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文档简介
dna的粗提取与鉴定一、单选题1下列关于“dna的粗提取与鉴定”实验原理与方法的叙述,错误的是a. dna在nacl溶液中的溶解度随着溶液浓度的变化而变化b. 向鸡血细胞液中加入蒸馏水的目的是使其吸水胀破,释放出其中的dnac. 把dna加入二苯胺溶液,在沸水浴中颜色不变,只有冷却后才能观察到蓝色d. 向滤液中加入冷却酒精的目的是除去dna中的杂质,纯化dna【答案】c【解析】试题分析:dna在014mol/lnacl溶液中的溶解度最低,高于或低于这个浓度,溶解度上升,a项正确;鸡血细胞液中加入蒸馏水的目的是使其吸水涨破,释放出其中的dna,b项正确;在沸水浴条件下,dna遇二苯胺会被染成蓝色,c项错误;dna不溶于酒精,因此向滤液中加入冷却酒精的目的是除去dna中的杂质,纯化dna,d项正确。考点:dna的粗提取与鉴定【名师点睛】1实验原理(1)dna与蛋白质在不同浓度的nacl溶液中溶解度不同溶解规律2 mol/l nacl溶液014 mol/l nacl溶液dna溶解析出蛋白质nacl溶液物质的量浓度从2 mol/l逐渐降低的过程中,溶解度逐渐增大部分发生盐析沉淀溶解(2)dna不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精,利用这一原理可将dna与蛋白质进一步分离。(3)dna二苯胺沸水浴加热,蓝色。2dna的粗提取与鉴定实验中的“2、3、4”加蒸馏水2次加到鸡血细胞液中,使血细胞吸水涨破;加到含dna的2 mol/l的nacl溶液中,使nacl溶液的物质的量浓度下降到014 mol/l,使dna析出用纱布过滤3次过滤血细胞破裂液,得到含细胞核物质的滤液;滤取014 mol/l的nacl溶液中析出的dna(黏稠物);过滤溶有dna的2 mol/l的nacl溶液用nacl溶液4次加2 mol/l的nacl溶液,溶解提取的细胞核物质;用014 mol/l的nacl溶液使dna析出;用2 mol/l的nacl溶液,溶解滤取的dna黏稠物;用2 mol/l的nacl溶液,溶解丝状物用于鉴定dna2在20的实验条件下可顺利完成的是( )a果酒的制作b用二苯胺试剂鉴定dnac大鼠神经细胞的培养d制备用于植物组织培养的固体培养基【答案】a【解析】试题分析:酒精发酵一般在1825,a正确。二苯胺试剂鉴定dna需要沸水浴,b错。大鼠神经细胞的培养需要接近大鼠体温40,c错。制备用于植物组织培养的固体培养基需要高温高压灭菌,d错。考点:本题考查果酒制作、细胞培养和组织培养相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识的网络结构能力。3在dna粗提取与鉴定实验中,将第三次过滤获得的纱布上含有的dna的黏稠物(含有较多杂质)分别处理如下:序号操作过程放入2 mol/l的nacl溶液,搅拌后过滤再加0.14 mol/l的nacl溶液,搅拌后过滤再加入冷却的、同体积的95%酒精溶液,用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物上述操作过程正确的是()a bc d【答案】c【解析】第三次过滤后纱布上的是粗提取的dna,此dna还含有杂质,因此将其溶于2 mol/l的nacl溶液中,再进行过滤,以除去不溶于2 mol/l的nacl溶液的杂质。然后向滤液中加入同体积的、冷却的95%酒精即可析出dna。然后挑出dna进行鉴定。4以菜花为实验材料进行“dna粗提取与鉴定”的实验中,下面操作与目的错误的是 ( )a. a b. b c. c d. d【答案】a【解析】菜花属于高等植物,植物细胞具有细胞壁,加入蒸馏水不会吸水涨破,a错误;dna在氯化钠溶液中的溶解度是随着氯化钠浓度的变化而变化的。当氯化钠的物质的量浓度为0.14 mol/l时,dna的溶解度最低,然后加入食盐dna会溶解,b正确;加入洗涤剂会瓦解细胞膜,c正确;dna不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精,故加入95%冷却的酒精可析出dna,d正确。5下表是生物科学史上一些经典实验的叙述,表中“方法与结果”和“结论或观点”能相匹配的是()选项方法与结果结论或观点a观察到植物通过细胞分裂产生新细胞;观察到动物受精卵分裂产生新细胞所有的细胞都来源于先前存在的细胞b单侧光照射下,金丝雀草胚芽鞘向光弯曲生长,去尖端的胚芽鞘不生长也不弯曲生长素具有极性运输的特点c将载有水绵和好氧细菌的装片置于黑暗且缺氧的环境中,用极细光束照射后,细菌集中于有光照的部位光合作用产生的氧气来自于水d将活的r型肺炎双球菌与加热杀死的s型肺炎双球菌混合后注入小鼠体内,小鼠体内出现活的s型菌dna是主要遗传物质【答案】a【解析】细胞学说要点之一是新细胞可以从老细胞中产生,a项符合细胞学说的基本观点。b项中只能说明胚芽鞘的向光性与尖端有关,b不匹配。c项说明光合作用的场所是在叶绿体,光合作用需要光照条件,c不匹配。d项是格里菲思的肺炎双球菌的体内转化实验,说明s型菌中存在着转化因子,d错误。6下列科学事件中没有应用“假说演绎法”的是( )a.孟德尔的豌豆杂交实验b.萨顿推论出基因在染色体上c.摩尔根的果蝇眼色遗传实验d.沃森和克里克对dna复制方式的提出与证实【答案】b【解析】萨顿推论出基因在染色体上运用了类比推理的方法。7假设32p、35s分别标记了一个噬菌体中的dna和蛋白质,其中dna由5000个碱基对组成,腺嘌呤占全部碱基的30%。用这个噬菌体侵染不含标记元素的大肠杆菌,共释放出50个子代噬菌体。下列叙述正确的是( )a子代噬菌体中可能含有32p、35sb该过程至少需要1105个鸟嘌呤脱氧核苷酸c含32p与只含31p的子代噬菌体的比例为1:24d噬菌体增殖需要细菌提供模板、原料和酶等【答案】c【解析】噬菌体侵染大肠杆菌时只有它的dna进入细菌体内,在细菌体内噬菌体dna进行复制和控制自身蛋白质的合成(细菌提供原料),因此,子代噬菌体中只有两个噬菌体的dna含有32p,而所有噬菌体的蛋白质都不含35s,a错误;噬菌体的dna分子中鸟嘌呤脱氧核苷酸的数量为2000个,50个子代dna中有两个dna分子中各有一条链是原来dna分子保留下来的,因此,合成50个子代dna需要鸟嘌呤脱氧核苷酸的数量为200049=98000个,b错误;含32p与只含31p的子代噬菌体的比例为2:48=1:24,c正确;噬菌体增殖需要细菌提供原料、酶、能量等,但模板是噬菌体提供的,d错误。8关于还原糖、蛋白质和dna的鉴定实验,下列叙述正确的是a. 在甘蔗茎的组织样液中加入双缩脲试剂,温水浴后液体由蓝色变成砖红色b. 在大豆种子匀浆液中加入斐林试剂,液体由蓝色变成紫色c. 提取dna时,在切碎的洋葱中加入适量洗涤剂和食盐,充分研磨,过滤并弃去滤液d. 将dna粗提物溶解在2 mol/lnacl溶液中,加入二苯胺试剂,沸水浴后液体由无色变成蓝色【答案】d【解析】【分析】生物组织中化合物的鉴定:(1)斐林试剂可用于鉴定还原糖,在水浴加热的条件下,溶液的颜色变化为砖红色(沉淀);(2)蛋白质可与双缩脲试剂产生紫色反应;(3)脂肪可用苏丹染液(或苏丹染液)鉴定,呈橘黄色(或红色);(4)淀粉遇碘液变蓝;(5)甲基绿能使dna呈绿色,吡罗红能使rna呈绿色,二苯胺与dna在水浴加热的条件下产生蓝色反应。【详解】甘蔗茎的组织样液富含蔗糖,而蔗糖属于非还原糖,且检测还原糖的试剂是斐林试剂而不是双缩脲试剂,a错误;大豆种子中富含蛋白质,先后加入双缩脲试剂a液和b液摇匀后,液体由蓝色变成紫色,b错误;提取dna时,在切碎的洋葱中加入适量洗涤剂和食盐,充分研磨,过滤并弃去滤纸上的粘稠物,留下滤液,c错误;将dna粗提物溶解在2mol/lnacl溶液中,加入二苯胺试剂并水浴加热,溶液由无色变成蓝色,d正确。【点睛】解答本题的关键是注重平常的积累,识记常见的显色反应,明确不同的化合物可以用不同的显色剂进行鉴定,并注意不同的鉴定实验中的特别注意事项。9(2016届湖北省高三下学期5月模拟考试 理综生物试卷)赫尔希和蔡斯用噬尚体侵染太肠杆菌,离心后,甲组上清液放射性低,沉淀物放射性高;乙组刚好相反。下列说法正确的是( )a甲组的噬菌体是用35s标记其蛋由质b乙组的噬菌体是用32p标记其蛋白质c甲组产生的子代吨阐体均含有放射性d乙组产生的子代噬菌体均不含放射性【答案】d【解析】试题分析:甲组上清液放射性低,沉淀物放射性高,说明甲组标记的是噬菌体的dna,乙组刚好相反,说明乙组标记的是噬菌体的蛋白质,根据t2噬菌体侵染细菌的特点,只有dna进入细菌体内,蛋白质没有侵入,因此乙组产生的子代噬菌体均不含放射性,d正确。考点:噬菌体侵染细菌实验【名师点睛】噬菌体的结构:蛋白质外壳(c、h、o、n、s)+dna(c、h、o、n、p)。2、噬菌体繁殖过程:吸附注入(注入噬菌体的dna)合成(控制者:噬菌体的dna;原料:细菌的化学成分)组装释放。3、t2噬菌体侵染细菌的实验步骤:分别用35s或32p标记噬菌体噬菌体与大肠杆菌混合培养噬菌体侵染未被标记的细菌在搅拌器中搅拌,然后离心,检测上清液和沉淀物中的放射性物质。10图1、2分别为“dna的粗提取与鉴定”实验中部分操作示意图,下列有关叙述正确的是a. 图1、2中加入蒸馏水的目的相同b. 图1、2中完成过滤之后都保留滤液c. 图2中过滤时的盐溶液浓度约为0.014mol/ld. 在图1滤液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质【答案】d【解析】析图1:图1表示加入蒸馏水让鸡血细胞吸水胀破,释放dna;分析图2:图2表示加水稀释,使dna逐渐析出。由以上分析可知,图1、2中加入蒸馏水的目的不相同,a错误;图1中完成过滤之后要保留滤液,而图2中加水后dna逐渐析出,因此过滤后要去除滤液,b错误;图2中过滤时的盐溶液浓度约为0.14mol/l(此时dna的溶解度最低),c错误;嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能分解去除蛋白质,因此在图1滤液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质,d正确。【点睛】本题结合模式图,考查dna的粗提取和鉴定,对于此类试题,需要考生注意的细节较多,如实验的原理、实验采用的方法、实验现象等,需要考生在平时的学习过程中注意积累。11再利用鸡血进行“dna的粗提取与鉴定”的实验中,下列相关叙述正确的是a. 洗涤剂能瓦解细胞膜并增加dna在nacl溶液中的溶解度b. 用蒸馏水将nacl溶液浓度调至0.14mol/l,除去析出物c. 将丝状物溶解在2mol/lnacl溶液中,加入二苯胺试剂即成蓝色d. 通过调节nacl溶液的浓度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除部分杂质【答案】d【解析】洗涤剂能瓦解细胞膜,但不能增加dna在nacl 溶液中的溶解度,a错误;dna在0.14mol/l的氯化钠中溶解度最低,所以用蒸馏水将nacl溶液浓度调至0.14mol/l的目的是获得粘稠物,b错误;dna丝状物溶解在2 mol/lnacl溶液中,加入二苯胺试剂后需要沸水浴才会呈现蓝色,c错误;dna在不同浓度的nacl溶液中dna溶解度不同,dna在2mol/lnacl溶液中溶解度最大,在0.14mol/lnacl溶液中溶解度最小酶具有专一性,木瓜蛋白酶可以水解dna中的蛋白质类杂质,d正确。【点睛】解答本题,关键要掌握dna粗提取和鉴定的原理:1、dna的溶解性:dna和蛋白质等其他成分在不同浓度nacl溶液中溶解度不同(dna在0.14mol/l的氯化钠中溶解度最低);dna不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。2、dna对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同。3、dna的鉴定:在沸水浴的条件下,dna遇二苯胺会被染成蓝色。12在dna的粗提取和鉴定的实验中,提取鸡血细胞的核物质和析出含dna的粘稠物的操作过程中均用到蒸馏水,其作用在于()a. 前者用来溶解血细胞,后者用来溶解dnab. 前者使dna从核中分离出来,后者使dna析出c. 前者用来分离细胞核和细胞质,后者用来提取dnad. 前者使血细胞吸水破裂,后者用来稀释nacl溶液【答案】d【解析】在dna粗提取的实验中,先后两次向烧杯中加入蒸馏水的作用分别是使血细胞吸水涨破,释放dna;降低nacl浓度,使dna析出,故选d。【点睛】解答本题关键要知道dna在0.14mol/lnacl溶液中的溶解度最低,才能很好理解第二次加蒸馏水的作用。13关于“dna粗提取和鉴定”的实验原理的叙述中,正确的是a.用猪血为实验材料的原因是猪血的红细胞有细胞核,dna含量多b.利用 dna 在2mol/l的氯化钠溶液中溶解度最低,易析出的特性提取dnac.利用 dna 不溶于酒精,而细胞中的其他物质可溶于酒精的特性提纯dnad.利用dna与二苯胺作用而显现紫色的特性鉴定dna【答案】c【解析】试题分析:猪血红细胞不含细胞核和各种细胞器,不含dna,a错误;dna在2mol/l的氯化钠溶液中溶解度最高,b错误;利用dna不溶于酒精,而细胞中的其他物质可溶于酒精的特性提纯dna,c正确;利用dna与二苯胺作用而显现蓝色的特性鉴定dna,d错误。考点:本题主要考查dna粗提取和鉴定的相关知识,意在考查考生对所学知识的理解,把握知识间的内在联系的能力。14如下图是有关“dna的粗提取与鉴定实验”的原理、操作图,相关叙述不正确的是 ( )a. 图a中m点的物质的量浓度为0.14 moll-1b. 图b中加蒸馏水的目的是析出dnac. 用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同d. 图c操作目的是去除不溶于高浓度nacl的杂质【答案】c【解析】nacl溶液的浓度为0.14mol/l时,dna的溶解度最小,dna的析出量最高,因此图a中m点的浓度为0.14mol/l,a正确;图b中加蒸馏水的目的是降低nacl的浓度,使dna逐渐析出,b正确;用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤不完全相同,如动物细胞破碎的方法是加入蒸馏水,而植物细胞破碎的方法是研磨,还需要加入食盐和洗涤剂,c错误;dna在高浓度nacl溶液中的溶解度高,因此图c操作目的是去除不溶于高浓度nacl的杂质,d正确。15对下列生物学实验现象形成原因的分析,不合理的是选项实验现象原因a色素提取液的颜色较浅加入无水乙醇的量过大b培养的菊花愈伤组织被杂菌污染接种时无菌操作不严格c尿素培养基上少数菌落周围没有红色环带这些细菌可能不以尿素作为氮源d从洋葱细胞提取dna,加入二苯胺,沸水浴后未显现蓝色 处理洋葱细胞研磨液时为去除杂 质加入了蛋白酶a. a b. b c. c d. d【答案】d【解析】加入无水乙醇的量过大,会使提取的色素溶液浓度过低,最终导致色素带上的颜色较浅,a正确;植物组织培养要求严格无菌,因此造成杂菌污染的原因是无菌操作不严格,b正确;分解尿素的细菌能够产生脲酶,将尿素分解为氨,从而使培养基的ph升高,会使酚红指示剂变红,故出现红色环带。而那些不以尿素为氮源的细菌不会使ph升高,也就不会出现红色环带,c正确;提取dna实验中加入蛋白酶的作用是分解蛋白质,有利于颜色反应。二苯胺试剂需要现用现配,否则会影响鉴定效果,d错误。二、非选择题16【生物选修1:生物技术实践】关于dna粗提取的实验材料的选择,也经过了多次实验效果的比较,最终选择鸡血做实验材料的原因是什么?请回答下列问题:(1)鸡血细胞中红细胞 ,家鸡属于鸟类,新陈代谢旺盛,因而血液中 细胞数目较多,可以提供丰富的 。(2)实验前由老师制备血细胞液供同学们做实验材料,而不用鸡全血,主要原因是 。(3)生活在牧区的人们,采集牛、羊和马血比较方便,若他们按实验要求完成实验步骤后,结果是 ,这是因为这些动物和人一样,成熟红细胞中 ,但若改用动物肝脏做实验材料,实验能顺利进行,这是因为 。【答案】(1)含细胞核红dna(2)鸡血细胞中dna相对含量高(3)很难提取到dna成熟红细胞中无细胞核肝细胞有细胞核(4)研磨【解析】(1)鸡红细胞中含有成形的完整的细胞核,而且红细胞数量比较多,因而dna量也较丰富。(2)鸡的全血包括血浆和血细胞,血浆中无dna,全血中除去血浆后即是浓缩的血细胞液,dna的相对含量提高了。(3)哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核,仅靠白细胞和淋巴细胞中的少数dna,在实验中很难提取到,但肝细胞含有细胞核,并且肝组织易破坏,有利于dna的提取。(4)若使肝脏组织易分离,将肝脏组织剪碎、研磨是一种简便易行的方法。【考点定位】本题考查dna的粗提取相关知识,意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。【名师点睛】易错警示 (1)dna粗提取与鉴定实验的易错点本实验不能用哺乳动物成熟红细胞作实验材料,原因是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。可选用鸡血细胞作材料。实验中两次使用蒸馏水,第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破放出dna,第二次的目的是稀释nacl溶液,使dna从溶液中析出。17(1)从自然界中获得的微生物需经过_ 才能应用于工业生产。培养微生物时常用_ 法对固体培养基进行灭菌处理,为检测灭菌效果可对培养基进行_ 。(2)某同学在制作葡萄酒的过程中,为了发酵过程的安全,发酵阶段需适时拧松瓶盖,但不能完全打开,主要目的是_。制作葡萄酒利用的微生物适合生长的温度是_ 。(3)玫瑰精油的化学性质稳定,难溶于水,易溶于有机溶剂,挥发性较强,适宜采用_ 法进行提取。经上述方法提取后可收集到乳白色的乳浊液中加入_(填“nacl”或“无水na2so4)使其分层。(4)使用鸡血提取dna时,需在鸡血中加入柠檬酸钠,目的是_。使用二苯胺鉴定dna时,在沸水浴条件下,dna于二苯胺反应呈现_色。【答案】 分离和纯化培养 高压蒸汽灭菌 不接种培养(或空白培养) 排出co2,防止空气中的杂菌进入发酵瓶,造成污染,影响发酵 20左右 水蒸气蒸馏 nacl 防止血液凝固 蓝【解析】【试题分析】本题考查微生物的培养与分离、果酒的制作、植物有效成分的提取、dna的粗提取与鉴定等相关知识,题目比较简单,考生只需根据题意梳理相关知识点,对各小题进行分析作答即可。(1)从自然界中获得的微生物需经过分离和纯化培养才能应用于工业生产;培养微生物时常用高压蒸汽灭菌法对固体培养基进行灭菌处理,为检测灭菌效果可对培养基进行不接种培养(或空白培养)。(2)果酒发酵要不断排出二氧化碳,为防止空气中杂菌进入发酵瓶,造成污染,影响发酵,同时为保证发酵过程的安全,要适时拧松瓶盖,但不能完全打开;制作葡萄酒利用的微生物是酵母菌,其适合生长的温度是20左右。(3)玫瑰精油的化学性质稳定,难溶于水,易溶于有机溶剂,挥发性较强,适宜采用水蒸气蒸馏法进行提取;要将玫瑰精油与水分开,只需向收集到的乳白色的乳浊液中加入nacl,增加盐的浓度,就会出现明显的分层。(4)使用鸡血提取dna时,需在鸡血中加入柠檬酸钠,目的是防止血液凝固。使用二苯胺鉴定dna时,在沸水浴条件下,dna与二苯胺反应呈现蓝色。18【生物-选修3 现代生物科技专题】(15分)(1)ips细胞是利用逆转录病毒将oct3/4、sox2、klf4和c-myc等四个基因转入分化的体细胞中诱导其成为类似胚胎干细胞的一种细胞。将四个目的基因导入体细胞之前,通过_技术进行迅速扩增,然后再与逆转录病毒结合导入体细胞,逆转录病毒所起的作用是_。(2)利用ips细胞技术可以治疗白血病等顽症。将患者的体细胞诱导成为ips细胞后进行基因改造,再定向诱导其分化成为造血干细胞后输入患者体内,可达到治愈疾病的目的。其优点是既解决了移植器官短缺问题,又不存在_和伦理争议。(3)我国科学家运用基因工程技术,将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达培育出了抗虫棉。转基因作物的种植使害虫得到有效控制,减少了农药的使用量,保护了生态环境。与此同时,人们对转基因生物的安全性提出了质疑,主要体现
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