血细胞分析仪的历史 幻灯片.ppt

血细胞分析仪的历史 检验科杨创杰 原始阶段 1665年罗伯特 胡克 RobertHooke 1635 1703 是英国著名的物理学家 生物学家 胡克于1635年7月18日出生于英格兰怀特岛弗雷什沃特村的一个牧师家庭 1665年 罗伯特 胡克根据一会员提供的资料设计了结构相当复杂的显微镜 有一次 他切了一块软木薄片 放在自己制造的显微镜下观察 发现软木片是由很多小室构成的 各个小室之间都有壁隔开 像蜂房似的 胡克给这样的小室取名为 细胞 血液细胞的分类 原始的分类方法 最早的分类是血液离心后 血浆于红细胞之间白色区域的细胞称为白细胞 红色部分称为红细胞 简单的说就是根据颜色判别 白细胞人体和动物血液及组织中的无色细胞 白细胞还可以细分为五种类型 也可根据胞浆颗粒分为有颗粒和无颗粒两类 颗粒白细胞 粒细胞 中含有特殊染色颗粒 用瑞氏染料染色可分辨出三种颗粒白细胞即中性粒细胞 嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞 无颗粒白细胞无细胞质颗粒 但有圆形细胞核 包括单核细胞和淋巴细胞 红细胞 在所有的脊椎动物及若干无脊椎动物 其血红素 无脊椎动物也有时是蚯蚓红血朊 包含在特定的细胞中来进行其机能活动 这种血球称为红细胞 血小板的发现 直到1882年意大利医师J B 比佐泽罗发现它们在血管损伤后的止血过程中起着重要作用 才首次提出血小板的命名 激活的血小板 血小板的主要功能是凝血和止血 修补破损的血管 在炎症时也会升高 细胞计数 最早的计数是用计数板 最常用是牛鲍氏计数板 1 盐酸破坏红细胞后计数白细胞 沙里氏比色计计算血色素 血色素乘以3 3大约计数红细胞 红细胞 血小板最简单都用生理盐水稀释后冲入计数池肉眼计数 白细胞分类 传统方法评价 手工计数是最经典的计数方法 特别是涂片显微镜白细胞分类被视为金标准 再先进的设备都不可能替代手工分类 缺点是 操作过程过于繁琐 不适宜大批量检测 细胞计数仪器 库尔特兄弟发明了第一台血细胞计数仪 其经典的计数原理也被称为库尔特原理 库尔特细胞分析仪的诞生过程 自从20世纪50年代中期发明库尔特原理后 库尔特原理成为了行业的根基 响应了对自动化血细胞计数仪器的需求 华莱士 H 库尔特和他的兄弟小约瑟夫 R 库尔特提出了一种使细胞通过一个感测小孔的简单想法以来 此行业的发展经历了三个阶段 在第一个阶段 华莱士希望将常规的红血球计数工作变为自动操作的愿望 促成了上述简单想法的提出 库尔特原理的定义 此原理的专利获得 其被美国国立卫生研究院认可 以及在一次美国国家级研讨会上对此原理进行了阐述 在第二个阶段 库尔特兄弟专注于商业化仪器的实用化 并专注于通过经营公司来支持此仪器的生产和销售 在第三个阶段 针对感测孔功能特性引发的体积测定错误 进行了广泛的研究 库尔特兄弟不断成长的公司找到了各种解决方案 从而开发了自动化越来越高的血液分析仪 最早的血细胞分析仪 库尔特兄弟后记 库尔特兄弟最后将公司已一美元的价格出让给了贝克曼公司 就一个条件就是贝克曼公司保留库尔特的名字 最终叫贝克曼库尔特公司 血细胞计数现状 现在血细胞分析仪的优点 1 速度快 2 项目多 项目可以扩展CRP 3 易操作 4 精度高 血小板 国产血细胞分析仪现状 北京医院1959年引入第一台瑞典产细胞分析仪 上海工程师张根福仿照了第一台国产血细胞分析仪 今年来迈瑞 优利特 迪瑞等公司也在迎头赶上 但是核心技术还是掌握在外国人手上 第一台真正五分类 1974年 一种名为HEMALOGD的具有初步白细胞分类功能的白细胞分析仪问世 1982年Technicon公司生产了H6000型血液细胞分析仪器 应该是首款具有白细胞五分类能力的仪器 同时代日本日立公司推出图像分析法的白细胞分析仪HITACHI8200型 仅仅是用于完成白细胞血片分类的仪器 没有其他血细胞计数分析能力 Technicon公司1985开发了比较成熟的具有白细胞五分类功能的TechniconH1型血液细胞分析仪 随后升级为H2型和H3型 COULTER公司在1987年开发研制其经典VCS技术 并推出持续具有多年影响力的 具有白细胞五分类功能的血液细胞分析仪MAXM型 1990年前后 欧洲和日本许多厂家都陆续推出了各种类型的具有白细胞五分类功能的血细胞分析仪器 各厂家设计生产的此类血细胞分析仪 其在白细胞分类技术上原理各不相同 分析测定项目略有不同 且形式多样 结构复杂 试剂种类和成分也趋 vcs技术 他V代表体积测量 也就是传统的电阻法原理 可将体积大小差异显著的淋巴细胞和粒细胞分开 C代表高频电导性 该技术可直接测量细胞内部结构间的差异 了解细胞内部核浆比例和细胞内化学成分 可辨别细胞体积相同而内部性质不同的细胞 可将体积相近的淋巴细胞和嗜碱性细胞区分开 因为他们的核质比例明显不同 S代表激光散射 它可穿透细胞 探测细胞内核分叶状况和颗粒情况 通过分析光散射信息对细胞内颗粒性进行分析 细胞内颗粒粗的光反射强 因此可以用于单核细胞和三种粒细胞的区分 通过综合处理三个参数的特性 可全面对白细胞的各种特征进行综合评价分析 得到五项白细胞分类结果 阻抗 激光散射和荧光染色技术 采用阻抗 激光散射和荧光染色技术进行五分类的仪器这种技术主要应用在Sysmex研制和开发的SF 3000 SE 9000 SE 9500 XE 2100 XT 1800等系列血液分析仪中 直流电阻抗法 DC 用于测量细胞体积大小 激光散射产生的前向散射光 侧向散射光可用于探测白细胞体积大小 细胞内含物的情况 细胞核以及颗粒情况 侧向荧光则可以反应细胞内脱氧核糖核酸 DNA 和核糖核酸 RNA 的含量 特有的嗜酸性粒细胞检测溶血剂Strmatolyzer EO可将除了嗜酸细胞以外的所有细胞溶解或萎缩 含有完整嗜酸细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数 在嗜碱细胞通道中 使用特殊溶血剂Strmatolyzer BA可将除了嗜碱细胞以外的所有细胞溶解或萎缩 含有完整嗜碱细胞的液体通过小孔可以按照电阳法计数技术进行计数 幼稚细胞检查通道 IMI 可以根据幼稚细胞膜比成熟细胞膜表面含有脂质较少的现象 在细胞稀释悬液中加入硫化氨基酸 由于占位不同 结合在幼稚细胞表现氨基酸较多 对溶血剂有抵抗作用 当加人溶血剂后成熟细胞易被溶解 而幼稚细胞不易被破坏 可通过电阻法检测出来 综合各个测量方法 得到白细胞五分类的图形和数据 更加方便 更加适用 更多功能 更加准确 更加速度和更多参数的血液分析仪 已经是各血液分析仪生产厂商的目标 1 血常规检验多参数化近年来许多仪器都在增加新的参数以满足临床在诊断和鉴别诊断方面的需求 最早加入并得到公认的参数是红细胞体积分布宽度 RDW 目前该参数已经成为许多型号血细胞分析仪的标准参数 在各种贫血的诊断和治疗中起着重要作用 而该参数是很难应用人工方法测定的 以后有关血平均小板体积 MPV 血小板体验积分布宽度 PDW 血小板压积 PCT 大血小板比率 血红蛋白浓度分布宽度 异常淋巴细胞提示 幼稚细胞提示等各种参数和功能也不断的添加到一些品牌的仪器上 目前有的仪器甚至可以提供40 50种测量或计算参数 但很多的新参数目前仍不能应用于临床 仅限于实验室或供研究使用 更加方便 更加适用 更多功能 更加准确 更加速度和更多参数的血液分析仪 已经是各血液分析仪生产厂商的目标 2 多功能合成扩展血细胞分析仪已经不仅仅局限在进行常规血细胞分析 它增加了许多扩展功能 例如将网织红细胞的计数和分析功能加人其中 一些仪器另外增加了幼稚细胞分析和有核红细胞分析功能 例如SYSMEXSF 3000 SE 9000 SE 9500 XE 2100 BAYETRADVLA120 ABBOTTCELL DYN 3500 4000等 更有一些仪器把流式细胞分析仪的某些简单功能进行了合并 这样在常规血液分析仪上就可以得到某些淋巴细胞亚群的分析结果 例如在COULTERSTKS上可以同时测定CD4TCD8 在ADVLAZ120G型血液细胞分析仪上又将脑脊液的细胞分析功能加人进来 使用特殊的试剂和程度 可对脑脊液中的红细