Bioruptor Plus 安装使用手册.pdf

GeneChannel Biotech Inc 北京景晟科科技股份有限公司 维修服务 010 84801315 Bioruptor 使用手册第 1 页 Bioruptor Plus UCD 300 使用手册使用手册 上海博谊生物科技有限公司 GeneChannel Biotech Inc 北京景晟科科技股份有限公司 维修服务 010 84801315 Bioruptor 使用手册第 2 页 仪器组成仪器组成 1 超声波主机 2 超声波水槽 3 样本旋转组件 反馈功率监控装置 数码定时器 电源开关 超声波停止按键 超声波功率设定按键 超声波启动按键 上海博谊生物科技有限公司 GeneChannel Biotech Inc 北京景晟科科技股份有限公司 维修服务 010 84801315 Bioruptor 使用手册第 3 页 4 电源线 5 控制组件连接线 6 金属抗噪音外箱 上海博谊生物科技有限公司 GeneChannel Biotech Inc 北京景晟科科技股份有限公司 维修服务 010 84801315 Bioruptor 使用手册第 4 页 7 电源供应连接器 8 适配器 举例 9 冷却循环器 选配 10 电磁阀 上海博谊生物科技有限公司 GeneChannel Biotech Inc 北京景晟科科技股份有限公司 维修服务 010 84801315 Bioruptor 使用手册第 5 页 安装安装 1 电源供应连接器设定 先到电源供应连接器背后 确认连接器上的电压与当地的电压相符 若不符合当地电压 请用扁平头螺丝刀将外罩打开 再用扁平头螺丝刀将 power inlet 撬出 并转换到与当地相符的电压位置 2 将电源供应连接器与超声波主机相连 Power inlet 电源供应连接器连接处 上海博谊生物科技有限公司 GeneChannel Biotech Inc 北京景晟科科技股份有限公司 维修服务 010 84801315 Bioruptor 使用手册第 6 页 当电源供应连接器与超声波主机相接时 请确保所有的 pin 脚都在正确的位置 与超声波主机上 相对应 pin 角插槽的精准相接 插入超声波主机时 请确认图上的定位点朝上 插入主机后将内圈卡榫顺时针转紧 3 将超声波主机通过金属抗噪音箱与超声波水槽相连 先将金属抗噪音箱左上角的橡胶保护盖取下 并将控制组件连接线从中穿入 此配件可确保控制组件连接线与金属抗噪音箱相连 逆时针旋转配件前端育金属抗噪音箱密合 但切勿转太紧伤及控制组件连接线 定位点 上海博谊生物科技有限公司 GeneChannel Biotech Inc 北京景晟科科技股份有限公司 维修服务 010 84801315 Bioruptor 使用手册第 7 页 4 将控制组件连接线与超声波水槽相连 连接后将超声波水槽放入金属抗噪音箱中 5 将样本旋转组件与超声波水槽连接 连接后请将黑色旋钮旋紧 请注意请注意 搬动超声波水槽时搬动超声波水槽时 请务必用双手从超声水槽槽底抱起水槽请务必用双手从超声水槽槽底抱起水槽 千万不可以手指提起水槽 边缘的不锈钢接缝处 千万不可以手指提起水槽 边缘的不锈钢接缝处 以免使不锈钢槽与主槽体分离造成无法修复的损坏以免使不锈钢槽与主槽体分离造成无法修复的损坏 6 将主机与主机控制连接线相连 并且出插上电源线 最后将主机安置于金属抗噪音箱顶 双手从超声水槽槽底抱起水槽双手从超声水槽槽底抱起水槽 双手从超声水槽槽底抱起水槽 双手从超声水槽槽底抱起水槽 不可不可 不可 不可 上海博谊生物科技有限公司 GeneChannel Biotech Inc 北京景晟科科技股份有限公司 维修服务 010 84801315 Bioruptor 使用手册第 8 页 操作概论操作概论 1 打开位于电源供应连接器与超声波主机后方的总电源开关 2 若无加装冷却循环器时若无加装冷却循环器时 实验前 10 15 分钟先加入大量碎冰及纯净水 不可用去离子水或超 纯水 如果实验室只有超纯水 请加入超纯水后再加一杯自来水 到超声波水槽中约 8 分满 左右 此时冰水及碎冰可以超过警示水线 将水槽冷却 直到用手触摸水槽边缘感到冰冷 时 约 10 分钟 即代表水槽降温完成 请注意请注意 不能用离子水或超纯水加入超声波水槽中不能用离子水或超纯水加入超声波水槽中 请注意请注意 此步骤极重要此步骤极重要 若降温不确实若降温不确实 将会损害超声波产生器将会损害超声波产生器 导致超声效率严重降低导致超声效率严重降低 3 实验开始时将多余碎冰捞除 仅留一层约为0 5公分大小的碎冰飘于水面 若碎冰体积过大 请将冰捏碎 碎冰顶端需与警示水线等高 上海博谊生物科技有限公司 GeneChannel Biotech Inc 北京景晟科科技股份有限公司 维修服务 010 84801315 Bioruptor 使用手册第 9 页 4 若已加装冷却器若已加装冷却器 可略过步骤 2 3 加碎冰步骤 但是在仪器使用之前约 30 分钟 需先开启 加装冷却系统或蠕动泵 使水温降到工作温度 4oC 后方可开始进行仪器操作 请注意请注意 此步骤极重要此步骤极重要 若降温不确实若降温不确实 将会损害超声波产生器将会损害超声波产生器 导致超声效率严重降低导致超声效率严重降低 5 若无加装冷却循环器时若无加装冷却循环器时 仪器每运行 5 10 分钟 请停机重新检测水温与碎冰状况 若水温 升高或碎冰溶化 请立即更换冰水以及添加碎冰 使样品保持低温状态 或可将仪器置于冷 房中进行实验 或外接冷却循环水器 同时将样本取出上下混匀后 spin down 后再重新置 入样本架中继续运行 请注意请注意 此步骤极重要此步骤极重要 若降温不确实若降温不确实 将会损害超声波产生器将会损害超声波产生器 导致超声效率严重降低导致超声效率严重降低 此外 将样本上下混匀再离心回管底的步骤务必确实 此外 将样本上下混匀再离心回管底的步骤务必确实 此动作次数越多此动作次数越多 DNA 条带集中度越大条带集中度越大 6 若已加装蠕动泵或冷却循环器时若已加装蠕动泵或冷却循环器时 仪器每运行 5 10 分钟 请停机将样本取出上下混匀后 spin down 再重新置入样本架中继续运行 请注意请注意 此步骤极重要此步骤极重要 将样本上下混匀再离心回管底的步骤务必确实将样本上下混匀再离心回管底的步骤务必确实 此动作次数越多此动作次数越多 DNA 条带集中度越大条带集中度越大 7 样本旋转上盖内含步进马达 箭头处 及齿轮状的转盘 仪器运行时适配器上的转盘会因为 步进马达的牵引而在水槽中不断旋转 使样本受力均匀 以得到高重复性的结果 请注意请注意 仪器启动时仪器启动时 请避免步进马达进水请避免步进马达进水 或用外力阻止步进马达的运转或用外力阻止步进马达的运转 8 抗噪音箱 当仪器运转时会产生高频超音波 请确实将抗噪音箱盖上 可有效阻隔噪音 上海博谊生物科技有限公司 GeneChannel Biotech Inc 北京景晟科科技股份有限公司 维修服务 010 84801315 Bioruptor 使用手册第 10 页 适配器置备适配器置备 1 适配器型式包含 0 5ml 适配器 一次可做 12 个 样本 最适处理体积 10ul 100ul 适用于二代测序DNA 样 本片段化实验 1 5ml 适配器 一次可做 6 个 样本 最适处理体积 100 300ul 适用于 Chromatin IP 实验 15ml 适配器 一次可做 6 个 样本 最适处理体积 300ul 2ml 破碎细胞与细菌 抽提蛋白质实验 50ml适配器 一次可做3个样 本 最适处理体积 3ml 20ml 适用破碎细胞与细菌抽提蛋 白质实验 大体积量样本 上海博谊生物科技有限公司 GeneChannel Biotech Inc 北京景晟科科技股份有限公司 维修服务 010 84801315 Bioruptor 使用手册第 11 页 2 样本可视需要处理的体积大小 决定选用最适合的适配器 建议容量如下 请勿超过建议 值以避免结果重复性不佳或是样本超声结果不完全 3 0 5ml 1 5ml 适配器组装方法 将 0 5ml 1 5ml 离心管置入样本 确实盖紧后放入专用适配器 的基座上并旋紧 再将适配器置于样品旋转组件上 将适配器齿轮对准步进马达齿轮完成 接合 准备调整控制功率及作用时间 样本需与离心机样本放置方式相同对称放置方式 如有空位 请以空管补满 请注意请注意 离心管建议使用同一品牌且为国外厂牌的离心管离心管建议使用同一品牌且为国外厂牌的离心管 管壁材质越透明越硬越佳管壁材质越透明越硬越佳 请注意请注意 2 0ml 离心管以及离心管以及 0 2ml PCR 薄壁管不适合此机器上使用薄壁管不适合此机器上使用 4 0 5ml 1 5ml 适配器可以拆开后高压灭菌 但平时若无重大污染情况发生 用清水冲洗晾干 即可 5 15ml 50ml 适配器 内含金属震波反射棒 组装方法 将离心管中加入样品 插入金属震波 反射棒锁紧 确认金属震波反射棒悬空于离心管中 15ml 适配器须加装铝环 如图示 后置 入离心管齿轮状承载盘 再将整个离心管含承载盘放置到样本旋转组件上 将承载盘齿轮 对准步进马达的齿轮完成接合 准备调整控制功率及作用时间 样本需与离心机样本放置 方式相同对称放置方式 如有空位 请以空管补满 适配器基座 齿轮 上海博谊生物科技有限公司 GeneChannel Biotech Inc 北京景晟科科技股份有限公司 维修服务 010 84801315 Bioruptor 使用手册第 12 页 6 15m 50ml 离心管建议使用Falcon或 Corning品牌的离心管 使用其他品牌离心管前请先测 试金属震波反射棒锁紧后是否会接触试离心管管壁 金属震波反射棒必须悬空不接触管壁 否则离心管在超声过程中有碎屑掉落或破损之虞 7 15ml 50ml 适配器可以拆开后高压灭菌 但平时若无重大污染情况发生 用清水冲洗晾干即 可 旋开黑色圆头盖即可取出 O 型环 因此建议高压灭菌时取出 O 型环另外用清水冲洗可 以延长 O 型环使用寿命 请注意请注意 适配器中的适配器中的 O 型环不可高压灭菌型环不可高压灭菌 8 使用完毕后以仪器所附的手动抽水泵将超声波水槽内的水抽干 若经常使用 壹周数次 于当日使用完毕后 可将水留在超声波水槽中 可一星期换水一次 若不常使用 壹周一次 或数周一次 请每次使用后将水抽干 遇到周末假期或长假前 请务必超声波水槽内的水 抽干 并且将金属抗噪音箱盖子打开 保持通风状态 可避免水槽中有藻类或霉菌生长 影 响步进马达寿命与超声波效率 15ml 适配器 含金属震波反射棒 与 15ml 离心管组合完成图 铝环 金属震波反射棒 O 型环 15ml 适配器拆卸图 上海博谊生物科技有限公司 GeneChannel Biotech Inc 北京景晟科科技股份有限公司 维修服务 010 84801315 Bioruptor 使用手册第 13 页 超声波主机设定超声波主机设定 1 数码定时器设定 CYCLE NUMBER TIME ON 与 TIME OFF 是设定 Bioruptor Plus 的主要超声设 定参数 首先按 或 按键可对不同的超声参数进行修改 液晶平上四个闪烁的黑色正方 形会随 或 按键向上或向下移动 一旦选定要修改的超声参数并按 OK 后 四个闪烁的 黑色正方形消失 该超声参数的数字开始闪烁 数字可通过按 或 按键进行修改 如要 保存修改过的参数按 OK 键即可 或按 ESC 键则不保存此更改 2 超声参数设定完毕后 数字显示屏前三行会显示的主要超声波参数 包括 CYCLE NUMBER TIME ON 与 TIME OFF 最后一行则为所有设定的总结 其中一次 TIME ON 和 TIME OFF 称为一个 CYCLE 见下面的例子 反馈功率监控装置 数码定时器 电源开关 超声波停止按键 超声波功率设定按键 超声波启动按键 上海博谊生物科技有限公司 GeneChannel Biotech Inc 北京景晟科科技股份有限公司 维修服务 010 84801315 Bioruptor 使用手册第 14 页 3 当参数完成设定后按下超声波启动按键 则 Bioruptor 开始运行 此时 BIORUPTOR RUNNING 字样则会显示于数字显示屏上 4 仪器运行时可任意按下超声波停止按键停止仪器运行 5 超声波强度设定按键 藉由此按键选择二种输出功率 L 低档功率 H 高档功率 6 2 种功率的主要应用大致如下 Low 破菌 破细胞抽取蛋白质 膜蛋白溶出 常用参数 5x105 1x107个细胞溶于 100 300ul lysis buffer 中 30 秒 ON 30 秒 OFF 5 10 Cycles 可将细胞打破并将蛋白质完全溶出 以肉眼观察细胞悬浮液从浓浊变澄清后即表示 绝大多数的细胞已破 High 用于 chromatin shearing 组织均质或二代测续样本前处理 Chromatin shearing 常用参数 5x105 1x107个已固定的细胞溶于 300ul lysis buffer 中 30 秒 ON 30 秒 OFF Cycle 数目视细胞种类而定 一般为 15 40 cycles 不等 NGS DNA shearing 注意事项 样本管 0 5ml 低吸附小管 或厂家 C30010011 C30010013 小管 样本体积 建议为 100ul 太多或太少会造成样本破碎效果变差 形成较宽的 band 或 是处理时间加长 样本浓度 浓度范围 1 20ng ul 建议为 10ng ul 浓度太高 50 100ng ul 会造成样 本破碎效果变差 形成较宽的 band 样本准备 请尽量混合均匀 加样时需 vortex and spin down 上机前先置于冰上 10 15 分钟 可得到最佳样本重复性与结果一致姓 DNA quality 避免有 RNA 或蛋白质污染 影响 Bioanalyzer 结果判读或 NGS 分析结果 260 280 ratio 1 8 2 0 温度 将样本维持在 4 度左右 可增加超声效率以及结果再现性 请注意请注意 DNA 浓度会因为不同实验需求而有差异浓度会因为不同实验需求而有差异 请视实验要求取最常用的请视实验要求取最常用的 DNA 浓度进行首次 优化 浓度进行首次 优化 当得到最适条件后当得到最适条件后 以此次优化之以此次优化之 DNA浓度为基准浓度为基准 往后只要取相近浓度之往后只要取相近浓度之 DNA shearing 即可得到相近的结果即可得到相近的结果 上海博谊生物科技有限公司 GeneChannel Biotech Inc 北京景晟科科技股份有限公司 维修服务 010 84801315 Bioruptor 使用手册第 15 页 7 系统过热预防与警告 位于超声波水槽下方的超声波产生器对高温很敏感 温度增加则会 降低超声波的效率 超声波产生的热量会转移到水槽中可能会造成设备损坏 为避免超声 波产生器过热 Bioruptor Plus 含温度感知器 我们建议超声波水槽中的水要保持 4 C 10 C 以得到最佳超声效率 以下是仪器过热时会显示的信息 如果如果 start 按下后数秒仪器即停止运行按下后数秒仪器即停止运行 数字显示屏显示以下讯息数字显示屏显示以下讯息 原因为 仪器连续多次使用没有休息 仪器存放于直接暴露在阳光的环境中 房间温度太热 解决方法 将仪器安装在另一个较凉爽的地方 如 4 C 冷房 若无法安装他处 则要求拉长仪器休息时间 加入碎冰以帮助冷却超声波产生器 仪器在运行期间停止并弹出以下画面仪器在运行期间停止并弹出以下画面 则代表临界温度已经达到则代表临界温度已经达到 为了保护超声波产生器不受 损 为了保护超声波产生器不受 损 必须冷却仪器一段时间后重新启动必须冷却仪器一段时间后重新启动 上海博谊生物科技有限公司 GeneChannel Biotech Inc 北京景晟科科技股份有限公司 维修服务 010 84801315 Bioruptor 使用手册第 16 页 原因为 仪器连续多次使用没有休息 解决方法 将仪器安装在另一个较凉爽的地方 如 4 C 冷房 若无法安装他处 则要求拉长仪器休息时间 加入碎冰以帮助冷却超声波产生器 如果警