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文档简介
第14课时蛋白质的提取和分离课时作业基础过关1.电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷_的电极移动()a.相同 b.相反c.相对 d.相向答案b解析在一定的ph下,生物大分子中有某些可解离的基团,这些基团会带上正电荷或负电荷,在电场作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。2.电泳实现样品中各种分子的分离是利用了()a.各种分子带电性质的差异b.分子本身的大小不同c.分子形状的不同d.以上都正确答案d解析电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小和形状差异,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离。3.下列关于同工酶的叙述正确的是()a.同工酶是由多个亚基以共价键结合形成的复合物b.同工酶对同一种底物有不同的专一性c.同工酶是催化同一种反应,但结构不完全相同的同一种酶的多种形式d.各种同工酶在电场电泳时,迁移速率相同答案c解析同工酶是指催化相同的化学反应而酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。4.在进行琼脂糖凝胶电泳前,用什么溶液溶解琼脂糖()a.蒸馏水 b.自来水c.缓冲液 d.蔗糖溶液答案c解析用电泳缓冲液溶解琼脂糖,如tbe,这样就能保证凝胶中的离子浓度与电泳液中的离子浓度相同,在电场中活动一致。5.各种动物血清内乳酸脱氢酶同工酶的组成是不同的。可以通过比较各种动物乳酸脱氢酶同工酶差异的大小来判断动物之间亲缘关系的远近。下列各种实验方法中,不能采用的是()a.测乳酸脱氢酶同工酶的氨基酸序列b.测控制乳酸脱氢酶同工酶合成的基因碱基序列c.用电泳法比较各种动物乳酸脱氢酶同工酶的电泳带d.检测不同动物的乳酸脱氢酶同工酶的ph答案d解析生物是由共同的原始祖先进化而来的,各种生物之间具有或近或远的亲缘关系,亲缘关系越近,则其对应基因的碱基序列的相似程度就越高,而基因控制蛋白质的合成,故其对应的蛋白质的氨基酸序列相似程度也就越高。因此,可以采用测定基因或蛋白质序列的方法进行判断。若蛋白质的相似程度高,则进行电泳时,电泳带的相似程度也就越高。不同动物的乳酸脱氢酶同工酶组成虽然不相同,但不能说明其ph就一定不相同。6.下图表示对某蛋白质溶液进行变性胶电泳的结果(类似于纸层析法分离色素),下列相关叙述不正确的是() a.蛋白质上某些基团解离后可使蛋白质带电,电场中带电的蛋白质分子(或多肽)会向着与其所带电荷相反的电极移动b.蛋白质在变性胶中的迁移速率完全取决于其所带净电荷多少c.蛋白质在变性胶中的迁移速率基本取决于其相对分子质量大小d.电泳结果表明溶液中蛋白质可能有两种,但也可能只有一种答案b解析蛋白质的氨基与羧基可发生解离,使其带正电或负电,在电场中发生迁移。变性胶电泳所加的sds可完全掩盖蛋白质本身所带电荷,故其迁移速率与本身所带电荷无关,而由其分子大小决定。变性胶电泳会使蛋白质水解成肽链,故结果所示可能只有一种蛋白质(有两种肽链),也可能是两种蛋白质。7.下图是心脏、骨骼肌和脑中的乳酸脱氢酶同工酶的电泳图谱,据图分析下列说法中不正确的是()a.3种器官中都含有5种乳酸脱氢酶同工酶b.ldh2在心脏中含量最高,在骨骼肌中含量最低c.骨骼肌中含量最高的是ldh5,含量最低的ldh1d.不同的器官同一种同工酶的含量不同,同一器官不同的同工酶含量差别不大答案d解析电泳图谱中每个器官形成了5个条带,说明乳酸脱氢酶有5种同工酶。根据条带的宽度可以判断,ldh2在心脏中含量最高,在骨骼肌中含量最低,说明不同的器官同一种同工酶的含量不同。骨骼肌中含量最高的是ldh5,含量最低的是ldh1,说明同一器官不同的同工酶含量不同。能力提升8.下列说法不正确的是()a.在一定范围内,缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液ph的影响,维持ph基本不变b.缓冲溶液通常由12种缓冲剂溶解于水中配制而成c.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程d.透析袋能使大分子自由进出,而将小分子保留在袋内答案d解析透析袋一般是用硝酸纤维素(又叫玻璃纸)制成的。透析袋能使小分子自由进出,而将大分子保留在袋内。透析可以除去样品中分子量较小的杂质,或用于更换样品的缓冲液。9.蛋白质的分离与纯化是蛋白质研究的重要技术。下列有关叙述中,不正确的是()a.根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性,可将样品中各种不同的蛋白质分离b.根据蛋白质分子所带电荷性质的差异及分子大小等,可利用电泳法分离蛋白质c.根据蛋白质相对分子质量的大小,可通过凝胶色谱法分离蛋白质d.根据蛋白质的分子大小、密度不同,可通过离心沉降法分离蛋白质答案a解析蛋白质分子是生物大分子,都不能通过半透膜,因此不能利用半透膜分离蛋白质;蛋白质分子所带电荷性质的差异及分子大小,可以使蛋白质分子在电场中获得不同的迁移速度,因此可以利用电泳法分离蛋白质;蛋白质相对分子质量的大小不同,通过凝胶柱的时间不同,可通过凝胶色谱法分离蛋白质;蛋白质的分子大小、密度不同,具有不同的离心力,可通过离心沉降法分离蛋白质。10.蛋白质各种特性的差异,可以用来分离不同种类的蛋白质。下列正确的是()a.分子的形状、大小和溶解度b.所带电荷的性质和多少c.对其他分子的亲和力d.以上三项都是答案d解析根据蛋白质各种特性的差异,如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度和吸附的性质及对其他分子的亲和力等,都可以用来分离不同蛋白质。11.下列关于电泳的说法,不正确的是()a.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程b.带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动c.蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少d.用sds聚丙烯酰胺凝胶电泳,蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小答案c解析蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它所带净电荷的多少以及分子的大小等因素,sds能与各种蛋白质形成蛋白质sds复合物,sds所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差异,使电泳迁移率完全取决于分子的大小。12.电泳技术是在外电场作用下,利用分子携带的净电荷不同,把待测分子的混合物放在一定的介质(如琼脂糖凝胶)中进行分离和分析的实验技术。利用电泳技术可以分离氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等物质和做亲子鉴定。下列图甲丁是电泳装置及相应电泳结果。请问答:(1)利用琼脂糖凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶时,需将提取的蛋白质样品加在图甲中的_(填“正极”或“负极”),理由是_。电泳过程中分子的迁移率除与本身所带净电荷的多少有关外,你认为还受什么因素的影响?(列出2种)_ _。(2)进行乳酸脱氢酶同工酶琼酯糖凝胶电泳时,当图乙中出现_的现象,即可停止电泳。(3)图丙是把含有21个氨基酸的多肽进行水解,得到的氨基酸混合物进行电泳的结果。故可推知该多肽由_种氨基酸组成。(4)图丁是通过提取某小孩和其母亲以及待测定4位男性的dna,分别由酶处理并扩增后,生成含有若干dna片段的混合物,然后进行电泳所得到的一组dna指纹图谱,该小孩真正生物学上的父亲是_,理由是_。答案(1)负极在碱性缓冲液中带负电荷的蛋白质在外加电场作用下会向正极移动电泳的电压、被测分子的大小、被测分子的形状、凝胶的种类密度等(2)溴酚蓝指示剂电泳到凝胶底部(3)6(4)f2c和f2两者的dna指纹图谱完全相同解析(1)将蛋白质样品加在电泳槽的负极段的加样孔,因为在碱性缓冲液中带负电荷的蛋白质在外加电场作用下会向正极移动,电泳过程中分子的迁移率除受自身电荷的性质、电荷多少的影响外,还受电泳的电压、被测分子的大小、被测分子的形状、凝胶的种类密度等因素影响。(2)乳酸脱氢酶同工酶提取液加样前,需与载体缓冲液混合,载体缓冲液中含有溴酚蓝指示剂,作为电泳进行程度的指示剂,当溴酚蓝指示剂电泳到凝胶底部意味着电泳结束。(3)图中电泳结果出现6条带,意味着含有6种氨基酸。(4)分析dna指纹图谱可知,c和f2两者的dna指纹图谱完全相同。13.试回答下列“蛋白质的提取和分离实验”的有关问题:(1)为了提取和分离血红蛋白,首先对红细胞进行洗涤以去除杂质蛋白,洗涤时应使用生理盐水而不使用蒸馏水的原因是_。(2)若要去除血清蛋白中的小分子杂质,采用图1装置。透析液是_,一段时间后,若向烧杯中加入双缩脲试剂,透析袋内溶液是否出现紫色?并说明判断的依据: _。(3)图2、图3分别表示电泳法分离蛋白质和纸层析法分离叶绿体中色素的结果。不同蛋白质得以分离是因为_;不同色素得以分离是因为_。条带c呈_色。答案(1)防止红细胞吸水涨破(2)(磷酸)缓冲液出现紫色。双缩脲试剂可以透过半透膜,与袋内血红蛋白反应,生成紫色物质(3)不同蛋白质所带电荷性质、分子大小和形状不同,导致电泳时迁移速度不同不同色素在层析液中溶解度不同,导致层析时扩散速度不同黄绿14.某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中,准备从猪的血液中初步提取血红蛋白,设计的“血红蛋白提取、分离流程图”如下:请回答下列有关问题:(1)样品处理中红细胞的洗涤要用_反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度ph7.0的缓冲液并充分搅拌,可以破碎红细胞,破碎细胞的原理是_。(2)血红蛋白粗分离阶段,透析的目的是_,若要尽快达到理想的透析效果,可以_(写出一种方法)。(3)电泳利用了待分离样品中各种分子的_等的差异,而产生不同迁移速度,实现各种分子的分离。(4)一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳,观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如图所示。由图可知携带者有_种血红蛋白,从分子遗传学的角度作出的解释是_。答案(1)生理盐水渗透原理(当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时,细胞吸水涨破)(2)除去小分子杂质增加缓冲液的量(或及时更换缓冲液)(3)带电性质以及分子大小、形状(4)2携带者具有(控制血红蛋白的)一对等位基因,可以控制合成两种不同的蛋白质解析(1)洗涤红细胞所用的溶液是生理盐水,根据渗透作用原理,将红细胞置于低渗溶
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