（江苏专用）2020版高考生物总复习 第42讲 微生物的分离和培养练习（含解析）.docx

第42讲微生物的分离和培养一、单项选择题1.在微生物的培养中下列说法不正确的是 ()A.培养基、接种针等都需要使用恰当方式进行灭菌处理B.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响C.某一稀释度的3个平板的菌落数依次为M1、M2、M3,以M2作为该样品菌落估计值D.制备固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板答案C培养基、接种针都需要使用恰当方式进行灭菌处理,A正确;设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度,B正确;某一稀释度的3个平板的菌落数依次为M1、M2、M3,为了保证结果准确,一般选择菌落数在30300的平板进行计数,以它们的平均值作为该样品菌落数的估计值,C错误;制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板,D正确。2.(2018江苏无锡期末)筛选是生物工程中常用的技术手段,下列有关叙述错误的是()A.利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌B.植物体细胞杂交过程中,原生质体融合后获得的细胞需进行筛选C.在尿素作为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂筛选鉴定尿素分解菌D.单克隆抗体制备过程中,第一次用选择性培养基筛选出的细胞产生特定抗体答案D刚果红可与纤维素形成红色复合物,但并不和纤维素水解后的纤维二糖和葡萄糖发生颜色反应,当纤维素被纤维素酶水解后,刚果红纤维素复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,因此,可利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌,A正确;植物体细胞杂交过程中,原生质体融合后获得的细胞并不都是杂交细胞,所以需进行筛选,从中选出杂交细胞,B正确;在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,氨会使培养基的pH升高,酚红指示剂将变红,因此在尿素作为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂可筛选鉴定尿素分解菌,C正确;单克隆抗体制备过程中,第一次用选择性培养基筛选出的是所有的杂交瘤细胞,D错误。3.(2018江苏无锡期末)下列关于实验操作的叙述,错误的是 ()A.不宜将刚倒入牛肉膏蛋白胨培养基的平板倒过来放置B.DNA的粗提取与鉴定实验中,提取时若搅拌速度过快,鉴定时蓝色会偏浅C.稀释涂布平板法用于微生物的分离计数,统计结果比实际值可能偏小D.制备固定化酵母细胞时,向刚溶化的海藻酸钠溶液中加入活化的酵母答案D在酒精灯火焰附近刚倒入牛肉膏蛋白胨培养基的平板,其培养基温度约为50左右,呈液态,需待其冷却凝固(大约需要510min)后,才能将平板倒过来放置,即不宜将刚倒入牛肉膏蛋白胨培养基的平板倒过来放置,A正确;DNA的粗提取与鉴定实验中,提取时若搅拌速度过快,会加剧DNA分子的断裂,导致析出的DNA分子少或不能形成絮状沉淀,鉴定时蓝色会偏浅,B正确;稀释涂布平板法用于微生物的分离计数,当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,所以统计结果比实际值可能偏小,C正确;制备固定化酵母细胞时,溶化好的海藻酸钠溶液要冷却至室温,才能加入已活化的酵母菌,D错误。4.培养基是微生物生长、分离、鉴别的营养基础,下列有关微生物培养及培养基的描述错误的是()A.微生物培养基的配方中必须包含的成分有碳源、氮源、水、无机盐、特殊营养物质及琼脂B.不论何种培养基,在各成分溶化后都要进行灭菌操作,灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌C.因为土壤中各类微生物的数量不同,所以为获得不同类型的微生物,要按不同的稀释倍数进行分离D.牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数明显大于选择培养基的菌落数目,说明选择培养基已筛选出一些菌落答案A微生物培养基的主要营养物质有碳源、氮源、水、无机盐等,有的还要生长因子等特殊营养物质,固体和半固体需要琼脂,液体培养基不需要琼脂,A错误;不论何种培养基,在各成分溶化后都要进行灭菌操作,灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌,B正确;土壤中各类微生物的数量不同,细菌大约为70%-90%,其次是放线菌,真菌最少,故分离不同类型的微生物,要按不同的稀释倍数进行,C正确;验证选择培养基是否具有选择作用,需设立牛肉膏蛋白胨培养基作为对照,若牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数明显大于选择培养基的菌落数目,说明选择培养基具有筛选作用,D正确。5.(2018江苏徐州考前模拟)下列有关微生物培养与应用的说法,正确的是 ()A.天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基B.接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理C.大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段D.分离分解尿素的细菌时,尿素是培养基中唯一的氮源和碳源答案C天然培养基是指成分明确的培养基,A错误;接种前需要对培养基、培养皿、接种环进行灭菌,实验操作者的双手等进行消毒处理;B错误;大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配置和纯化大肠杆菌两个阶段;C正确;分离分解尿素的细菌时,尿素是培养基中唯一的氮源,尿素和葡萄糖是碳源;D错误。6.将大肠杆菌接种到适宜的细菌培养基上,加盖后,以不同的方式处理,并放置在不同的温度环境中,培养24小时后,所得结果如下表:编号abcdef处理方法接种大肠杆菌接种大肠杆菌,并覆一吸有抗生素X的圆纸片接种大肠杆菌,并覆一吸有抗生素Y的圆纸片接种大肠杆菌,表面全被醋酸覆盖接种大肠杆菌无接种菌温度40404040040观察结果全表面呈浑浊纸片周围呈现一片清晰区,其余表面呈浑浊全表面呈浑浊全表面清晰全表面清晰全表面清晰根据上述实验结果所作出的判断,错误的是()A.编号a和f比较可知,有大肠杆菌培养基的表面会变浑浊B.根据编号b和c的观察结果,可知抗生素Y比抗生素X的杀菌能力强C.将编号e和a的结果比较可知,0的环境不适合大肠杆菌生长D.若揭开编号f的盖子,24小时后培养基表面会出现浑浊答案B根据对照原则,a、f的区别在于是否接种了大肠杆菌,比较可知,有大肠杆菌培养基的表面会变浑浊;A正确;含有抗生素的纸片覆盖在大肠杆菌的培养基上,可根据培养基表面的浑浊程度判定此种抗生素对大肠杆菌的杀菌能力,即X强于Y,B错误;e、a形成对照,其变量是温度,可知0 不适合大肠杆菌生长,C正确;f暴露在空气中后,会自然接种菌种,形成菌落,使培养基表面出现浑浊,D正确。7.(2018江苏南通考前模拟)高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如下图所示。下列说法错误的是 ()A.过程的目的是稀释B.过程所使用的接种方法是稀释涂布平板法C.号、号培养基都属于固体培养基,先灭菌后调节pHD.从号培养基挑出透明圈大的菌落,接种到号培养基上答案C图中过程是稀释嗜热菌培养液的过程,A正确;接种嗜热菌即过程所使用的接种方法是稀释涂布平板法,B正确;分析图示信息可知,号、号培养基都属于固体培养基,培养基配制和灭菌过程中,应注意先调节pH后灭菌,C错误;部分嗜热菌在培养基上生长时可产生淀粉酶,分解培养基中的淀粉后会在菌落周围形成透明圈,透明圈越大,说明产生的淀粉酶越多,因此应挑选透明圈大的菌落接种在号培养基上继续培养,D正确。8.某生物科技小组的同学用刚果红染色法从土壤中分离得到了能够分解纤维素的微生物,下列有关此实验历程的阐述中,正确的是 ()A.本实验既可以起到选择培养的作用又可以起到鉴别培养的作用B.纤维素的分解产物纤维二糖和葡萄糖能与刚果红作用形成红色的复合物C.涂布平板时,应用涂布器沾少量菌液并转动培养皿以使菌液涂布均匀D.应只选择平板中有较大透明圈的菌落进行计数答案A刚果红染色法从土壤中分离得到了能够分解纤维素的微生物,既起到选择培养的作用又可以起到鉴别培养的作用,A正确;刚果红可以与纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解后,红色复合物无法形成,B错误;取少量菌液滴加在培养基表面,涂布时,涂布器可以不动,可转动培养皿,使涂布均匀,C错误;为了保证结果准确,一般选取菌落数在30300之间的平板进行计数,D错误。9.下列有关“微生物的分离与培养”实验的叙述中,正确的是 ()A.利用平板划线法可对微生物进行接种、纯化、分离和计数B.对培养皿进行编号或对菌种进行标注时,应使用记号笔在皿底标记C.倒平板时,应将打开的培养皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上D.将好氧型菌株接种到培养液中需静置培养,防止培养液沾染试管壁引发污染答案B利用平板划线法可对微生物进行接种、纯化、分离,但是不能对微生物进行计数,计数一般采用稀释涂布平板法,A错误;对培养皿进行编号或对菌种进行标注时,应使用记号笔在皿底标记,B正确;倒平板时,不能将打开的培养皿盖放到一边,以免微生物污染,C错误;将好氧型菌株接种到培养液中需振荡培养,D错误。二、多项选择题10.有关平板划线操作的叙述正确的有()A.第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物B.每次划线前,灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种C.在第二区域内划线时,接种环上的菌种直接来源于菌液D.划线结束后,灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者答案ABD接种前先要用火焰灼烧接种环,目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物,A正确;每次划线前,灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,B正确;在第二区域内划线时,接种环上的菌种来源于第一区域的末端,C错误;划线结束后,灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者,D正确。11.(2018江苏南通、泰州一模)下列实验操作过程中,需要设置对照或本身存在对照的是()A.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数B.用新鲜菠菜的叶片进行色素提取和分离实验C.探究不同浓度的生长素类似物对插条生根的影响D.用洋葱鳞片叶外表皮细胞观察质壁分离及复原现象答案ACD在土壤中分解尿素的细菌的分离和计数实验中需要设置空白培养基培养等对照实验,A正确;在绿叶中色素提取和分离实验中不需要进行对照实验,B错误;在探究不同浓度生长类似物对后插条生根的影响实验中,需要设置清水处理作为对照,不同浓度处理组之间也存在相互对照,C正确;在观察植物细胞质壁分离和复原实验中,设置的3个小实验(观察正常植物细胞状态、观察细胞的质壁分离、观察复原现象)之间形成前后对照,D正确。12.下列有关微生物培养、纯化及筛选的叙述,正确的是()A.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应立即快速挑取菌落B.平板划线操作中第二次及其后的划线应从上一次划线的末端开始C.筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一氮源D.在纤维素-刚果红培养基上,能产生透明圈的为纤维素分解菌答案BCD为了防止污染,接种环经火焰灭菌后需要冷却后再挑取菌落,否则会导致高温使菌种死亡,A错误;平板划线操作中第二次及其后的划线应从上一次划线的末端开始,B正确;筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的唯一氮源,C正确;在纤维素-刚果红培养基上,能产生透明圈的为纤维素分解菌,D正确。三、非选择题13.(2018江苏南京、盐城一模)多氯联苯是一种对人体有很大危害的有机物质,污染土壤后,很难清除。研究发现,部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用。为消除这种污染,科研人员计划从被污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株。请回答问题:(1)筛选分解多氯联苯的菌株时,应将土壤样品,接种到以为唯一碳源的培养基上,从功能上讲,该培养基属于培养基。(2)对初步提取到的菌株要进行培养,一般操作方法有两种,其中之一是下图所示的法。菌落数平板编号稀释倍数123104204953931004557511000273(3)将酵母菌溶液分别稀释10倍、100倍、1000倍。每个浓度都接种三个平板,每个平板均接入0.1 mL稀释菌液,该接种方法是培养时,需将培养皿培养,以防冷凝水造成污染。经适当培养后,平板上的菌落数如上表所示:据此可得出,每升菌液中酵母菌活菌数为个。答案(1)稀释(溶解)多氯联苯选择(2)纯化平板划线(3)稀释涂布平板倒置5.1107解析(1)筛选分解多氯联苯的菌株时,应将土壤样品稀释,接种到以多氯联苯为唯一碳源的培养基上;只有能分解多氯联苯的菌株才能在这样的培养基中生存,因此从功能上讲,该培养基属于选择培养基。(2)对初步提取到的菌株要进行纯化培养,一般操作方法有两种,即平板划线法和稀释涂布平板法,图示是利用平板划线法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。(3)将酵母菌溶液分别稀释10倍、100倍、1000倍。每个浓度都接种三个平板,每个平板均接入0.1mL稀释菌液,该接种方法是稀释涂布平板。培养时,需将培养皿倒置培养,以防冷凝水造成污染。对菌落进行计数时,一般选择菌落数在30300的进行记数,求其平均值,因此选择稀释100倍的三个培养基进行计算,每升溶液中酵母菌活菌数=(45+57+51)30.11001000=5.1107个/L。14.(2018江苏南京、盐城二模)图甲是从土壤中筛选产纤维素酶细菌的过程,图乙是纤维素酶基因转录的mRNA部分序列,已知终止密码子为UAA、UAG、UGA。请回答下列问题:(1)图甲中细菌培养基和选择培养基成分上的主要区别是后者。(2)土壤样品需稀释后震荡摇匀,用准确吸取0.1 mL土壤悬液,滴加在培养基中,均匀涂布,将培养皿倒置后放在中培养一段时间,获得细菌菌落。(3)在5个细菌培养基平板上,共接种稀释倍数为105的土壤样品液0.5mL,培养一段时间后,平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191,则每g土壤样品中的细菌数量为个。(4)研究人员用鉴别培养基来鉴定细菌,已知刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上得到部分有透明圈降解圈的菌落(见右图),图中菌落的细菌最适合作为目的菌保存。不考虑基因突变,上图甲中鉴别培养基中的菌落周围是否都有透明圈?。 (5)图中菌种若要长期保存,应该将其放在条件下。若在保存过程中有一菌株因基因突变导致纤维素酶失活,突变后的基因转录形成的mRNA在图乙箭头处增加了70个核苷酸(无终止密码子),使该酶的结构发生变化(假设图中271位之前无终止密码子),则该酶的氨基酸数量比原来多个。假设氨基酸平