微生物综合实验(三个实验综合).ppt

实验五微生物大小测定 显微镜直接计数及微生物的生理生化反应 一 实验目的二 实验原理三 实验器材四 实验内容步骤 主页 学习并掌握使用显微测微尺测定微生物大小的方法掌握对不同形态细菌细胞大小测定的分类学基本要求 增强对微生物细胞大小的感性认识 返回 目镜测微尺外观 镜台测微尺外观 全长1mm等分100格 每格10um 镜台测微尺放大 01020304050 目镜测微尺放大 每小格的长度随目镜 物镜放大倍数的大小而变动 刻度超下 安装于右目镜中 01020304050 目镜测微尺 镜台测微尺 微生物细胞 目镜测微尺的标定 两条重合线间镜台测微尺的格数目镜测微尺每格长度 m 10两条重合线间目镜测微尺的格数 返回 光线不宜太强 放置镜台测微尺 目镜测微尺每格长度的计算 菌体大小的测定 低倍镜高倍镜 装目镜测微尺 测定结束 返回 酵母菌 取少量菌液 加在载玻片上 盖上盖玻片 进行观察 随机选取10个细胞进行测量 计算平均值 使用后 请将目镜测微尺和镜台测微尺归还到讲台 不得擦拭测微尺 一 实验目的二 实验原理三 实验器材四 实验内容步骤 主页 学习并掌握使用血球计数板测定微生物细胞或孢子数量的方法 返回 显微镜直接计数法 利用血球计数板直接在显微镜下计数微生物的细胞 或孢子 数目优点 直观 快速 操作简便缺点 不能区分死菌与活菌 不适于对运动细菌的计数 需要相对高的细菌浓度 个体小的细菌在显微镜下难以观察 计数公式 1ml菌液中的总菌数 5个中方格的总菌数 5 16 104 稀释倍数 或 1ml菌液中的总菌数 5个中方格的总菌数 5 25 104 稀释倍数 1ml菌液中的总菌数 平均每小格的菌数 400 104 稀释倍数 本实验中暂规定 计上不计下 计左不计右即位于本格上线和左线上的细胞计入本格 本格的下线和右线上的细胞按规定计入相应的格中见图 即本格中计数细胞为3个 返回 返回 清洗计数器 自然晾干 观察计数室 加样品 酵母菌 取适量菌液 进行系列稀释 已稀释100倍 低倍镜高倍镜 菌悬液制备 显微镜计数 用移液器吸取少量摇匀后的菌悬液 从盖玻片边缘滴加10ul样品 自然虹吸 静置5min 计数后 及时清洗计数板 并归还到讲台 不得擦拭计数板 如遇酵母菌出芽 芽体大小达到母细胞一半 即作为两个菌体计数 一 实验目的二 实验原理三 实验器材四 实验内容步骤 主页 一 大分子物质水解试验二 糖发酵试验三 IMVC试验四 本次实验所用培养基和菌种五 报告要求 实验原理 大分子物质 微生物细胞 胞外酶 小分子物质 淀粉培养基 碘液 碘液 明胶培养基 25 以下 实验步骤 淀粉水解试验 倒平板 分区标记 接种 培养 观察 加卢戈氏碘液 观察无色透明圈 制固体淀粉培养基 1 枯草杆菌5 大肠杆菌 所接种的细菌菌名代号 组别 日期 实验步骤 明胶水解试验 标记明胶培养基试管 穿刺接种 培养 观察 观察明胶液化情况 制明胶培养基 所接种的细菌菌名代号 组别 日期 1 枯草杆菌5 大肠杆菌 糖发酵试验实验原理 糖类物质 细菌 有机酸 气体 溴甲酚紫指示剂 黄色 pH6 8 pH5 2 德汉氏小管 实验步骤 糖发酵试验 接种 培养 观察 各试管颜色变化及德汉氏小管中有无气泡 标记 所接种的细菌代号 5 大肠杆菌1 枯草杆菌 IMVC 吲哚 indoltest 试验 甲基红 methylredtest 试验 伏 普 Voges Prokauertest 试验 柠檬酸盐 citratetest 试验 这四个试验主要是用来快速鉴别大肠杆菌和产气肠杆菌 多用于水的细菌学检查 IMVC实验原理 蛋白胨中的色氨酸 吲哚 丙酮酸 对二甲基氨基苯甲醛 玫瑰吲哚 细菌 色氨酸酶 吲哚产生 吲哚试验原理 葡萄糖 有机酸 甲基红指示剂 pH6 3 红色 pH4 2 甲基红试验 M R 试验 葡萄糖 丙酮酸 乙酰甲基甲醇 二乙酰 蛋白胨中精氨酸的胍基 红色化合物 OH 乙酰甲基甲醇 V P 试验 原理 NH2 NH2 柠檬酸盐和磷酸铵 碱性化合物 1 溴麝香草酚蓝指示剂 pH6 0 7 0 蓝色 pH大于7 6 柠檬酸盐利用 接种 培养 结果观察 5 大肠杆菌7 产气肠杆菌 葡萄糖蛋白胨水培养基各2支 柠檬酸盐斜面培养基各1支 IMVC实验步骤 甲基红试验 甲基红试剂 5滴 伏 普试验 40 KOH 5 10滴 5 a 荼酚溶液 等量 37 温箱中保温 15 30min 柠檬酸盐试验 现象观察 一 写出目镜测微尺的标定结果 二 分别列表10个酵母菌的长和宽 并计算其平均值 结果计算长 m 平均格数 校正值宽 m 平均格数 校正值大小表示 宽 m 长 m 实验结果及思考题 三 显微计数结果 四 生理生化反应