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文档简介

培养基对微生物的选择作用一、单选题1野生型大肠杆菌能在基本培养基上生长,用射线照射野生型大肠杆菌后得到一突变株,该突变株在基本培养基上培养时必须添加氨基酸甲才能生长下列说法不合理的是( )a.野生型大肠杆菌比突变株更能适应自然环境b.该突变株可能无法产生氨基酸甲合成所需的酶c.用基本培养基可以筛选出野生型大肠杆菌d.突变株是由野生型大肠杆菌发生基因重组而产生的【答案】d【解析】试题分析:由于突变型的大肠杆菌不能在基本培养基上生长,说明突变型的大肠杆菌不能合成氨基酸甲,但突变型的大肠杆菌需要氨基酸甲,基本培养基上没有氨基酸甲,所以不能基本培养基上生长解:a、由于该突变株在基本培养基上培养时必须添加氨基酸甲才能生长,所以野生型大肠杆菌比突变株更能适应自然环境,a正确;b、由于该突变株在基本培养基上培养时必须添加氨基酸甲才能生长,所以突变型菌株不能合成产生氨基酸甲合成所需的酶,b正确;c、野生型大肠杆菌能在基本培养基上生长,所以用基本培养基可以筛选出野生型大肠杆菌,c正确;d、突变株是由野生型大肠杆菌发生基因突变而产生的,d错误故选:d点评:本题的涉及的知识点是选择培养基和基因突变基因重组的适用范围,主要考查对基因突变和基因重组的理解、对选择培养基知识点的迁移能力,对选择培养基功能和特点的理解与运用2下列关于纤维素酶的叙述中不正确的( )a. 纤维素酶可将纤维素先分解为纤维二糖再分解为葡萄糖b. 纤维素酶含有c、h、o、n等化学元素c. 用纤维素酶处理玉米根尖成熟区细胞后,将细胞放入0.3g/ml的蔗糖溶液中出现质壁分离现象d. 纤维素酶是一种复合酶【答案】c【解析】纤维素酶是一种复合酶,包括c1酶、cx酶和葡萄糖苷酶三种,其中能够将纤维二糖分解为葡萄糖的是葡萄糖苷酶,a错误;纤维素酶的化学本质是蛋白质,蛋白质含有c、h、o、n等化学元素,b错误;用纤维素酶处理玉米根尖细胞后,细胞壁被纤维素酶分解,因此放入0.3g/ml的蔗糖溶液中不会出现质壁分离现象,c错误;纤维素酶是一种复合酶,包括c1酶、cx酶和葡萄糖苷酶三种,d正确。3关于培养基的类型的说法正确的是a. 要筛选目的菌株必须使用固体培养基b. 液体培养基与固体培养基在培养基配方上没有区别c. 纯化目的菌种需到得到单菌落,只能使用固体培养基d. 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基可用于尿素分解菌的筛选【答案】c【解析】筛选目的菌株需要使用选择培养基,但不一定使用固体培养基,a项错误;固体培养基含有特殊的成分琼脂,b项错误;在固体培养基上才能形成菌落,c项正确;筛选的尿素分解菌培养基中唯一碳源应为尿素,d项错误。4下列关于微生物分离和培养的叙述,错误的是 ( )a. 应根据微生物代谢类型选择合适培养基并控制好培养基phb. 实验操作时应避免已灭菌处理的材料用具与周围物品接触c. 待培养基冷却至室温后,在酒精灯火焰附近倒平板d. 使用过的培养基应进行高压蒸汽灭菌处理后再丢弃【答案】c【解析】应根据微生物代谢类型选择合适培养基并控制好培养基ph,a正确;实验操作时应避免已灭菌处理的材料用具与周围物品接触,以防止杂菌污染,b正确;待培养基冷却至50左右时,在酒精灯火焰附近倒平板,冷却到室温时培养基已经凝固,c错误;使用过的培养基应进行高压蒸汽灭菌处理后再丢弃,以防止杂菌污染环境,d正确。5有关培养基配制的描述正确的是a. 液体培养基常用于菌种的分离、计数、鉴定b. 任何培养基都必须含有碳源、氮源、水、无机盐等成分c. 依据人们的需求,配制出供微生物生长繁殖的营养基质d. 微生物的生长除受营养因素影响外,还受到ph、渗透压等影响【答案】d【解析】固体培养基常用于菌种的分离、计数、鉴定,a错误;培养基一般包括含有碳源、氮源、无机盐和水等,有的微生物还需要生长因子,b错误;人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出的供其生长繁殖的营养基质叫培养基,c错误;微生物的生长除受营养因素影响外,还受到ph、氧、渗透压的影响,d正确。【点睛】易错混淆:误认为液体培养基能用来对微生物分离和计数,其实固体培养基才能用来分离和计数。6高温灭菌的原理是()a. 每种微生物生长的最适温度都是一定的b. 微生物对于高温环境不适应c. 高温降低了环境中氧的浓度d. 高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸,影响其生命活动【答案】d【解析】高温灭菌的原理是利用高温能破坏了细胞内的蛋白质、核酸,达到影响其生命活动,最终杀灭细菌的目的,所以选d。7巴氏消毒法常用于酒、奶等食品的消毒,该消毒法就是加热到7075、保持30 min,或加热到80、保持15 min,能杀死一般杂菌和病原菌。与灭菌的要求相比,巴氏消毒法()a. 不能杀灭芽孢等耐高温的细菌b. 能杀灭芽孢等休眠状态的细菌c. 能杀灭各种细菌,包括芽孢d. 能杀灭各种真菌,包括孢子【答案】a【解析】由于酒、奶等食品中的某些成分在高温下易被破坏,不宜采取高温灭菌法,虽然巴氏消毒法不能杀灭芽孢等耐高温细菌,但由于奶、酒等的污染并不严重,巴氏消毒法还是能达到消毒要求的。综上分析,本题正确答案选a。8用刚果红染色时,加入刚果红应在()(1)制备培养基时(2)梯度稀释时(3)倒平板时(4)涂布时(5)长出菌落时a. (1)(3) b. (2)(5) c. (3)(5) d. (4)(5)【答案】c【解析】加入刚果红的操作有两种:先培养微生物再加入刚果红进行颜色反应,即(5)正确;在倒平板时就加入刚果红,即(3)正确;所以c选项是正确的。9用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是a. 未接种的选择培养基b. 未接种的完全培养基c. 接种了的完全培养基d. 接种了的选择培养基【答案】c【解析】将菌液稀释相同的倍数,在完全培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目,因此完全培养基是对照组。对照组遵循的原则是单一变量,所以需要与选择培养基一样接种、培养,故选c。10(2010崇明县二模)青霉素可以通过抑制真细菌细胞壁的形成达到杀菌作用以下能在含有青霉素的培养基上形成菌落的细菌是( )a.大肠杆菌和结核分歧杆菌 b.酵母菌和产甲烷细菌c.极端嗜盐菌和产甲烷细菌 d.放线菌和青霉菌【答案】c【解析】试题分析:含有青霉素的培养基可以抑制大肠杆菌的等细菌的生长,筛选出霉菌和酵母菌;细菌属于原核生物,酵母菌和真菌属于真核生物解:a、大肠杆菌通常无法在含有青霉素的培养基上培养,a错误;b、酵母菌是真菌,b错误;c、极端嗜盐菌和产甲烷细菌属于古细菌,其细胞壁成分与真细菌不同,青霉素对其不起作用,c正确;d、放线菌和青霉菌都不是细菌,d错误故选:c点评:选择培养基是微生物分离重要的考点,考生需要注意总结归纳,把握知识间的内在联系11如下表所示为某微生物培养基的配方,请回答错误的是成分含量nano33gk2hpo41gmgso47h2o0.5g(ch2o)30gh2o1000ml青霉素0.1万单位a. 依物理性质,该培养基属于液体培养基b. 依用途划分,该培养基属于选择培养基c. 根据培养基原料,所培养微生物的同化作用的类型是自养生物d. 该培养基中的碳源是(ch2o)【答案】c【解析】依物理性质划分,该培养基无凝固剂琼脂,属于液体培养基,a正确;由于培养基中含有青霉素,其具有选择作用,故培养的可能是酵母菌或霉菌等真菌,所以依用途划分,则属于选择培养基,b正确;该培养基中含有有机碳源,故培养的对象同化作用类型为异养型,c错误;该培养基中的碳源是(ch2o),d正确。【点睛】解决本题需要学生熟悉微生物的分离和培养的系列知识。如微生物培养需要的营养物质归纳为碳源、氮源、生长因子、无机盐和水。微生物培养、分离需要的培养基类型:根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等;根据用途分选择培养基、鉴别培养基;根据性质分为液体、半固体和固体培养基等等。12关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是 ( )a. 操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌b. 将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯c. 等培养基冷却至50 左右时进行倒平板d. 待平板冷却凝固510 min后将平板倒过来放置【答案】a【解析】制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,a错误;将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯,加入少量的水,加热,b正确;待培养基冷却至50左右时,在酒精灯火焰附近倒平板,c正确;待平板冷却凝固约510min后,将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿底在上,d正确。13下列操作与消毒或灭菌无关的是()a. 接种前用酒精灯火焰灼烧接种环b. 接种前用酒精擦拭双手c. 接种在酒精灯火焰旁完成d. 培养基在冷却到60 时倒平板【答案】d【解析】“接种前用火焰灼烧接种环”属于灭菌,a正确;“接种前用酒精擦拭双手”属于消毒,b正确;因为着酒精灯火焰附近的地方可以被认为是无菌区,所以“接种在酒精灯的火焰旁完成”属于无菌操作技术,c正确;“培养基在50时倒平板”属于培养基的制作,不属于无菌操作技术,d错误。14下列关于纤维素的叙述,不正确的是()a. 纤维素是由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物b. 纤维素能被土壤中某些微生物分解利用,是因为这些微生物能够产生纤维素酶c. 植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素d. 自然界中的各种生物均能把纤维素分解成葡萄糖【答案】d【解析】纤维素是由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物,a正确;土壤中的某些微生物能产生纤维素酶,将纤维素分解利用,b正确;纤维素是植物细胞壁的主要组成成分,植物根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素,c正确;自然界中,只有能产生纤维素酶的生物才能把纤维素分解成葡萄糖,d错误。15用来判断选择培养基是否起到了选择作用和培养基是否被污染需要设置的对照分别是 未接种的该选择培养基 接种了的该选择培养基 接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 未接种的牛肉膏蛋白胨培养基a. b. c. d. 【答案】c【解析】判断选择培养基是否起到了选择作用时,将菌液稀释相同的倍数,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目,因此牛肉膏蛋白胨培养基是对照组;用来判断选择培养基是否被污染时,需要一个未接种的该选择培养基做对照,如果未接种的培养基也生长出菌落,说明培养基被污染,反之,如果未接种的培养基没有长出菌落,说明选择培养基未被污染。故选:c。【点睛】本题主要考查实验过程中遵循的对照原则、单一变量意在等内容,意在加强学生的实验遵循的原则的理解与运用。16下列有关实验的叙述错误的是a. 肺炎双球菌体外转化实验可以证明蛋白质不是遗传物质b. 低温诱导洋葱染色体数目变化的实验中,用改良的苯酚品红染液进行染色,观察到视野中既有正常的二倍体细胞,也有染色体数目发生改变的细胞c. 用抽样检查法统计培养液中酵母菌种群数量变化时,先用吸管吸取培养液,滴于计数室内,再将盖玻片放在计数室上,多余培养液用滤纸吸取d. 健那绿染液可以使我细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近于无色【答案】c【解析】a. 肺炎双球菌体外转化实验可以证明蛋白质不是遗传物质,a正确;b. 部分细胞不分裂,不会受低温影响,部分细胞分裂,能被低温诱导染色体数目加倍,b正确;c. 用吸管吸取培养液之前,要先摇匀,c错误;d. 健那绿染液将线粒体染成蓝绿色,而细胞质接近于无色,d正确。17下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是( )a. 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板b. 取104、105 、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml,分别涂布于各组平板上c. 将实验组和对照组平板倒置,37恒温培养24-48小时d. 确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数【答案】d【解析】用蒸馏水配制牛肉育蛋白陈培养基,先经高温、高压灭菌,后倒平板,a正确;测定土壤中细菌总数利用稀释涂布平板法,即取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml,分别涂布于各组平板上,b正确;平板倒置后,将实验组和对照组在37恒温培养24-48小时,c正确;确定对照组无菌后,选择菌落数在30300的进行记数,求起平均值,再通过计算得出土壤中细菌总数,d错误。18以下有关微生物实验室培养的相关说法,正确的是a. 防止杂菌入侵,获得纯净的培养物,是研究和应用微生物的前提b. 无菌技术的目的是防止实验室的培养物被其它外来微生物污染c. 对微生物培养的器皿、接种工具和培养基可用干热灭菌等方法灭菌d. 配制固体培养基要经过:计算、称量、溶化、调ph、定容、灭菌、倒平板【答案】a【解析】研究和应用微生物时,必须防止杂菌入侵,获得纯净的培养物,a正确;无菌技术的目的是防止外来杂菌的入侵,b错误;培养基应该用高压蒸汽灭菌法灭菌,c错误;配制固体培养基要经过:计算、称量、溶化、定容、调ph、灭菌、倒平板,d错误。19制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本流程是a. 计算供量灭菌溶化倒平板b. 计算称量溶化灭菌倒平板c. 称量计算溶化灭菌倒平板d. 计算称量溶化倒平板灭菌【答案】b【解析】试题分析:制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,b正确。点睛:解答本题的关键在于熟记培养基的制备流程,同时不能将倒平板和灭菌的顺序搞反。20筛选出纤维素分解菌后还需要用下列哪一实验来确定()a. 发酵产纤维素酶 b. 发酵产生纤维素c. 纤维素酶分解滤纸 d. 纤维素分解产生葡萄糖【答案】a【解析】纤维素分解菌因能产生纤维素酶,所以具有分解纤维素能力。因此筛选出该菌后还需通过发酵产生纤维素酶来确定是否为所需要的菌种,所以选a。21(2009汕头二模)如图表示某种细菌(野生型)细胞内发生的从xy的物质转化反应,此过程的代谢产物均是细菌生活所必需的,e1e4分别表示四种酶野生菌的物质x来自于环境该种细菌的突变型iiv分别缺乏酶e1e4,分别配制的培养这些细菌的培养基不合理的是( )a.野生型细菌的培养基需含有物质xb.突变型i需要添加物质a,培养基无需含有xc.突变型ii需要添加物质b,培养基需含有xd.突变型iii仅需添加物质c,突变型iv仅需添加物质y【答案】d【解析】试题分析:分析题意可知野生型细菌必须从外界获取物质x并转化成y才能存活,故用培养基培养时需加入物质x,细菌的突变型iiv分别缺乏酶e1e4,说明单独在培养基中培养时,分别加入物质才能存活解:a、野生型细菌必须从外界获取物质x并转化成y才能存活,故用培养基培养时需加入物质x,a正确;b、突变型i缺少酶e1不能合成a,故培养时需添加物质a,b正确;c、突变型ii缺少酶e2不能合成b,培养时需添加b,又因从xy的物质转化反应,此过程的代谢产物均是细菌生活所必需的,故还需要在培养基中添加x,c正确;d、突变型iii缺少酶e3不能合成物质c,需要从外界添加,并且还需要添加x,d错误故选:d点评:通过酶的调节来考查微生物的代谢,考查考生读图的能力,考生需仔细审题,认真分析,特别是从xy的物质转化反应,这过程的代谢产物均是细菌生活所必需的,这点考生容易忽略22(2010嘉定区一模)如图显示四种细菌(1、2、3、4)对琼脂板上的抗生素x的不同反应,下列哪项相关的观点是正确的?( )a.可以用抗生素x去医治由细菌1引起的疾病b.用抗生素x对细菌2的抑制比对细菌3的抑制效果好c.细菌3 四天后的灰雾地带最长,说明抗生素x细菌3的抑制效果最差d.细菌2 四天后的灰雾地带最短,说明抗生素x细菌2的抑制效果最差【答案】b【解析】试题分析:分析图形:如果抗生素x对细菌没有抑制作用,则细菌能够在滤纸上上形成菌落;如果抗生素x对细菌有抑制作用,则细菌的菌落越小说明抗生素x对细菌的抑制作用越大,图形中细菌1不受抗生素x的影响,细菌2、3、4都受抗生素x的影响,并且抑制作用由小到大为:342解:a、不能用抗生素x去治疗由细菌1引起的疾病,a错误;b、用抗生素x对细菌2的抑制比对细菌3的抑制效果好,b正确;c、四天后细菌1的灰雾地带在滤纸条上也有,说明抗生素x对细菌1的抑制效果最差,c错误;d、四天后细菌1的灰雾地带在滤纸条上也有,说明抗生素x对细菌1的抑制效果最差,d错误故选:b点评:本题考查抗生素对微生物的选择作用,观察抗生素所起的作用时,应该将培养基中加入抗生素,观察微生物的生长情况,如果不能生长,说明起到很好的抑制作用,如果能生长,说明没有起到抑制作用23有关培养基配制原则表述正确的是( )a. 任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水及生长因子b. 碳源和氮源必须具有一定比例,碳元素的含量最多,其次为氮元素c. 微生物的生长除受营养因素影响外,还受到ph、氧、渗透压的影响d. 营养物质的浓度越高越好【答案】c【解析】培养自养型微生物的培养基中不需加入碳源,分离自生固氮菌的培养基中,不需加入氮源,a错误;一般来说,在培养基中碳源和氮源具有一定比例,但培养基中含量最多的应该是水,而不是碳元素或氮元素,b错误;微生物的培养过程中除受营养因素影响外,还受到ph、氧、渗透压的影响,c正确;营养物质的浓度越高可能会造成微生物渗透失水死亡,d错误。24以下操作对估测结果的数值准确性影响最大的一项是( )a. 估测细胞周期各期时长,可统计多个视野中各时期细胞数量所占比例b. 估测狭长样地中蒲公英数量,可用等距取样法选取样方c. 估测培养液中酵母菌的种群数量,可用滴管从静置培养液的中层取样d. 估测土壤浸出液中的细菌数量,可采用稀释涂布平板法【答案】c【解析】细胞分裂每一时期的时间细胞周期每一时期的细胞数占计数细胞总数的比例,为减小实验误差,应该统计多个视野中各时期细胞数量所占比例,a项不符合题意;取样的方法主要有五点取样法和等距取样法,估测狭长样地中蒲公英数量,应用等距取样法选取样方,b项不符合题意;估测培养液中酵母菌的种群数量时,在取样前应将试管振荡摇匀,否则会导致较大误差,c项符合题意;估测土壤浸出液中的细菌数量,可采用稀释涂布平板法,d项不符合题意。【点睛】本题考查课本上的几个常考实验的相关知识。需要考生理解相关实验目的、原理、方法和操作步骤,掌握相关的操作技能,并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。所以考生在平时的学习过程中一定要注意归纳和积累。25下列生物学实验操作,不合理的是()a. 使用光学显微镜对光时,先转动转换器,后调节反光镜b. 观察质壁分离实验时,先制作临时装片,后滴加高渗溶液c. 制作有丝分裂装片时,先用龙胆紫染色,后进行漂洗d. 制备牛肉膏蛋白胨培养基时,先调节ph,后灭菌【答案】c【解析】使用光学显微镜对光时,先转动转换器,后调节反光镜,a正确;观察质壁分离实验时,先制作临时装片,后滴加高渗溶液,b正确;制作有丝分裂装片时,先进行漂洗,后用龙胆紫染色,否则会影响染色的效果,c错误;制备牛肉膏蛋白胨培养基时,先调节ph,后灭菌,d正确。26下表为某培养基的配方,下列叙述正确的是成分蛋白胨葡萄糖k2hpo4伊红美蓝蒸馏水含量10g10g2g04g0065g1000mla. 从物理性质看该培养基属于液体培养基,从用途看该培养基属于选择培养基b. 该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖,属于氮源的物质是蛋白胨c. 该培养基缺少提供生长因子的物质d. 该培养基调节合适的ph后就可以接种使用【答案】b【解析】分析表中成分可知,该培养基中没有凝固剂,为液体培养基,该培养基的营养成分齐全,但存在伊红、美蓝等鉴别物质,属于鉴别培养基,a项错误;该培养基中的蛋白胨既是唯一的氮源,也是碳源,而葡萄糖是绝大多数生物最常利用的碳源,b项正确;该培养基中存在的无机盐和蛋白胨中的某些物质可以看作是生长因子,c项错误;培养基调节完ph还要进行灭菌等操作后,才能使用,d项错误。27下表为培养某种微生物的培养基配方,下列相关叙述错误的是成分nan03k2hp04kc1mgs047h20fes04(ch20)h20青霉素含量3g1g0.5g0.5g0.01g30g1l0.1万单位a. 依物理性质划分,该培养基属于液体培养基b. 依用途划分,该培养基属于选择培养基c. 培养基中的唯一碳源是(ch20),唯一氮源是nan03d. 若用该培养基培养纤维素分解菌,则应除去(ch20),再添加纤维素【答案】d【解析】分析表格信息可知,因配方中没有凝固剂琼脂,所以依物理性质划分,该培养基属于液体培养基,a项正确;因配方中有青霉素,所以依用途划分,该培养基属于选择培养基,b项正确;培养基中的唯一碳源是(ch20),唯一氮源是nan03,c项正确;若用该培养基培养纤维素分解菌,则应除去(ch20)和青霉素,再添加纤维素,d项错误。【点睛】本题以“微生物的培养基配方”为情境,综合考查学生对微生物的营养、培养基的分类和应用等相关知识的识记和理解能力。正确解答此题,需以“培养基的成分”为切入点,从中抽提出有效信息:该配方中有青霉素、但没有凝固剂琼脂、含碳元素的物质只有(ch20)、含氮元素的物质只有nan03、将其与“所学相关知识”有效地联系起来,进行知识的整合和迁移,并与分离纤维素分解菌的知识建立联系。28下列关于分离纤维素分解菌的实验的叙述,错误的是a. 经选择培养后将样品直接涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上b. 当土壤样品中纤维素分解菌数量较多时,选择培养这一步可以省略c. 可先在固体培养基上培养微生物,再用刚果红溶液染色d. 鉴别纤维素分解菌的原理是纤维素分解后的产物不能和染料形成红色复合物【答案】a【解析】分离纤维素分解菌时,经选择培养后,样品应稀释后涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上,a项错误;选择培养的目的是增加菌体浓度,当土壤样品中纤维素分解菌数量较多时,选择培养这一步可以省略,b项正确;可先在固体培养基上培养微生物,再用刚果红溶液染色,也可以在倒平板时加入刚果红,c项正确;鉴别纤维素分解菌的原理是纤维素分解后的产物不能和染料形成红色复合物,d项正确。2929某校生物兴趣小组研究发现,秸秆还田的过程中施加外源纤维素酶能起到较好的效果。下列有关叙述错误的是a. 纤维素酶是一种复合酶,其中纤维二糖酶能够将纤维素分解为纤维二糖b. 纤维素分解菌主要分布于富含纤维素的环境中,纤维素分解菌常用刚果红染液进行鉴定c. 菌落周围的透明圈大小可以反应纤维素分解菌产生的酶的多少d. 为了确定得到的是纤维素分解菌,还需要进行发酵产生纤维素酶的实验【答案】a【解析】纤维素酶是一种复合酶,包括c1酶、cx酶和葡萄糖苷酶三种,其中能够将纤维二糖分解为葡萄糖的是葡萄糖苷酶,a错误;纤维素分解菌主要分布于富含纤维素的环境中,刚果红染色体可用于鉴定纤维素分解菌,b正确;菌落周围的透明圈大小可以反应纤维素分解菌产生的酶的多少,纤维素酶含量越多,透明圈越大,c正确;纤维素酶的测定方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定,d正确。30制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中,关于倒平板的叙述不正确的是a. 等培养基冷却后在酒精灯火焰附近倒平板b. 右手拿锥形瓶,使瓶口迅速通过火焰c. 将锥形瓶中的培养基倒入培养皿后,立即盖上皿盖d. 待平板冷却后将平板倒置,使皿盖在上、皿底在下【答案】d【解析】试题分析:等培养基冷却至50左右时,在酒精灯火焰附近倒平板,防止杂菌污染,a正确;右手拿锥形瓶,使瓶口迅速通过火焰,高温防止杂菌污染,b正确;右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿,左手立即盖上皿盖,并通过酒精灯火焰,c正确;等待平板冷却510分钟,将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿底在上,d错误。点睛:此题属于基础题,但各选项后的原因考生一定要注意,虽然核心是防止杂菌污染,在具体填空题中,就要将过程写清楚,如d项, 倒置的目的是防止冷凝水倒流,造成污染。二、非选择题31生物选修1请回答关于“分解纤维素的微生物的分离”的实验的一些问题。(1)采集土样时,应选择_的环境,因为纤维素分解菌大多分布在这些环境的土壤中。(2)为确保能够从样品中分离得到目的菌,可通过选择培养增加纤维素分解菌的浓度。选择培养基应以_作为唯一的碳源。为什么选择培养能够“浓缩”目的菌?_。(3)分离得到分解纤维素的微生物,常用的方法是_,常用的接种方法是_,判断是否是目的菌菌落的依据是_,设置空白对照的目的是_。【答案】富含纤维素(或纤维素丰富)纤维素因为目的菌能够以纤维素为碳源,大量繁殖,而其他细菌则不能以纤维素为碳源,无法正常生活刚果红染色法涂布平板法菌落周围是否出现透明圈判断培养基制作是否合格(或判断培养基是否有杂菌污染)【解析】试题分析:分离并统计分解纤维素的微生物的实验流程为:土壤取样(包好分解纤维素的微生物在内的多种微生物)接种(平板划线法)选择培养(30c恒温培养)梯度稀释(分离纯化菌种)将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落(刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被微生物分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,这样我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌)。(1)纤维素分解菌可以分解纤维素,所以采集土样时,应选择富含纤维素的环境。(2)要从土壤中筛选出能高效分解纤维素的微生物,应用以纤维素为唯一碳源的选择培养基。因为目的菌能够以纤维素为碳源,大量繁殖,而其他细菌则不能以纤维素为碳源,无法正常生活,所以选择培养能够“浓缩”目的菌。(3)纤维素菌常用的接种方法稀释涂布平板法。刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被微生物分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。设置空白对照的目的是判断培养基制作是否合格。【点睛】微生物这部分内容是高考试题的一个热点一般体现在对能源的利用,考察的知识点有微生物的无菌操作、微生物的分离以及产品的提取,注意总结。32某化工厂的污水池中,含有一种有害的、难于降解的有机化合物a。研究人员用化合物a、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能高效降解化合物a的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图所示,请分析回答问题:(1)培养基中加入化合物a的目的是筛选_,这种培养基属于_培养基。对培养基进行灭菌的常用方法是_。(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的_。(3)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物a含量_的培养液,接入新的培养液中连续培养。(4)转为固体培养时,常采用_法接种,获得单菌落后继续筛选。(5)在上述实验操作过程中,获得纯净“目的菌”的关键是_。 (6)在实验中,研究者想统计目的菌数目,可以每隔24小时统计一次菌落数目,并选取_时的记录作为结果,这样可以防止因培养时间不足导致遗漏细菌数目。【答案】 目的菌 选择 高压蒸汽灭菌 化合物a 减少 平板划线(或稀释涂布平板) 防止外来杂菌入侵 菌落数目稳定【解析】试题分析:阅读题干和题图可知,本题是利用微生物培养的知识分离高效降解化合物a的细菌,先分析题图了解分离高效降解化合物a的细菌的过程,然后根据问题的具体内容梳理相关知识点分析解答。(1)培养基中加入化合物a的目的是筛选能高效降解化合物a的细菌;选择培养基是指加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长,因此这种培养基属于选择培养。(2)分析培养基的配方可知,该培养基由化合物a、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制而成,因此化合物a为目的菌提供了碳源和氮源。(3)该实验的目的是筛选能高效降解化合物a的细菌,因此培养若干天后,应选择培养瓶中化合物a含量减少的培养液,接入新的培养液中连续培养。(4)转为固体培养时,可采用稀释涂布平板法进行接种,获得单菌落后继续筛选。(5)获得纯净“目的菌”的关键是无菌技术,防止外来杂菌入侵。(5)统计目的菌数目时,应该选择菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止因培养时间不足导致遗漏细菌数目。【点睛】解答本题的关键是根据实验目的和微生物的营养配方,判断化合物a的重要作用,并确定统计目的菌数目时,应该选择菌落数目稳定时的记录作为结果。33肥胖已经严重危害人类健康。为研究发酵大麦提取物对3t3-l1前脂肪细胞分化的影响,科研人员进行了相关实验。(1)3t3-l1前脂肪细胞在胰岛素(ins)、地塞米松(dex)和3-异丁基-1-甲基-黄嘌呤(ibmx)的诱导下,基因_表达,分化为成熟脂肪细胞,因此经过三种物质诱导的3t3-l1前脂肪细胞是肥胖研究常用的细胞模型。(2)3t3-l1前脂肪细胞培养液中除了具有基本的营养外,还需加入一定量的_,并置于_ 中培养。(3)将一定数目的植物乳杆菌接种到经过_处理的粉碎过筛大麦和水的混合液中,制备发酵大麦提取物(lfbe)。除不接种植物乳杆菌外,其余操作方法相同,制备未发酵大麦提取物(rbe)。(4)研究发酵大麦提取物对细胞分化的影响,实验处理及结果如下。(表格中+表示加入了该物质,-表示未加入)表格处理方法1、2、3分别是_、_、 _。分析实验结果,说明_。(5)为进一步研究lfbe抑制3t3-l1前脂肪细胞分化的机理,科研人员提取各组细胞中总rna,经_过程获得cdna,再利用pcr技术扩增出肥胖相关基因。在相同条件下,pcr产物的量可以间接反映细胞中 _的含量。若检测结果是_,则说明lfbe抑制相关基因转录从而抑制3t3-l1前脂肪细胞分化。【答案】 选择性 动物血清(可换成抗生素以防止污染) co2(恒温)培养箱 (高压蒸汽)灭菌 地塞米松和3-异丁基-1-甲基-黄嘌呤 未发酵大麦提取物 发酵大麦提取物 发酵大麦提取物明显抑制3t3-l1前脂肪细胞分化且随浓度增加,抑制能力加强 逆转录 【答题空10】肥胖相关基因mrna lfbe组肥胖相关基因mrna数量明显低于模型组和rbe组,高于空白组【解析】试题分析:本题以柱形图和曲线图为载体,考查发酵大麦提取物对3t3-l1前脂肪细胞分化的影响的相关实验探究,识记细胞分化的实质,结合对照实验的原则,以及对柱形图中的实验结果进行分析,从而得出相应实验结论。(1)细胞分化是基因选择性表达的结果。(2)细胞培养液中除了具有基本的营养外,还需加入一定量的动物血清(可换成抗生素以防止污染),并置于 co2(恒温)培养箱中培养。(3)大麦和水的混合液是用来培养植物乳杆菌的培养基,在接种之前,培养基需要灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。(4)本实验是研究发酵大麦提取物对细胞分化的影响,根据题(1)中“3t3l1前脂肪细胞在胰岛素(ins)、地塞米松(dex)和3异丁基1甲基黄嘌呤(ibmx)的诱导下,分化为成熟脂肪细胞”题(3)中“植物乳杆菌接种到粉碎过筛大麦和水的混合液中,制备发酵大麦提取物(lfbe)”等相关信息可推知,表格处理方法1、2、3分别是insdexibmx、rbe、lfbe。根据柱形图,分析实验结果,说明lfbe明显抑制3t3l1前脂肪细胞分化率且随浓度增加,抑制能力加强。(5)rna经逆转录过程获得cdnapcr产物的量可以间接反映细胞中肥胖相关基因mrna的含量若检测结果是 lfbe组肥胖相关基因mrna数量明显低于模型组和rbe组,高于空白组,则说明lfbe抑制相关基因转录从而抑制3t3l1前脂肪细胞分化。34有人认为,鲜榨果汁比盒装或瓶装的果汁更新鲜健康。食品监督人员发现鲜榨果汁若不能做到无菌生产,更容易滋生细菌。研究过程如下:(1)纯化培养细菌的方法:平板划线法可以观察菌落特征,对混合菌进行分离,但不能_;使用稀释涂布平板法,在稀释度足够高时,一个菌落代表_。(2)对细菌计数时往往会产生实验误差,稀释涂布平板法计数的值比实际值_,原因是_;显微计数法计数的结果比实际值_,原因是_。(3)接种结束后,将一个未接种的培养基和一个接种的培养基放在一起培养的目的是_,未接种的培养基表面是否有菌落生长很关键。如果有菌落生长,说明_。【答案】 计数 单个细胞 偏小 当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落 偏大 显微镜下无法区分细胞的死活,计数时包括了死细胞 对照 培养基灭菌不彻底(或培养基被污染了或需要重新制备)【解析】【试题分析】本题考查了微生物的分离与培养的有关知识,要求考生掌握稀释涂布平板法和平板划线法功能的区别,掌握用不同方法对微生物进行计数的特点等,再结合题意回忆所学知识,对各小题进行分析作答。(1)平板划线法可以观察菌落特征,对混合菌进行分离,但不能计数;使用稀释涂布平板法,在稀释度足够高时,聚集在一起的微生物将分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落,即一个菌落代表单个细胞。(2)用稀释涂布平板法对细菌进行计数时,当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,所以统计的菌落往往比活菌的实际数目偏小;若用显微计数法计数时,由于显微镜下无法区分细胞的死活,计数时包括了死细胞,所以计数的结果会比实际值偏大。(3)接种结束后,将一个未接种的培养基和一个接种的培养基放在一起培养的目的是作对照,未接种的培养基表面是否有菌落生长很关键。如果有菌落生长,则说明培养基灭菌不彻底(或培养基被污染了或需要重新制备)。35某实验小组欲从被豆油污染的土壤中筛选出高效降解脂肪的菌株。请依据题意回答下列问题。(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于_培养基。(2)为避免培养基被污染,需将培养皿呈_状态放置。为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行_处理。为了排除培养基被污染,需设置接种等量_的培养基作为空白对照。(3)为了筛选出菌株,可将适量的_试剂滴加在平板中的菌落周围,洗去浮色后,如果菌落周围出现_,则说明此种菌能够分泌脂肪酶。(4)纯化菌种时,为了对活菌计数,常采用_法接种于新的培养基平板上。【答案】 豆油(或脂肪) 选择 倒置 梯度稀释(或系列稀释) 无菌水 苏丹(或苏丹) 透明圈 稀释涂布平板【解析】试题分析:熟记并理解微生物的实验室培养、微生物的分离与鉴定等相关基础知识、形成清晰的知识网络。在此基础上从题图中提取信息并结合题意作答。(1)依题意,欲从被豆油污染的土壤中筛选出高效降解脂肪的菌株,应将土壤样品稀释液接种于以豆油(或脂肪) 为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲,该培养基属于选择培养基。(2)为避免培养基被污染,需将培养皿呈倒置状态放置。为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行梯度稀释(或系列稀释) 处理。为了排除培养基被污染,需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照。(3)脂肪被苏丹染液(或苏丹)染成橘黄色(或红色);能高效降解脂肪的菌株所分泌的脂肪酶能够催化脂肪水解,在培养基中的该菌落周围会出现透明圈。可见,为了筛选出能高效降解脂肪的菌株,可将适量的苏丹(或苏丹)试剂滴加在平板中的菌落周围;洗去浮色后,如果菌落周围出现透明圈,则说明此种菌能够分泌脂肪酶。(4) 纯化菌种时,为了对活菌计数,常采用稀释涂布平板法接种于新的培养基平板上。【点睛】本题的易错点在于对 (4)的解答。解答的关键是明确纯化微生物时的两种接种方法(平板划线法和涂布平板法)的异同:两种接种方法作用不完全相同:平板划线法和涂布平板法都能使细菌纯化,但平板划线法不易分离出单个菌落,不能计数;涂布平板法能使单菌落分离,便于计数。涂布平板法的缺点:涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。36下图表示研究者从土壤中筛选分解尿素的细菌并计数的相关实验,请据图回答下列问题。(1)进行过程和的目的分别是_和_;图中弧线箭头上“?”的具体操作是_。(2)进行培养基配制和灭菌时,灭菌与调节ph的先后顺序是_。倒平板时,待平板冷却凝固后,应将平板倒过来放置,并用记号笔在皿底上标明培养的微生物名称、平板上培养样品的稀释度、制作者姓名、培养日期及培养基种类等信息。纯化菌种时为了得到单一菌落,常采用的接种方法是_。(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_。培养后,若出现_色,说明其中含有能够分解尿素的细菌。(4)在实验中,研究者每隔24小时统计一次菌落数目,并选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止_。【答案】 选择培养 增加分解尿素的细菌的数量 挑出菌落 先调节ph,后灭菌 平板划线法、稀释涂布平板法 酚红指示剂 红 因培养时间不足导致遗漏细菌数目【解析】试题分析:熟记并理解微生物的实验室培养、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数等相关基础知识、形成清晰的知识网络。在此基础上从题图中提取信息,准确定位图中数字和“?”所示过程并结合题意作答。(1)分析图示可知:过程是选择培养,以获得分解尿素的细菌;过程为梯度稀释,其目的是增加分解尿素的细菌的数量。图中弧线箭头上“?”的具体操作是挑出菌落。(2)进行培养基配制和灭菌时,为了防止调节ph过程中培养基被杂菌污染,应先调节ph,后灭菌。纯化菌种时为了得到单一菌落,常采用的接种方法是平板划线法、稀释涂布平板法。(3)在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,氨会使培养基的ph升高,酚红指示剂将变红,因此在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养后,若出现红色,说明其中含有能够分解尿素的细菌。(4)在实验中,研究者每隔24小时统计一次菌落数目,并选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止因培养时间不足导致遗漏细菌数目。【点睛】从土壤中分离尿素分解菌的一般步骤是:土壤取样、选择培养、梯度稀释、观察与测定,所以是选择培养,为梯度稀释,是稀释涂布平板法接种培养。37在自然条件下,淀粉分解菌(一类细菌的总称)和其他各种细菌混杂生活在土壤中。请回答下列有关问题:(1)从土壤中将淀粉分解菌筛选出来,所以培养基从功能上讲应属于_培养基,该培养基在成分上的特殊之处在于_。(2)可用于淀粉分解菌的接种和计数的方法是_法。某实验小组将样液分别稀释了102倍、103倍、104倍,然后将稀释倍数为102倍、103倍、104倍的稀释液分别涂布在不同的平板上,涂布多个稀释倍数的稀释液的目的是_。若有三个平板均涂布了稀释倍数为_倍的稀释液1ml,这三个平板上分别长出了 67、71和72个菌落,则原样液体中每毫升含有淀粉分解菌7104个,该方法的测量值一般比实际值偏小,原因是_。(3)将含有淀粉分解菌的培养液涂布到培养基上,待培养基上长出菌落后可向培养基中滴入_,挑取有明显淀粉分解圈的单菌落。一般来说,淀粉分解圈越大,则淀粉分解菌分解淀粉的能力越_。【答案】 选择 以淀粉为唯一碳源 稀释涂布平板 在平板上获得数量适中的菌落 103 两个或多个菌落形成一个菌落 碘液 强【解析】试题分析:本题考查微生物的分离与计算,通过分析微生物分离与计数的方法等相关知识点,再结合题意作答。(1)要将土壤中的淀粉分解菌筛选出来,所用的培养基从功能上讲应属于选择培养基,该培养基中应添加淀粉作为唯一的碳源。(2)可用于淀粉分解菌的接种和计数的方法是稀释涂布平板,涂布多个稀释倍数的稀释液的目的是稀释平板法培养出微生物的单个菌落,达到纯培养的目的。由题意知1ml原样液中的菌落数是(68+70+72/3稀释倍数=7104个,计算得出稀释倍数= 103。稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落,使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低。(3

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