浅析麻醉剂在水产品中的研究现状及措施.docx

浅析麻醉剂在水产品中的研究现状及措施基金项目：陕西水利科技计划项目（2013slkj-37）作者简介：李亚菲（1986- ），女，汉族，籍贯河南洛阳，硕士学位。通讯地址：陕西省西安市未央区三桥南沣惠路2号陕西省水产研究所；邮政编码：710086；电话Email：李亚菲（陕西省水产研究所，陕西 西安 710086）摘 要:麻醉剂能够减少人为操作和长途运输过程中对鱼体的伤害，有效降低伤亡率，而国内对鱼类麻醉剂的使用管理尚不明确。本文主要通过对鱼类麻醉剂作用原理、常见种类及毒理学特征、麻醉剂的检测方法等方面进行了综述，分析了我国鱼类麻醉剂在科研和管理方面存在的问题，并提出了研究与管控建议。Abstract: Anesthetics are chemical or physical agents which can reduce stress caused by handling and transportation, and efficiently reduce the casualty rate of fish. However, management of anesthetics applied to fishery is in the fuzzy stage in the domestic market. In this paper, the action principle、toxicology and detection methods of anesthetics were reviewed, the problems of anesthetics in scientific research and management were analyzed .Severalsuggestions on research and control are also provided. 关键词:麻醉剂；鱼；作用原理；毒理学；建议Key words: anesthetic; fish; action principle; toxicology; proposal鲜活水产品在暂养、转移和长途运输过程中会产生应激反应，导致鱼体受伤、免疫力降低，从而引起死亡率上升。为了提高鲜活水产品的存活率，提升卖相，提高商品价值，经常需要用到鱼用麻醉剂。国外对鱼用麻醉剂在渔业生产与科学研究上的应用已有报道，近年来国内也逐渐开始普遍使用，而如丁香酚等作为鱼用麻醉剂的安全性并不是普遍接受1。这也使得对麻醉剂的研究和管理需求更加迫切。本文通过研究，旨在为下一步更加深入的开展鱼类生产科研与政府监管提供科学的理论依据。1、鱼类麻醉剂作用原理 鱼类麻醉剂主要是为了在科研生产过程中减少对鱼类的刺激，防止鱼体进行剧烈的挣扎等行为对鱼体造成损伤，以及在运输过程中降低鱼体新陈代谢，提高存活率2。其中丁香酚的麻醉原理是先抑制脑的皮质(触觉丧失期)，再通过作用于基底神经节与小脑(兴奋期)，最后作用于脊髓(麻醉期)，过大剂量或过长的接触可深及髓质，使呼吸与血管舒缩中枢麻痹，最终可导致死亡3,4。2、鱼类麻醉剂种类及毒理学特性2.1 MS-222MS-222，又名鱼定安、渔夫宝，其主要成分是间氨基苯甲酸乙酯甲磺酸盐，CAS号886-86-2，分子式是C10H15NO5S，分子量261.3，白色结晶粉末状，易溶于水。有研究表明，MS-222在24h、96h对罗非鱼的LD50分别为88.84mg/L、76.18 mg/L5；MS-222溶液呈酸性，鱼体麻醉后血浆皮质醇含量在增加。MS-222是经过美国食品药物管理局（FDA）认可，可以用于鱼虾类麻醉运输6。目前，美国、欧盟、加拿大等国家允许其作为鱼用麻醉剂在水产动物中使用，其中美国规定休药期为21d，最大残留量(MRL)为1g/mL。FDA要求经过MS-222麻醉过的鱼要在21d后才能出售。2.2 丁香酚丁香酚（Eugenol），其主要成分是4-烯丙基-2-甲氧基苯酚，无色或苍黄色液体，有强烈丁香香气，CAS号97-53-0，难溶于水，在医学上被广泛应用于牙科镇痛和防腐。1972年，日本远藤发现丁香酚这种香料对鱼有强烈的麻醉作用，开始将它作为麻醉剂进行了研究。日本、新西兰、澳大利亚、智利、芬兰等国家允许丁香油作为鱼用麻醉剂，其中日本规定休药期为7d，最高残留量(MRL)设定为50ng/mL。澳大利亚、智力、韩国、新西兰等国家批准异丁香酚作为鱼用麻醉剂。联合国粮农组织(FAO)、世界卫生组织(WHO)推荐丁香酚的每日容许摄入量(ADI)为2.5mg/kg，另外，欧盟(CE)推荐甲基丁香酚的ADI 值为5mg/kg，异丁香酚的ADI值为5mg/kg。在急性毒性试验中，丁香酚对大黄鱼药浴0.5h的半数致死浓度（TLm）为10mg/L，对鲤鱼药浴0.5h的TLm为112mg/L7。Pirhonen8等通过MS-222和丁香酚对虹鳟饲料摄入量、血浆皮质醇水平的影响研究，发现丁香酚可替代MS-222安全使用。2.3 苯佐卡因苯佐卡因，化学成分为对氨基苯甲酸乙酯，为白色粉末，难溶于水，若用于鱼类浸浴麻醉，需用乙醇助溶。目前，世界上仅挪威批准该药物作为鱼用麻醉剂，并规定休药期为21d。苯佐卡因在24h、96h对罗非鱼的LD50分别为44.49mg/L、22.61 mg/L。2.4 乙醚乙醚（Ether），分子式是C4H10O，是吸入性全身麻醉剂，属于低毒物质，与空气隔绝时相当稳定但对人的神经系统有影响。乙醚的使用方法一般采取喷雾方式，溶液浓度为1.52.0%。由于乙醚比重小，挥发快，浓度下降使麻醉作用降低，需在运输途中视鱼的活动情况不断酌量添加药物。需要注意的是，有鳃病的鱼，或者是水质不良，特别是在水pH 失调的情况下，不能使用乙醚。2.5 CO2目前，CO2是唯一被允许用来运输食用鱼的化学麻醉剂，没有药物消退期。经过CO2麻醉运输的食用鱼可以直接在市场上进行销售，对动物组织没有毒害作用，但在鱼体局部组织中积累过多，将出现麻醉过度，也有可能会导致鱼窒息死亡9，另外，它麻醉和复苏时间相对较长，麻醉水溶液的浓度范围较窄仅适用于部分鱼类。3、影响麻醉效果的因素3. 1 鱼体的品种、体重与年龄不同品种的鱼对不同麻醉剂的反应，甚至对同一种麻醉剂在不同浓度下的反应没有显著的规律。不同体重的鱼的体表面积不同，新陈代谢率亦不同，一般体重越大，所需麻醉剂含量越高。另外，有研究认为，鱼体在幼鱼期主要靠皮肤呼吸，从而对麻醉剂有较强的敏感性，随着鱼类生长发育、鱼龄增长，鳃呼吸逐渐占据主导地位，而麻醉剂大多通过鳃吸收，因此，随着鱼龄增加，所需麻醉剂积累和净化的速率都会加快10。3. 2 温度随着水温升高，在相同浓度麻醉剂作用下，鱼体达到各麻醉阶段的时间均缩短，说明麻醉效果随温度的增加而增强，部分麻醉剂在水温达到一定高度时，麻醉剂效果出现降低现象。在较高温度下，鱼麻醉运输后的复苏率和成活率也大大降低，甚至在10以上时异戊巴比妥钠会失效3。3. 3 pH 值与盐度因麻醉药剂的种类不同而不同，一般淡水影响小，海水影响大。在较高盐度下，鱼体为调节自身渗透压的平衡需要消耗较多的能量，耗氧量增加，从而摄入较多的麻醉剂，导致进入麻醉时间缩短，复苏时间延长，死亡率增大11,12。Ghazilou 等通过对里海三文鱼的药浴麻醉研究，发现盐度、pH 值对丁香油的麻醉效果影响显著13。3. 4 溶氧溶氧会影响到鱼类的呼吸，一般低溶氧时，作用较快，但恢复较慢。生活在高溶氧水域的鱼种对麻醉剂感受性较高，所需浓度较低，鱼体入麻时间延长，复苏时间短，成活率较高。4、鱼用麻醉剂的检测方法目前，麻醉剂检测方法主要有气相色谱法、高效液相色谱法、高效液相色谱-质谱联用法、气相色谱-质谱联用法等。例如朱敏14等利用液相色谱-串联质谱法测定水产品中麻醉剂MS-222的残留量，该方法检出限为1g/kg，定量限为2g/kg，加标回收率可以达到80%110%。Kiessling A15等利用反相高效相色谱法来检测 MS-222 和丁香酚对鱼体的生理效应。崔冶建等利用高效液相色谱法对鱼脑中的MS-222含量进行分析，有较好的回收率和重现性16。国内关于丁香酚的检测方法也有报道，其中气相色谱法是较为常见的检测方法，如王玺和罗旭利用气相色谱法对牙膏中微量丁香酚进行测定17；王喆栀等用气相色谱法测定了行军散中丁香酚的含量18；王海英用气相色谱法测定了丁香油中丁香酚的含量19。另外，关于丁香酚的其他检测方法的报道，如李婷婷等利用高效相色谱法测定了大鼠血浆中的丁香酚，其中丁香酚的最低检出限为0.0895g/mL20；林伟丰等还研究了利用毛细管电泳高频电导法测定几种中药中的丁香酚21；周茂君等用气相色谱-质谱法对保健品软胶囊中的丁香酚进行分析22。5、存在问题及建议5.1 加大水产品中麻醉剂相关研究力度。目前对于麻醉剂在水产方面的研究主要侧重于麻醉效果和对血液成分的影响的研究，对其麻醉机制、残留代谢、安全范围、休药期、反复麻醉的危害以及对人体的安全评价等方面的研究较少。随着渔业快速发展，鱼类麻醉剂在国内水产养殖业的应用将会越来越广泛。麻醉剂在水产业的广泛使用，迫切需要对麻醉剂的残留代谢规律、反复麻醉危害、安全使用范围及对人体的安全性评价等方面开展研究。5.2 尽快建立麻醉剂监管规范。我国目前对鱼类麻醉剂的使用缺少相应的标准，给我国水产品中麻醉剂的合理使用及残留监控带来很大的不便。因此，应尽快出台鱼用麻醉剂相关规范和制度，建立相应检测标准，制定管理规范，防止滥用的现象发生，并积极组织科研力量尽快开发高效、低价、低残留或者无残留的鱼类麻醉剂，从而对我国渔业运输、销售以及消费者的健康起到重要的保障作用。参考文献：1 陈焕,黄和,高平,等.高效液相色谱法测定水产品中丁香酚类麻醉剂的残留量J.食品与发酵工业，DOI:10.13995/ki.11-1802/ts.201412030.2 刘伟, 陈再忠.麻醉剂MS-222对金鱼体内AKP、CAT和ACP活性的影响J.上海海洋大学学报，2010（19）3:327-332.3 李思发.鱼类麻醉剂J.淡水渔业，1988(1):22-23.4 刘长琳,何力,等.鱼类麻醉研究综述J.渔业现代化，2007（5）：21-25.5 汤保贵,陈刚,张健东,等.两种麻醉剂对罗非鱼的急性毒性及联合毒性研究J.水产科技情报, 2010, 37(3): 111-114.6 吕书为,雷红涛,孙远明.鱼用麻醉剂安全性研究进展J.食品科学,2012,(33)1:267-270.7 刘双凤,蔡勋.鱼用麻醉剂的研究进展J.黑龙江水产,128:40-43.8 Pirhonen J, Schreck B. 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