浙科版选修1α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 作业.docx

-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 作业一、单选题1固定化酶技术常采用( )。a包埋法 b化学结合法和物理吸附法c凝胶法 d微胶囊法【答案】b【解析】酶的体积较小，容易从包埋材料中漏出来，所以一般采用化学结合和物理吸附法固定。2下列说法不正确的是a固定化酶和固定化细胞在应用上的主要区别是后者需要一定的营养b固定化酶技术一次只能固定一种酶c固定化酶和固定化细胞的共同点之一是酶都是在细胞外起作用d固定化酶和固定化细胞都能反复使用【答案】c【解析】试题分析：固定化酶和固定化细胞在应用上的主要区别是后者需要一定的营养，以维持活细胞代谢需要，a正确；固定化酶技术一次只能固定一种酶，b正确；固定化细胞的酶不一定都是在细胞外起作用，c错误；固定化酶和固定化细胞都能反复使用，d正确。考点：本题考查固定化酶和固定化细胞的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。3某兴趣小组学习了酵母细胞的固定化技术后，以酵母菌为材料进行“固定化原生质体”实验。下列叙述错误的是（ ）a酵母菌去除细胞壁后更利于胞内物质的分泌b为了提高原生质体的形成率应尽量延长酶解时间c凝胶珠呈白色是因为海藻酸钠的浓度偏低d酶解法去壁制备原生质体应在等渗或略高渗透压的溶液中进行【答案】b【解析】酵母菌去除细胞壁后更利于胞内物质的分泌，a正确；原生质体的形成过程中不能延长酶解时间，否则或破坏细胞原生质体，b错误；凝胶珠呈白色是因为海藻酸钠的浓度偏低，包埋的酵母菌数量少，c正确；酶解法去壁制备原生质体应在等渗或略高渗透压的溶液中进行，防止原生质体在低渗溶液中会吸水涨破，d正确。【考点定位】制备和应用固相化酶【名师点睛】解答该题，关键要掌握以下2点：1、凝胶珠的颜色和形状：如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试刚形成的凝胶珠应在cacl2溶液中浸泡一段时间，以便ca2+与na+充分交换，形成的凝胶珠稳定。2、植物体细胞杂交是首先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体；用物理法（离心、振动、电刺激）或者化学法（聚乙二醇）诱导细胞融合，获得融合的原生质体；原生质体再生出细胞壁，获得杂种细胞；杂种细胞经过脱分化和再分化获得杂种植株。4下面制备固定化酵母细胞的正确步骤是（ ）配制cacl2溶液 海藻酸钠溶化 海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 酵母细胞活化 固定化酵母细胞abcd【答案】b【解析】试题分析：制备固定化酵母细胞的步骤是：酵母细胞活化配制cacl2溶液海藻酸钠溶化海藻酸钠溶液与酵母细胞混合固定化酵母细胞，b正确。考点：本题考查制备固定化酵母细胞的过程。5下列说法不正确的是（ ）a固定化酶和固定化细胞的方法包括包埋发、化学结合法和物理吸附法b固定化酶更适合采用化学结合法和物理吸附法c细胞由于个体大，多采用物理吸附法固定d固定化酶既能与反应物接触，又能与产物分离【答案】c【解析】固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法，酶分子较小，容易从包埋材料中漏出，因此酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定化，细胞多采用包埋法固定化，ab正确；细胞个大，难被吸附或结合，c错误；固定后的酶既能与反应物接触，又能与反应物分离，d正确。【考点定位】制备和应用固相化酶【名师点睛】使用酶、固定化酶、固定化细胞的比较： 直接使用酶固定化酶固定化细胞酶的种类一种或几种一种一系列酶制作方法 包埋法化学结合法、物理吸附法是否需要营养物质否否是缺点对环境条件非常敏感，易失活难回收，成本高，影响产品质量不利于催化一系列的酶促反应反应物不宜与酶接近，尤其是大分子物质，反应效率下降优点催化效率高，耗能低、低污染既能与反应物接触，又能与产物分离可以反复利用成本低，操作容易6下列有关酵母细胞固定化实验操作目的及结果分析，错误的是a.干酵母细胞处于休眠状态，需置于蒸馏水中活化b.配制海藻酸钠溶液时需要小火或间断加热，以防海藻酸钠焦糊c.若海藻酸钠的浓度偏低时凝胶珠呈白色，固定的细胞数目过少d.凝胶珠在cacl2溶液中浸泡时间的长短，不影响发酵效果【答案】d【解析】试题分析：凝胶珠在cacl2溶液中浸泡时间的长短，会影响酶的活性，所以要影响发酵效果，d错。考点：本题考查酶的固定化技术的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。7在制备固定化酵母细胞的实验中，不需要的操作是a用蒸馏水活化酵母细胞b采用小火间断加热的方法溶解海藻酸钠c在cacl2溶液中形成凝胶珠d将固定化酵母细胞装填反应柱进行发酵【答案】d【解析】试题分析：制备固定化酵母细胞的实验中，首先需要用蒸馏水活化酵母细胞，a正确；在配制海藻酸钠溶液时，要用小火间断加热，防止海藻酸钠溶液焦糊，b正确；实验的最后需要在cacl2溶液中形成凝胶珠，c正确；将固定化酵母细胞装填反应柱进行发酵属于固定酵母细胞的应用，不属于制备过程，d错误。考点：本题考查固定化酵母细胞，意在考查考生识记所列知识点，并能运用所学知识做出合理的判断或得出正确的结论的能力。8下列有关酵母细胞固定化实验操作目的及结果分析，错误的是 （ ）a干酵母细胞处于休眠状态，需置于蒸馏水中活化b配制海藻酸钠溶液时需要小火或间断加热，以防海藻酸钠焦糊c若海藻酸钠的浓度偏低时凝胶珠呈白色，固定的细胞数目过少d凝胶珠在cacl2溶液中浸泡时间的长短，不影响发酵效果【答案】d【解析】干酵母细胞处于休眠状态，需置于蒸馏水中活化，a正确；配制海藻酸钠溶液时需要小火或间断加热，以防海藻酸钠焦糊，b正确；若海藻酸钠的浓度偏低时凝胶珠呈白色，固定的细胞数目过少，c正确；凝胶珠在cacl2溶液中浸泡时间的长短，影响发酵效果，d错误。【考点定位】本题主要考查酵母细胞固定化技术。9如图所示的固定化方式中，适宜固定化酶的方法是 （ ）a. b. c. d. 【答案】d【解析】据图分析，表示化学结合法，将酶互相连接起来；表示包埋法，将酶包埋在细微网格内；表示物理吸附法，将酶吸附在体表面由于酶分子较小，不适用包埋法，用化学结合法和物理吸附法。【考点定位】本题主要考查固定化酶技术。10凝胶色谱法在装填色谱柱时，不得有气泡存在的原因是（ ）a气泡能与蛋白质发生化学反应b气泡阻碍蛋白质的运动c气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果d气泡会在装填凝胶的时候使凝胶不紧密【答案】c【解析】色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现气泡，必须重装，因为气泡会在色谱柱内形成无效的空隙，使本该进入凝胶内部的分子从这些空隙通过，搅乱洗脱液的洗脱次序，降低分离效果，故选c。【考点定位】凝胶色谱法11酶制剂、固定化酶、固定化细胞已经广泛地应用于各个领域，下列有关叙述错误的是a. 90 高温会使taq酶失去催化活性b. 制备固定化酶的方法主要有包埋法、交联法和吸附法c. 固定化酶固定时可能会造成酶的损伤而影响活性d. 固定化细胞可以催化一系列酶促反应【答案】a【解析】taqdna聚合酶是从一种水生栖热菌株中分离提取的，具有耐高温的特性，在90仍具有酶活性，a错误；固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法，b正确；某些反应产物可能与酶结合，致使酶的结构产生变化，从而改变酶的催化活性，c正确；固定化细胞在多步酶促反应中发挥连续催化作用，但如果反应底物是大分子物质，则难以自由通过细胞膜，从而限制固定化细胞的催化反应，d正确。【考点定位】制备和应用固相化酶【名师点睛】解答此题的关键是需要掌握固定化酶、固定化细胞的区别使用酶、固定化酶、固定化细胞的比较：直接使用酶固定化酶固定化细胞酶的种类一种或几种一种一系列酶制作方法物理吸附法、化学结合法、包埋法物理吸附法、包埋法是否需要营养物质否否是缺点对环境条件非常敏感，易失活难回收，成本高，影响产品质量不利于催化一系列的酶促反应反应物不宜与酶接近，尤其是大分子物质，反应效率下降优点催化效率高，耗能低、低污染既能与反应物接触，又能与产物分离可以反复利用成本低，操作容易12下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是a.利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用只是作为反应底物b.固定化酶的应用中，要控制好ph、温度和溶解氧c.利用固定化酶降解水中有机磷农药，需要提供适宜的营养条件d.固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显【答案】d 【解析】利用固定化酵母细胞进行发酵时，糖类除了作为反应底物外，还为酵母菌提供碳源，a错误；固定化酶的应用中，要控制ph、温度，但与溶解氧无关，b错误；利用固定化酶降解水体中的有机磷农药，是酶促反应，没有细胞参与，所以不需提供营养条件，c错误；固定化细胞技术固定的是一系列酶，所以在多步连续催化反应方面优势明显，d正确。【考点定位】固定化酶和固定化细胞 【名师点睛】固定化酶、固定化细胞的比较： 固定化酶固定化细胞酶的种类一种一系列酶制作方法吸附法、交联法、包埋法吸附法、包埋法是否需营养物质否是缺点不利于催化一系列的酶促反应反应物不宜与酶接近，尤其是大分子物质，反应效率下降优点既能与反应物接触，又能与产物分离可以反复利用成本低，操作简单13关于固定化酶和一般酶制剂在应用效果上的说法，错误的是 （ ）a固定化酶生物活性强，可长久使用b一般酶制剂应用后和产物混在一起，产物的纯度不高c一般酶制剂参加反应后不能重复利用d固定化酶可以反复利用，降低生产成本，提高产量和质量【答案】a【解析】试题分析：固定化酶与普通酶制剂相比,在活性上没有多大差别,固定化酶的成分也是蛋白质,蛋白质经过一定的时间后会变性失活,所以固定化酶一般能使用半年,不可能长久使用，所以a错误；一般酶制剂应用后和产物混在一起，产物的纯度不高，b正确；一般酶制剂参加反应后不能重复利用，c正确；固定化酶可以反复利用，降低生产成本，提高产量和质量，所以d正确。考点：本题考查固定化酶和一般酶制剂的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理判断或得出正确结论的能力。14下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述，错误的是 （ ）a固定化酶的主要目的是实现酶的重复利用b反应产物对固定化酶的活性没有影响c可用包埋法制备固定化酵母细胞d固定化细胞用于生产能分泌到细胞外的产物【答案】b【解析】固定化酶的主要目的是实现酶的重复利用，a正确；某些反应产物可能与酶结合，致使酶的结构产生变化，从而改变酶的催化活性，b错误；固定化技术包括包埋法、物理吸附法和化学结合法（交联法），由于细胞相对于酶来说更大，难以被吸附或结合，因此多采用包埋法，c正确；固定化细胞用于生产能分泌到细胞外的产物,d正确。【考点定位】制备和应用固相化酶。【名师点睛】固定化酶、固定化细胞的比较：固定化酶固定化细胞酶的种类一种一系列酶制作方法吸附法、交联法、包埋法吸附法、包埋法是否需要营养物质否是缺点不利于催化一系列的酶促反应反应物不宜与酶接近，尤其是大分子物质，反应效率下降优点既能与反应物接触，又能与产物分离；可以反复利用成本低，操15关于固定化酶中用到的反应柱理解正确的是( )a反应物和酶均可自由通过反应柱b反应物和酶均不能通过反应柱c反应物能通过，酶不能通过d反应物不能通过，酶能通过【答案】c【解析】固定化酶中用到的反应柱的底端装有分布着许多小孔的筛板，酶颗粒无法通过筛板上的小孔，而反应溶液却可以自由出入，所以c选项正确。【考点定位】制备和应用固相化酶16试分析下图中，与用海藻酸钠作载体制备固定化酵母细胞相似的是（ ）【答案】d【解析】试题分析：a是吸附法,常用于将酶固定，a项错误；b是载体结合法，多用于酶的固定，b项错误；c和d均是包埋法，其中c一般是将酶包埋在细微网格里，d是包埋在凝胶中。制备固定化酵母用的是包埋法，即将酶母菌包埋在海藻酸钠制成的凝胶中，所以与d相似，故d项正确，a、b、c项错误。考点：本题考查酵母细胞的固定化的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。17下列有关固定化酵母细胞制备的步骤，不恰当的是（ ）a应使干酵母与水混合并搅拌，以利于酵母菌活化b配制海藻酸钠溶液时要用小火间断加热方法c向刚溶化好的海藻酸钠溶液中加入已活化的酵母细胞，充分搅拌并混合均匀d将与酵母混匀的海藻酸钠液注入cac12溶液中，会观察到cac12溶液中有球形或椭球形的凝胶珠形成【答案】c【解析】应使干酵母与蒸馏水混合，利于酵母菌活化，a正确；配制海藻酸钠溶液时要用小火间断加热的方法，否则海藻酸钠会发生焦糊，b正确；刚溶化的海藻酸钠应冷却后再与酵母菌混合，否则温度过高会导致酵母菌死亡，c错误；将与酵母细胞混匀的海藻酸钠溶液匀速滴入cacl2溶液中，会观察到cac12溶液中有球形或椭球形的凝胶珠形成，d正确。【考点定位】制备和应用固相化酶【名师点睛】本题主要考查固定化细胞的相关知识点，回忆制作过程中的注意事项：（1）配制海藻酸钠溶液：小火、间断加热、定容，如果加热太快，海藻酸钠会发生焦糊（2）海藻酸钠溶液与酶母细胞混合：冷却后再混合，注意混合均匀，不要进入气泡（3）制备固定化酵母细胞：高度适宜，并匀速滴入（4）刚溶化的海藻酸钠应冷却后再与酵母菌混合，否则温度过高会导致酵母菌死亡18下列关于生物技术实践的叙述中，正确的是 （ ）a.用移液管稀释菌液时，吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀b.参与制作果酒、果醋和腐乳的菌种中只有毛霉是真核生物c.海藻酸铀溶液浓度过高会导致制作的凝胶珠颜色过浅呈白色d.用花菜提取dna 时加入食盐和洗涤剂的目的分别是充分研磨和瓦解细胞膜【答案】a【解析】试题分析：用移液管稀释菌液时，吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀，故a正确。果酒与酵母菌相关，果醋和醋酸菌相关，腐乳与多种霉菌相关，只有醋酸菌是原核生物，其他是真核生物，故b错。海藻酸钠溶液浓度过低会导致制作的凝胶珠颜色过浅呈白色，固定的酵母细胞少，故c错。用花菜提取dna 时加入食盐和洗涤剂的目的分别是溶解dna和瓦解细胞膜，故d错。考点：本题考查生物技术实践相关知识，意在考查考生能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用能力。19目前，酶已经大规模地应用于各个领域，下列属于应用中面临的实际问题的是( )。a酶通常对强酸、强碱、高温非常敏感，但对有机溶剂不敏感b酶的结构比较稳定，所以催化功能很高c酶用于生产时可能会混在产物中，影响产品质量d直接用于生产的酶可以多次利用【答案】c【解析】直接使用酶可导致酶混在产物中影响产品质量，且酶不能反复使用，故采用固定化酶技术更有利于提高产品质量、节省成本。20下列有关用海藻酸铺作为载体固定酵母细胞实验的叙述，正确的是（ ）a溶化海藻酸钠应采用酒精灯小火或间断加热b海藻酸钠的浓度过低，形成的凝胶珠内包埋的细胞过少c在酵母细胞的活化或配制cacl2溶液时，可使用自来水d利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用不只是作为反应底物【答案】abd【解析】试题分析：配制海藻酸钠溶液时，应采用酒精灯小火或间断加热，促进溶解，若加热太快，海藻酸钠会发生焦糊，a项正确；如果海藻酸钠浓度过低，形成的凝胶珠颜色过浅，所包埋的酵母细胞数目较少，b项正确；在酵母细胞的活化或配制cacl2溶液时，为避免杂菌污染，应使用蒸馏水，c项错误；利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用不只是反应底物，同时也为酵母细胞提供碳源和能量，d项正确。考点：本题考查酵母细胞的固定化的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。21如果反应物是大分子物质，不易采用哪种方法催化（ ）a.直接使用酶b.使用化学方法结合的酶c.使用固定化细胞d.使用物理吸附法固定的酶【答案】c【解析】试题分析：固定化细胞只适合于小分子物质的催化，不适用于大分子物质，c项错误。考点：本题考查酶的相关知识。二、非选择题22酵母菌与人们的日常生活密切相关，也是现代生物技术研究常用的生物。（1）制作固定化酵母细胞时，充分混合均匀的酵母细胞溶液可在饱和的_溶液中形成凝胶珠。若形成凝胶珠颜色过浅，则说明_。酵母细胞的固定化技术是包埋法，而制备固定化酶则不宜用此方法，原因是_。（2）利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可观察到的现象为_，同时会闻到酒味。利用酵母菌发酵产生酒精时要控制的必要条件是_。（3）利用玉米秸杆生产酒精时，水解秸杆所用的纤维素酶可来自微生物。分离产生该酶的微生物时，所需要的培养基为_（按功能分），培养基中的碳源为_。微生物培养时对培养基常用_灭菌。【答案】（1）cacl2 固定化酵母菌细胞数目较少 酶分子很小，容易从包埋材料中漏出（2）产生很多气泡 无氧（3）选择培养基 纤维素 高压蒸汽【解析】试题分析：（1）制作固定化酵母细胞时，充分混合均匀的酵母细胞溶液可在饱和的cacl2溶液中形成凝胶珠；若形成凝胶珠颜色过浅，则说明固定化酵母菌细胞数目较少；因为酶分子很小，容易从包埋材料中漏出，所以制备固定化酶不宜用包埋法，而是更适合采用化学结合和物理吸附法固定化。（2）酵母菌发酵可以产生co2和酒精，所以利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可观察到有很多气泡产生，同时会闻到酒味；利用酵母菌发酵产生酒精时的必要条件是无氧。（3）分离产生纤维素酶的微生物时，按功能分，所需要的培养基为选择培养基；培养基中的碳源为纤维素；微生物培养时常用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。考点：本题考查酶的研究与利用的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。23(一)漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程。(1)在步骤中，用_稀释制成不同浓度的样品悬液。(2)步骤中将保存在70%酒精中的_放在酒精灯火焰上，待火焰熄灭，将菌液涂布到整个平面，将培养皿_在37c恒温培养箱中培养2448小时，观察菌落数。(3)步骤应选择挑取涂布平板上长出的_，再通过划线进一步_。(4)步骤中，将菌种接种在_培养基中，在37c恒温培养箱中培养24h后，置于_冰箱中保存。(5)若该漆酶大量应用于环境修复，可先用石英砂对漆酶进行_(a.包埋b.共价偶联c.吸附d.交联)法固定，再进行工业化使用。(二)经研究表明，在多种肿瘤细胞中的top2a蛋白大量表达，因此成为抗肿瘤的研究靶点，某科研单位制作了top2a蛋白的单克隆抗体。请回答：(1)利用基因工程制备top2a蛋白：将top2a蛋白基因和质粒用_处理并连接成重组质粒，然后导入经_处理的大肠杆菌，并将大肠杆菌接种到含氨苄青霉素的lb液体培养基中培养，经离心得到菌体，破碎提纯得到top2a蛋白。(2)top2a蛋白单克隆抗体的制备:将top2a蛋白反复多次注射到小鼠体内，使其发生_，取经过免疫的小鼠b淋巴细胞和骨髓瘤细胞在物质_介导下发生细胞融合，形成杂交瘤细胞。并将各杂交瘤细胞单独分装培养，经筛选、_后，获得能