农药残留测定法.doc

中国甘肃省武威市凉州区黄羊镇新镇路234号企业名称：甘肃省药物碱厂文件类别：作业指导书文件编号：W-LC-026版本编号：版次：2.0文件名称：农药残留量测定法生效日期：页 码： 1/5附录编号：W-LC-0260102替代文件：无制定部门：质量管理部-姓 名工作/职务签 名日 期起 草宋小燕QC审 核顾秀芬QA审 核陈志玉质量管理部部长批 准宋小兰质 量 总 监变更登记： 适应企业发展需求，与现行药品生产质量管理规范（2010版）相适应，对本企业GMP文件系统进行审核修订完善。替代文件编号及版本号变更描述发布日期W-LC-026 1.0文件版本升级2010.9.26分发部门质量管理部接收部门接收情况接收日期接收人签名文件名称：农药残留量测定法文件编号：W-LC-026页码：2/5 目录1介绍1.1目的1.2相关文件1.3适用范围1.4定义2执行2.1职责2.2.内容 文件名称：农药残留量测定法文件编号：W-LC-026页码：3/5 1介绍1.1目的建立农药残留量测定的操作方法。1.2相关文件无1.3适用范围本方法适用于农药残留量测定的操作。1.4定义无。2执行2.1职责QC按此程序操作2.2内容2.2.1本法系用气相色谱法（附录E）测定药材及制剂中部分有机氯、有机磷和拟除虫菊酯类农药，除另有规定外，按下列方法测定。2.2.2有机氯类农药残留量测定2.2.2.1色谱条件与系统适用性试验 弹性石英毛细管柱（30m0.320.25m）SE-54（或DB-1701），63Ni-ECD电子捕获检测器。进样口温度230，检测器温度300，不分流进样。程序升温：初始100，每分钟10升至220，每分钟8升至250，保持10分钟。理论板数按-BHC峰计算应不低于1106两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。2.2.2.2对照品储备液的制备 精密称取六六六（BHC）(-BHC，-BHC，-BHC，-BHC）、滴滴涕（DDT）（PP-DDE，PP-DDD，OP-DDT，PP-DDT，）及五氯硝基苯（PCNB）农药对照品适量，用石油醚（6090）分别制成每1ml约含45g的溶液，即得。2.2.2.3混合对照品储备液的制备 精密量取上述各对照品储备液0.5ml，置10ml量瓶中，用石油醚（6090）稀释至刻度，摇匀，即得。2.2.2.4混合对照品溶液的制备 精密量取上述混合对照品储备液，用石油醚（6090）制成每1L分别含0g、1g、5g、10g、50g、100g、250g的溶液，即得。2.2.2.5供试品溶液的制备 药材 取供试品于60干燥4小时，粉碎成细粉，取约2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，加水20ml浸泡过夜，精密加丙酮40ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用丙酮补足减失的重量，再加氯化钠约6g，精密加二氯甲烷30ml，称定重量，超声处理15分钟，再称定重量，用二氯甲烷补足减失的重量，静置（使分层），将有机相迅速移入装有适量无水硫酸钠的100ml具塞锥形瓶中，放置4小时。精密量取35ml，于40水浴上减压浓缩至近干，加少量石油醚（6090）如前反复操作至二氯甲烷及丙酮除净，用石油醚（6090）溶解并转移至10ml具塞刻度离心管中，加石油醚（6090）精密稀释至5ml，小心加文件名称：农药残留量测定法文件编号：W-LC-026页码：4/5 入硫酸1ml，振摇1分钟，离心（3000转/分）10分钟，精密量取上清液2ml，置具刻度的浓缩瓶（见附录53页图）中，连接旋转蒸发器，40下（或用氮气）将溶液浓缩至适量，精密稀释至1ml，即得。2.2.2.6制剂 取供试品，研成细粉（蜜丸切碎，液体直接量取），精密称取适量（相当于药材2g），以下按上述供试品溶液制备法制备，即得供试品溶液。2.2.2.7测定法 分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1l，分别连续进样3次，取3次平均值，按外标法计算供试品中9种有机氯农药残留量。2.2.3有机磷类农药残留量测定2.2.3.1色谱条件与系统适用性试验 弹性石英毛细管柱（30m0.250.25m）DB-17MS（或HP-5），氮磷检测器（NPD）。进样口温度220，检测器温度300，不分流进样。程序升温：初始120，每分钟10升至200，每分钟5升至240，保持2分钟，每分钟20升至270，保持0.5分钟，。理论板数按敌敌畏峰计算应不低于6000，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。2.2.3.2对照品储备液的制备 精密称取对硫磷、甲基对硫磷、乐果、氧化乐果、甲胺磷、久效磷、二嗪农、乙硫磷、马拉硫磷、杀扑磷、敌敌畏、乙酰甲胺磷农药对照品适量，用乙酸乙酯分别制成每1ml约含100g的溶液，即得。2.2.3.3混合对照品储备液的制备 精密量取上述各对照品储备液1ml，置20ml棕色量瓶中，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，即得。2.2.3.4混合对照品溶液的制备 精密量取上述混合对照品储备液，用乙酸乙酯制成每1ml分别含0.1g、0.5g、1g、2g、5g的溶液，即得。2.2.3.5供试品溶液的制备 药材 取供试品粉末（过二号筛）约5g，精密称定，加无水硫酸钠5g，加入乙酸乙酯50100ml，冰浴超声处理3分钟，放置，取上层液滤过。药渣加乙酸乙酯3050ml，冰浴超声处理2分钟，放置，滤过，合并两次滤液，用少量乙酸乙酯洗涤滤纸及残渣，与上述滤液合并。取滤液于40以下减压浓缩至近干，用乙酸乙酯转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，精密量取1ml，置活性炭小柱120400目，0.25g，内径0.9（如Supelclean ENVI-Carb SPE Tubes，3ml活性炭小柱），用乙酸乙酯5ml预洗上，置多功能真空样品处理器上，用正己烷-乙酸乙酯（1：1）混合溶液5ml洗脱，收集洗脱液，置氮吹仪上浓缩至近干，精密加入乙酸乙酯1ml使溶解，即得。2.2.3.6测定法 分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1l，分别连续进样3次，取3次平均值，按外标法计算供试品中12种有机磷农药残留量。2.2.4拟除虫菊酯类农药残留量测定2.2.4.1色谱条件与系统适用性试验 弹性石英毛细管柱（30m0.320.25m）SE-54（或DB-5），63Ni-ECD电子捕获检测器。进样口温度270，检测器温度330，分流比20：1；5：1（或根据仪器设置选择最佳的分流比）。程序升温：初始160，保持1分钟，每分钟10升至278，保持0.5分钟，每分钟1升至290，保持5分钟。理论板数按溴氰菊酯峰计算应不低于1105，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。文件名称：农药残留量测定法文件编号：W-LC-026页码：5/5 2.2.4.2对照品储备液的制备 精密称取氯氰菊酯、氰戊菊酯及溴氰菊酯农药对照品适量，用石油醚（6090）分别制成每1ml约含2025g的溶液，即得。2.2.4.3混合对照品储备液的制备 精密量取上述各对照品储备液1ml，置10ml量瓶中，用石油醚（6090）稀释至刻度，摇匀，即得。2.2.4.4混合对照品溶液的制备 精密量取上述混合对照品储备液，用石油醚（6090）稀释制成每1L分别含0g、4g、8g、40g、200g的溶液，即得。2.2.4.5供试品溶液的制备 药材 取供试品于60干燥4小时，粉碎成细粉（过五号筛），取约12g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，加石油醚（6090）-丙酮（4：1）混合溶液30ml，超声处理15分钟，滤过。药渣再重复上述操作2次后，合并滤液。滤液中加入适量无水硫酸钠脱水后，于4045减压浓缩至近干，用少量石油醚（6090）反复操作至丙酮除净，残渣加适量石油醚（6090）溶解，置混合小柱从下至上依次为无水硫酸钠2g、氟罗里硅土4g、微晶纤维素1g、氧化铝1g、无水硫酸钠2g，用石油醚（6090）-乙醚（4：1）混合溶液20ml预洗上，用石油醚（6090）-乙醚（4：1）混合溶液90ml洗脱，收集洗脱液，于4045减压浓缩至近干，再用石油醚（6090）34ml重复操作至乙醚除净，用石油醚（6090）溶解转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，即得。2.2.4.6测定法 分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1l，分别连续进样3次，取3次平均值，按外标法计算供试品中3种拟除虫菊酯