苏教版选修三 动物细胞工程的应用（第二课时）学案.doc

2.3动物细胞工程的应用（第二课时） 教学目标1.掌握动物细胞融合的原理、方法、过程与意义。2.掌握制备单克隆抗体的方法、过程和应用。一、细胞融合1细胞融合技术创立于20世纪60年代，是研究细胞间遗传信息的_、染色体上的_等的有效途径。细胞融合是指在一定的条件下将_细胞融合为_个细胞的过程。来源:2动物细胞融合的方法主要有_法(如电场法)、_法(如聚乙二醇法)和_法(如仙台病毒法)。目前，应用_法进行细胞融合的效率较高，且对细胞伤害小，易操作、控制和观察，因此在实验室被广泛使用。在细胞融合后，还需对融合细胞进行_和_。二、单克隆抗体1制备过程多种融合细胞_ _抗体2杂交瘤细胞的特点：_，产生_。3单克隆抗体的优点：_，_，产量大，容易标准化生产。4单克隆抗体的应用(1)治疗_，目前进入临床试验的单克隆抗体中有_以上用于治疗各种肿瘤。(2)单克隆抗体还可以用于治疗由于_的絮乱导致的各种疾病。(3)单克隆抗体用于_的治疗等等。课时训练基础落实1科学家用灭活的病毒把骨髓瘤细胞与免疫的b淋巴细胞融合，得到杂交瘤细胞，则灭活病毒的作用是()a病毒比较小，可钻入到细胞内b灭活的病毒已完全死亡，死亡的病毒可以让细胞聚集c灭活的病毒已失去感染活性，对各种动物细胞不造成破坏，但所保留的融合活性，可以使不同的动物细胞进行融合d灭活的病毒带有目的基因，通过融合可以让杂合细胞带有目的基因2动物细胞融合技术最重要的用途是制备单克隆抗体。米尔斯坦和柯勒选用b淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，从而得到单克隆抗体。杂交瘤细胞的主要特点是()ab淋巴细胞具有分泌特异性抗体的能力，但不能无限增殖b小鼠骨髓瘤细胞带有癌变特点，可在培养条件下无限增殖，但不能分泌特异性抗体c同时具有上述a、b特性d具有能在体外大量增殖的本领，同时又能分泌特异性抗体3单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和b淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 ()b淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞b淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞a bc d4近几年神舟飞船频频成功发射和着陆。在飞船上，科学家进行了无人搭载的空间动物细胞融合实验。该实验所依据的原理和促进细胞融合的方法分别是()a细胞的全能性、灭活病毒诱导融合b细胞的全能性、电刺激融合c生物膜的流动性、灭活病毒诱导融合d生物膜的流动性、电刺激融合5由单克隆抗体研制而成的“生物导弹”由两部分组成，一是“瞄准装置”，二是杀伤性“弹头”。下列对此叙述不正确的是()a“瞄准装置”是指识别肿瘤的单克隆抗体b“弹头”是由化学药物构成的c“弹头”具有特异性d“瞄准装置”具有特异性6新技术的建立和应用对生物学发展至关重要。下列技术(或仪器)与应用匹配正确的是(多选)()apcr技术扩增蛋白质b杂交瘤技术制备单克隆抗体c光学显微镜观察叶绿体的基粒d花粉离体培养培育单倍体植物能力提升7用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是()a将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的b淋巴细胞b用氯化钙作诱导剂，促使能产生抗体的b淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合c筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体d该杂交瘤细胞株的增殖方式和产物分别是有丝分裂和单克隆抗体8下列关于生物技术的有关说法，正确的是()a细胞具有全能性的原因是体细胞具有使后代细胞形成完整个体的能力b杂交瘤细胞的主要特点是既能在体外大量增殖，同时又能分泌特异性抗体c在基因操作的基本步骤中，实现功能表达不进行碱基互补配对d灭菌是指杀死一定环境中的所有微生物的细胞9.下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请据图回答下列问题：(1)请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。_。(2)在单克隆抗体制备过程中，之所以选用b淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有_、_的特性。(3)由图示可看出，单克隆抗体的制备过程运用了_和_等动物细胞工程技术手段。综合拓展10人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为rna病毒，该病毒表面的a蛋白为主要抗原，其疫苗生产和单克隆抗体制备的流程之一如下图。请回答：(1)过程代表的是_。(2)过程构建a基因表达载体时，必须使用_和_两种工具酶。(3)过程采用的实验技术是_，获得的x是_。(4)对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的_所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行_比较；或用图中的_进行特异性结合检测。答案一、1.转移基因定位2个或多个一2物理化学生物物理筛选检测二、1.脾脏细胞杂交瘤细胞能分泌所需抗体的细胞单克隆2.无限增殖单克隆抗体 3纯度高特异性强4.(1)恶性肿瘤30%(2)免疫系统(3)器官移植课时训练1c动物细胞融合常用灭活的病毒作诱导剂，是因为灭活的病毒不再具有感染活性，不会对细胞造成破坏，但仍可穿透细胞膜，促使不同的动物细胞融合。2d杂交瘤细胞具有b淋巴细胞和骨髓瘤细胞的特性，即既能产生特异性抗体，又能在体外大量增殖。3a单克隆抗体的制备过程中，骨髓瘤细胞和b淋巴细胞融合时，发生了以下三种情况：未发生融合的细胞(b淋巴细胞、小鼠骨髓瘤细胞)；自身融合的细胞(b淋巴细胞自身融合、小鼠骨髓瘤细胞自身融合)；骨髓瘤细胞与单个b淋巴细胞融合的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞是制备单克隆抗体必需的，因此要将其筛选出来。4c不管是动物细胞融合，还是原生质体融合，都是利用了生物膜具有流动性这一原理。动物细胞融合时最常用的诱导手段就是利用灭活的病毒诱导。5c单克隆抗体具有特异性识别肿瘤细胞等的作用，可以作为确定目标的“瞄准装置”。而“弹头”是由具有杀伤力的药物构成的，但它不具有特异性识别肿瘤细胞的功能。6bdpcr技术应用于dna的扩增，a选项错误；叶绿体的基粒属于细胞的亚显微结构，只有通过电子显微镜才能观察到，c选项错误；单克隆抗体的制备是通过已免疫的b淋巴细胞与骨髓瘤细胞杂交后实现的，属于杂交瘤技术，b选项正确；培育单倍体植物常采用花粉离体培养技术，d选项正确。7bb淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合需要灭活的病毒、聚乙二醇或物理因素来诱导，氯化钙不能作为诱导剂。氯化钙的作用是在基因工程中用于增大细胞壁的通透性，便于重组质粒进入微生物的细胞内。8b基因的表达、转录和翻译都有碱基的互补配对。灭菌指杀死一定环境中的所有微生物的细胞、芽孢和孢子。9(1)来源:(2)无限增殖产生特异性抗体(3)动物细胞融合动物细胞培养解析首先把小鼠骨髓瘤细胞与经特定抗原免疫过的小鼠b淋巴细胞进行融合获得杂交瘤细胞，然后筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，最后分别在体外或体内培养杂交瘤细胞，即可获得单克隆抗体。10(1)逆转录(2)限制性核酸内切酶(限制酶)dna连接酶(两空可以互换)(3)细胞融合杂交瘤细胞 (4)a蛋白核酸(基因)序列抗a蛋白的单克隆抗体解析(1)中心法则中，对于少数的以rna为遗传物质的病毒，其遗传信息的传递过程需要补充的过程有rna的逆转录和rna的复制过程，图中过程代表的是逆转录的过程。(2)基因工程的步骤中构建基因表达载体需要限制酶来切割以获取目的基因，同时需要相同的限制酶切割载体以获取与目的基因相同的黏性末端，再通过 dna连接酶连接目的基因和载体。(3)过程是将骨髓瘤细胞与b淋巴细胞融合的过程，获得的细胞叫杂交瘤细胞，其具备了骨髓瘤细胞的无限增殖的特性和b淋巴细胞的产生抗体的特性，从而能制备单克