人教版选修三 2．2　2．2.2　动物细胞融合与单克隆抗体 学案.doc

22.2动物细胞融合与单克隆抗体1. 掌握动物细胞融合技术。2.理解单克隆抗体技术。(重、难点)3了解动物细胞融合和单克隆抗体技术的应用。(重点)一、动物细胞融合(阅读教材p52)概念是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称细胞杂交原理细胞膜的流动性结果形成杂交细胞诱导因素聚乙二醇(peg)、灭活的病毒、电激等应用成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段；制备单克隆抗体意义克服了远缘杂交的不亲和性二、单克隆抗体(阅读教材p52p54).传统抗体的获得(1)方法：向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体；从动物血清中分离所需抗体。(2)缺陷：产量低、纯度低、特异性差。2单克隆抗体的制备过程.单克隆抗体的优点及应用(1)优点：特异性强、灵敏度高、产量高。(2)应用作为诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点。用于治疗疾病和运载药物。 判一判(1)(2018曲阜高二检测)细胞融合技术与传统的有性杂交相比，其优越性在于能定向地改造生物的性状。()(2)(2018南京师大附中高二期中)制备单克隆抗体时，要选用已免疫的b淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞。()(3)(2018南京师大附中高二期中)b淋巴细胞不能产生抗体，而浆细胞能产生抗体。()(4)动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体能体现细胞的全能性。()(5)动物细胞融合和植物体细胞杂交的结果是相同的。()动物细胞融合结合下面动物细胞融合的过程，探究下列问题：(1)融合过程：细胞膜融合细胞质融合细胞核融合。(2)细胞膜融合的过程体现出细胞膜具有一定的流动性。(3)融合后重组细胞的特点：融合形成的杂种细胞具有两种细胞的遗传信息，通过动物细胞培养，杂种细胞表现出两个亲本细胞的特点。植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性和植物细胞的全能性细胞膜的流动性步骤酶解法去掉细胞壁后，诱导原生质体融合，形成杂种体细胞，再经过植物组织培养形成杂种植株分散成单个细胞后诱导细胞融合诱导方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法、灭活病毒结果形成杂种植株形成杂种细胞1下列关于动物细胞融合的说法，错误的是()a动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程b动物细胞融合需要用纤维素酶处理c动物细胞融合时需要人工诱导d诱导动物细胞融合常用的方法有：聚乙二醇、灭活的病毒、电激等答案：b2下列对植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较，描述正确的是 ()a动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导融合的方法也完全相同b只有植物体细胞杂交可跨越种属间的生殖隔离，突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能c利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为生产单克隆抗体开辟了新途径d目前科学家终于实现了两个植物物种间的体细胞杂交，得到了同时具有两个物种遗传物质的超级植物，并使它们的性状全部得以体现解析：选c。动物细胞融合的诱导方法有生物方法，如用灭活的病毒，而植物原生质体融合没有生物方法；两个植物物种间的体细胞杂交，得到了同时具有两个物种遗传物质的超级植物，并不一定使它们的性状都能得以体现，这是基因选择性表达的结果。 生物工程技术产生后代个体的遗传物质或基因来源(1)转基因生物：目的基因来自外源生物，绝大多数基因来自两个亲本。(2)杂种植株：遗传物质来自融合的两个亲本细胞。(3)经细胞培养获得的动物细胞：遗传物质只来自一个亲本。(4)动物细胞融合形成的杂交细胞：遗传物质来自融合的两个亲本细胞。(5)克隆动物：细胞核中的遗传物质来自供体动物，细胞质中的遗传物质来自提供卵母细胞的动物个体。单克隆抗体结合下图探究制备单克隆抗体的流程。(1)第一步：向免疫小鼠体内注射特定的抗原蛋白，然后从小鼠体内获得已免疫的b淋巴细胞；该细胞能产生单一抗体。(2)第二步：用电激法、聚乙二醇法、灭活的病毒法等，诱导两种细胞发生融合，这时得到的融合细胞除了杂交瘤细胞，还有b淋巴细胞相互融合的细胞和骨髓瘤细胞相互融合的细胞。(3)第三步：用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞。然后再从杂交瘤细胞群中选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。这时的杂交瘤细胞既能分泌抗体又能大量增殖。(4)第四步：克隆化培养杂交瘤细胞。(5)第五步：将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠的腹水中提取单克隆抗体。(1)融合后的细胞，在培养时通过什么方式进行繁殖？细胞中染色体数目与淋巴细胞相比有何不同？提示：有丝分裂。融合后细胞内染色体数目加倍。(2)筛选过程中对细胞克隆培养时，在特定培养基上使每个孔一个细胞的目的是什么？提示：使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的(或单一细胞培养以保证抗体的纯度)。1植物体细胞杂交和单克隆抗体制备的比较比较项目植物体细胞杂交(番茄马铃薯植株)单克隆抗体制备第1步原生质体的制备(酶解法)正常小鼠的处理(注射灭活抗原)第2步原生质体的融合(物、化法)动物细胞融合(物、化、生法)第3步杂种细胞的筛选和培养杂交瘤细胞的筛选和培养第4步杂种植株鉴定提纯单克隆抗体(特异性强、灵敏度高)融合前处理酶解法除去细胞壁：纤维素酶、果胶酶注射特定抗原，免疫处理正常小鼠意义和用途克服有性远缘杂交不亲和的障碍；培育作物新品种制备单克隆抗体；有助于疾病的诊断、治疗、预防2.浆细胞、骨髓瘤细胞和杂交瘤细胞的比较细胞类型来源特点浆细胞由b淋巴细胞受抗原刺激后增殖分化而来能产生单一抗体，但不能无限增殖骨髓瘤细胞从骨髓肿瘤中提取能无限增殖，但不能产生抗体杂交瘤细胞浆细胞与骨髓瘤细胞融合而成既能产生抗体，又能无限增殖3.两次筛选的比较第一次筛选：由于细胞融合是随机的，因此细胞混合物中融合细胞将以多种形式出现，因此必须从中筛选出既能分泌抗体，同时又能大量增殖的杂交瘤细胞。第二次筛选：从杂交瘤细胞群中选出能产生专一抗体的特异性杂交瘤细胞。交汇点免疫调节(1)免疫类型：人体的免疫分为_和特异性免疫；特异性免疫又包括_和_。(2)免疫过程体液免疫：b淋巴细胞接受抗原刺激后增殖、分化，大部分分化为_细胞，产生抗体，小部分分化为_细胞。细胞免疫：t细胞接受抗原刺激后，分化形成_，然后与被抗原入侵的_细胞密切接触，使其裂解死亡。答案：(1)非特异性免疫体液免疫细胞免疫(2)浆记忆效应t细胞宿主 1关于应用动物细胞工程技术获取单克隆抗x抗体的具体操作步骤如下，其中对单克隆抗体制备的相关叙述不正确的是()将x抗原注入小鼠体内，获得能产生抗x抗体的b淋巴细胞从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞利用促细胞融合因子使两种细胞发生融合将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔中培养筛选出能产生抗x抗体的杂交瘤细胞从腹水中提取抗体a实验顺序应当是b过程中产生多个杂交瘤细胞的过程也属于克隆c过程中获得的细胞均可无限增殖d到过程中通常要经过两次筛选解析：选c。诱导动物细胞融合后，b淋巴细胞自身融合的细胞不能无限增殖。2对于下面制备单克隆抗体过程示意图的叙述，不正确的是()a图中有1处明显错误b中两两融合的细胞有3种，筛选保留了1种c中杂交瘤细胞均能产生抗体d可以无限增殖并分泌相应抗体解析：选c。图中的错误是用于提取b淋巴细胞的小鼠没有经过免疫，a正确；为第一次筛选，目的是筛选出杂交瘤细胞，b正确；杂交瘤细胞是由b淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的，但由脾脏中提取的b淋巴细胞包括非免疫的b淋巴细胞和已免疫的浆细胞，因此，杂交瘤细胞不一定都能产生抗体，c错误；是经过两次筛选得到的杂交瘤细胞群，具有无限增殖和分泌相应抗体的特点，d正确。核心知识小结要点回眸答题必备 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。