果，龙胆碱峰面积积分值的RSD=075( =5)，表明仪器精密度良好。2.2.6加样回收率试验精密吸取已知含量(01 mgmL )的龙胆碱供试品溶液100 L各6份，分别精密加入龙胆碱标准品溶液(01 mgmL-1)100 L，照“222”项下方法操作。结果，RSD=090(，z=6)，表明本方法回收率良好。三 龙胆碱的机理作用研究进展目前，龙胆碱在医学上广泛研究应用，其成份能够松弛气管激活免疫、具有镇痛和镇静和消炎的等良好的功效。尤其是其中的龙胆碱能有效的抑制细菌。3.1对消化道的影响 龙胆或龙胆苦甙能促进胃液和胃酸分泌，用龙胆苦甙给予造成胃瘘管的狗口服，能促进胃液分泌，并可使游离盐酸增加，食欲增进。而舌下涂抹或静脉注射则无效，故认为龙胆苦甙可直接促进胃液分泌和使游离酸增加。 3.2利胆和保肝作用 取健康及肝脏损害小白鼠，十二指肠给予50g/kg龙胆注射液或健康犬静脉注射4.5gkg，均能显著增加胆汁流量。从犬的胆汁分泌流量曲线可见在给药5分钟和20分钟时出现两个高峰。龙胆苦甙对四氯化碳和D-氨基半乳糖(Galn)造成的小鼠肝脏急性损伤模型有保护作用，能减轻给药组动物肝坏死和肝细胞病变程度，对抗四氯化碳所致的肝细胞糖元合成障碍。龙胆注射液25g/kg皮下注射，对-萘异硫氰酸所致小鼠实验性黄疸模型(高胆红素血症和胆汁郁积)，可明显地降低血清胆红素含量。3.3利尿作用 龙胆注射液10gkg，耳静脉注射，可使5只家兔由给药前每30分钟平均排尿量0.76ml增加至2.64ml(p0.1)，提示龙胆有明显的利尿作用。3.4抗菌作用 试14种龙胆属植物，其中7对根瘤细菌，大肠杆菌、枯草杆菌、根癌病土壤杆菌等有作用。龙胆草水浸剂在试管内对石膏样毛癣菌星形奴卡氏菌等皮肤真菌有不同程度的抑制作用。试管法证明龙胆煎剂对绿脓杆菌，变形杆菌，伤寒杆菌，痢疾杆菌，金黄色葡萄球菌等有不同程度的抑制作用。3.5对中枢神经系统的作用 龙胆碱对小鼠中枢神经系统呈兴奋作用，但较大剂量时则出现麻醉作用。另有报道，龙胆碱25-200mg/kg腹腔注射或灌胃，有中枢抑制作用，能减少小鼠自发活动和定向反射，延长戊巴比妥钠和水合氯醛的睡眠时间，降低体温，松弛肌肉，以及降低士的宁的毒性等；200-400mgkg对小鼠有镇静作用，可降低小鼠的活动能力。獐牙菜苦甙能抑制中枢神经系统，具有镇痛和镇静作用。对肠及子宫平滑肌有解痉作用。3.6 其他作用 大量服用时，可防碍消化，时有头痛，颜面潮红，陷于昏眩。曾用含龙胆(品种未注明)的化癌丹试用于小鼠艾氏腹水小癌，证明有抗肿瘤的作用。龙胆酊大剂量对麻醉动物有降压作用，并能抑制心脏，使心率减慢。从G.lutea中提出的龙胆苦甙以疟原虫有较高的毒性用于疟疾发热及抗菌素甲醛实验性关节炎肿等作用。龙胆碱对猫有降压作用，对大鼠甲醛实验性关节炎肿有抗炎作用。龙胆水提物对氯化苦所致小鼠迟发型变态反应有抑制作用。结束语龙胆碱的抗炎, 镇静,安定,镇痛,降血压,抗消化性溃疡及胃肠功能障碍,中枢神经影响,血糖影响,并能够松弛气管激活免疫、具有镇痛和镇静和消炎的等良好的功效，临床用于高血压,消化性溃疡，尤其是其中的龙胆碱能有效的抑制细菌，所以龙胆碱在以后医学方面应用很广泛。龙胆碱能从龙胆科植物龙胆(Gentiana scabra Bge.)的根。秦艽、白花龙(G.algida Pall.)和大叶龙胆 (G.mdcrophylla Pall.)等多种植物中提取，龙胆花提取物是一款值开发的新原料，有很大的应用前景。参考文献1 姚素嫒龙胆碱抗大鼠高热惊厥作用的试验研究D】黑龙江中医药大学博士学位论文，20082 雷军钩藤后下机制及龙胆苦苷结构修饰的研究fD】西北大学硕士学位论文，20043 武洲单萜吲哚并吡啶生物碱的仿生合成龙胆汤的复方研究D西北大学硕士学位论文，20054 韦欣粗茎秦艽及其生物碱类成分分析D】四川大学硕士学位论文，20055 陈长勋，刘占文，孙峥，等龙胆苦苷抗炎药理作用研 16究J中草药，2003，34(9)：8146 刘占文，陈长勋，金若敏，等龙胆苦苷的保肝作用研究J中草药，2002，31(1)：477 陈雷，王海波，孙晓丽，等龙胆苦苷镇痛抗炎药理作用研究J天然产物研究与开发，2008，20：9038 杨肖锋，宋纯清龙胆苦苷的肠内菌群代谢研究J中国中药杂志，2000，25(11)：6739 刘树民，刘学伟，姚素媛，等龙胆碱对高热惊厥模型大鼠所致海马区神经细胞损伤的保护作用研究J中医药学报，2009，37(6)：l110 姚素嫒，刘学伟，刘树民，等龙胆碱对高热惊厥模型大鼠脑内氨基酸类神经递质含量及海马区GABAB、Glu受体的影响J时珍国医国药，2007，1812)：287511 赵勇，张儒，孙文基大孑L吸附树脂富集秦艽叶中龙胆苦苷的工艺研究J。中药材，2007，30(12)：158312 刘学伟，刘天宇，刘树民正交设计法优化龙胆中龙胆碱提取工艺J中国药房，2009，20(33)：258213 韦欣粗茎秦艽及其生物碱类成分研究D成都：四川大学硕士学位论文。2005：2714 卢芳，董培良，刘树民，等三种热病证候模型最佳造模方法的探索与评 价J山东中医杂志，2009，28(2)：11415 王德健，李巧云，徐世军，等龙胆草水提物的抗炎解热作用研究J四川省卫生管理干部学院学报，2007，26(1)：316 唐卡毅龙胆泻肝胶囊、龙胆泻肝汤临床应用研究进展J现代中西医结 合杂志，2009，18(10)：119717 王宝恩内科感染性疾病的中西医结合治疗M2版北京：人民卫生出版社，1987：2018 Maekowiak P A ，Bartlett J G，Borden E C，et a1Conceptsof fever，recent ad