基因工程的一般过程与技术.doc

基因工程综合检测一、选择题1下列关于基因工程技术的叙述，正确的是()A切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列BPCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应C载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因D抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达2下列关于基因工程的说法中，正确的是( )A基因工程的设计和施工都是在细胞水平上进行的操作B目前基因工程中所有的目的基因都是从供体细胞中直接分离得到的C只要检测出受体细胞中含有目的基因，那么目的基因一定能成功表达D基因工程能使科学家打破物种界限，定向改造生物性状3甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法，以下说法中错误的是()A甲方法可建立该细菌的基因组文库 B乙方法可建立该细菌的cDNA文库C甲方法要以脱氧核苷酸为原料 D乙方法需要逆转录酶参与4中美科学家通过改变一种名为NR2B的基因研制出了转基因超级小鼠HobbieJ，HobbieJ比普通老鼠更加聪明，大脑运转更加迅速，它能够轻松完成迷宫任务。下列关于HobbieJ产生过程的描述，错误的是()ANR2B基因可通过PCR技术进行扩增B改变后的NR2B基因作为目的基因，可直接注入小鼠受精卵内C通常采用显微注射法将改变后的NR2B基因重组质粒导入小鼠受精卵内D可采用基因探针检测改变后的NR2B基因是否导入小鼠体内5下列说法不正确的是()A基因治疗是把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的B基因文库包括基因组文库、cDNA文库等C基因工程的核心是基因表达载体的构建D外源基因插入到转基因生物染色体DNA上后就能够表达6土壤农杆菌含有一个大型的Ti质粒(如下图所示)，在侵染植物细胞的过程中，其中的TDNA片段转入植物的基因组。若想用基因工程并通过土壤农杆菌向某种植物中导入抗旱基因，以下分析不合理的是()A若用Ti质粒作为抗旱基因的载体，目的基因的插入位置应该在TDNA片段内，且要保证复制起始点和用于转移TDNA的基因片段不被破坏B将重组Ti质粒导入土壤农杆菌中时，可以用Ca2处理细菌C用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌去感染植物细胞，可以通过植物组织培养培育出具有抗旱基因的植物D若能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因，则说明该基因工程项目获得成功7如图是利用工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是()A的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与B侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到的染色体上C的染色体上若含抗虫基因，则就表现出抗虫性状D只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异8利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示，下列叙述正确的是()A过程需使用转录酶B过程需使用解旋酶和PCR获取目的基因C过程使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备D过程可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞9下列有关蛋白质工程和基因工程的叙述错误的是()A基因工程是通过基因操作把外源基因转入适当的生物体内，并在其中进行表达，它的产品还是该基因编码的天然存在的蛋白质B蛋白质工程的产品已不再是天然的蛋白质，而是经过改造的，具有了人类所需要的优点的蛋白质C蛋白质工程利用基因工程的手段，按照人类自身的需要，定向地改造天然的蛋白质，甚至于创造全新的蛋白质分子D蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构10下面是四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示同一种限制酶的酶切位点。下列叙述正确的是()A基因amp和tet是一对等位基因，常作为基因工程中的标记基因B质粒指细菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA和动植物病毒的DNAC限制酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的氢键D用质粒4将目的基因导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长11科学家将控制某药物蛋白合成的基因转移到白色来亨鸡胚胎细胞的DNA中，发育后的雌鸡就能产出含该药物蛋白的鸡蛋，在每一只鸡蛋的蛋清中都含有大量的药物蛋白；而且这些含该药物蛋白的鸡蛋孵出的鸡，仍能产出含该药物蛋白的鸡蛋。据此分析不正确的一项是()A这些鸡是基因工程的产物 B这种变异属于可遗传的变异C该过程属于蛋白质工程技术 D该种变异属于定向变异12与“限制性核酸内切酶”作用部位完全相同的酶是()A反转录酶BRNA聚合酶 CDNA连接酶 D解旋酶13对下图所示黏性末端的说法正确的是()A甲、乙、丙黏性末端是由两种限制性核酸内切酶作用产生的B图乙中的酶切位点在A与G之间C如果甲中的G发生突变，限制性核酸内切酶可能不能识别该切割位点D构建基因表达载体所用限制性核酸内切酶和DNA连接酶分别作用于a处和b处14据下图分析，下列有关基因工程的说法不正确的是()A为防止目的基因与质粒任意结合而影响基因的表达，应用限制酶、同时切割二者B限制酶、DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键C与启动子结合的应该是RNA聚合酶D能够检测到标记基因表达产物的受体细胞中，也一定会有目的基因的表达产物15蛛丝的强度和柔韧度得益于蛛丝蛋白的特殊布局，使它产生了一个由坚硬的结晶区和非结晶区构成的混合区域。有人试图通过破解蛛丝蛋白的结构从而推测出其相应的基因结构，以指导对蚕丝蛋白的修改，从而让蚕也吐出像蛛丝蛋白一样坚韧的丝。此过程运用的技术及流程分别是()A基因突变；DNARNA蛋白质 B基因工程；RNARNA蛋白质C基因工程；DNARNA蛋白质 D蛋白质工程；蛋白质RNADNARNA蛋白质16下列关于基因工程的叙述，错误的是()A从基因组文库中获取的某种生物的部分基因，可以实现物种间的基因交流B从cDNA文库中获取的目的基因，既无启动子，又无终止子C用人胰高血糖素基因制成的DNA探针，检测人胰岛B细胞中的mRNA，可形成杂交分子D基因表达载体中的标记基因不能含有限制酶的切割位点17下列有关限制酶识别的叙述，不正确的是()A从反应类型来看，限制酶催化的是一种水解反应B限制酶的活性受温度、pH的影响C一种限制酶只能识别双链DNA中某种特定的脱氧核苷酸序列D限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越小18多聚酶链式反应(PCR技术)是体外酶促反应合成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增，其简要过程如图所示。下列关于PCR技术叙述不正确的是()APCR技术是在实验室中以少量DNA制备大量DNA的技术B反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板CPCR技术中以核糖核苷酸为原料，以指数方式扩增D应用PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变19人们试图利用基因工程的方法，用乙种生物生产甲种生物的一种蛋白质。生产流程是：甲生物的蛋白质mRNA目的基因与质粒DNA重组导入乙细胞获得甲生物的蛋白质。下列说法正确的是()A过程需要的酶是反转录酶，原料是A、U、G、CB要用限制性核酸内切酶切断质粒DNA，再用DNA连接酶将目的基因与质粒连接在一起C如果受体细胞是动物细胞，过程可用农杆菌转化法D过程中用的原料不含有A、U、G、C二、非选择题20.反转录病毒载体是一种表达型质粒，结构如图1所示。图上的“反转录病毒序列”可以整合到动物细胞的染色体上，不断地表达其携带的目的基因。(E、F、H分别为限制酶E、F、H的酶切位点)。(1)反转录的原料是_。(2)在构建重组质粒时，目的基因应插入到该质粒的位置是_，此过程需使用的酶是_。为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加_的培养基进行培养。获取大量重组质粒后，将其再转入到某种哺乳动物细胞中，可获得大量重组反转录病毒。.图2为培育转基因小鼠基本过程的示意图。请回答下列问题：(3)如A为重组质粒溶液，将其导入原核期受精卵的方法是_；如A为重组反转录病毒，还可采取_方法。(4)小鼠出生后可从其尾巴中提取_分子，通过_的方法，可检测出携带目的基因的小鼠。(5)若目的基因进入细胞后插入一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子小鼠的方法是_。21多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损。番茄果实成熟过程中PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程的方法减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入到番茄细胞中，得到转基因番茄。请据图回答：(1)提取目的基因：若已获取PG的mRNA，可通过_法获取PG基因。在该基因上游加结构A可确保基因的反向转录，结构A上应具有_结合位点。得到的目的基因两侧需人工合成BamH黏性末端。已知BamH的识别序列如下图中甲所示，请在下图中乙相应位置上，画出目的基因两侧的黏性末端。重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是_。(2)用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有_的培养基进行筛选，与此同时，为能更好地达到培养目的，还需在培养基中加入_。培养2448h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞_现象来鉴别细胞壁是否再生。(3)由于导入的目的基因能转录反义RNA，且能与_互补结合，抑制PG基因的正常表达。若转基因番茄的保质期比非转基因番茄_，则可确定转基因番茄成功。(4)获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常采用_方法使子代保持转基因番茄的优良性状。22农杆菌是一种在土壤中生活的微生物，能在自然条件下感染植物，因而在植物基因工程中得到了广泛的运用。下图为农杆菌转化法的示意图，试回答下列问题：(1)一般情况下农杆菌不能感染的植物是_，利用农杆菌自然条件下感染植物的特点，能实现_。具体原理是在农杆菌的Ti质粒上存在TDNA片段，它具有可转移至受体细胞并整合到受体细胞_上的特点，因此只要将携带外源基因的DNA片段插入到_(部位)即可。(2)根据TDNA这一转移特点，推测该DNA片段上可能含有控制_(酶)合成的基因。(3)图中c过程中，能促进农杆菌向植物细胞转移的物质是_类化合物。(4)要获取能表现出新性状的植株，d过程涉及的生物学技术是_。(5)植物基因工程中除了农杆菌转化法之外，还可采取_方法。(至少写出两种)表1引物对序列表引物对AP1AACTGAAATGTAGCTATCS2TTAAGTCCATTACTCTAG引物对BS1GTCCGACTAGTGGCTGTGS2AGCTGGCGTTTAGCCTCG表2几种限制酶识别序列及切割位点表限制酶AluEcoRPstSma切割位点AGCTTCGAGAATTCCTTAAGCTGCAGGACGTCCCCGGGGGGCCC请根据以上图表回答下列问题。(1)在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是_。(2)PCR过程中退火(复性)温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的