-肝炎病毒

第29章 肝炎病毒（Hepatitis Virus）,肝炎病毒是一组损伤肝细胞引起病毒性肝炎的病原体，目前公认的有五种:,甲型肝炎V (HAV): 小RNA病毒科嗜肝病毒属乙型肝炎V (HBV): 嗜肝DNA病毒科嗜肝DNA病毒属丙型肝炎V (HCV): 黄病毒科丙型肝炎病毒属 丁型肝炎V (HDV): 属缺陷病毒,丁型肝炎病毒属戊型肝炎V (HEV): 肝炎病毒科戊型肝炎病毒属,与人类肝炎相关的新型肝炎病毒:目前未正式确认,庚 型 肝 炎 V (HGV): 黄病毒科 +ssRNA, 血行传播Torque Teno Virus (TTV): 分类未确定 -ssRNA, 血行传播,EBV、CMV、HSV 柯萨奇病毒、埃可病毒黄热病病毒,非嗜肝病毒感染引起的肝炎或肝损伤:,第1节 甲型肝炎病毒（Hepatitis A Virus, HAV）,甲型肝炎(Hepatitis A),世界性急性传染病 占病毒性肝炎的50 年发病数超过200万,Hepatitis A Virus,1973年Feinstone应用免疫电镜技术在急性期肝炎患者粪便中发现。 1983年国际病毒命名委员会将其归类为小RNA病毒科肠道病毒属72型。1993年归类为小RNA病毒科的嗜肝病毒属（hepatovirus） 。,核心：+ssRNA, 长约7.5kb衣壳：VP1、VP2、VP3 VP4(小分子多肽，含量少),一、生物学性状,1. 形态结构: 球形, 2732nm, 无包膜,Hepatitis A virus particles found in fecal extract by immunoelectron microscopy. Both full and empty particles are present. The virus is 27 to 29 nm in diameter. (X 125,000.),Immune aggregate of hepatitis A virus following the addition of convalescent serum to a fecal extract during the acute phase of the illness X 400,000,HAV genome organization,2. 抗原性,HAV抗原性稳定，仅有一个血清型 衣壳蛋白VP1、VP2、VP3具有抗原 性, 可诱导产生中和抗体,3. 培养,灵长类动物接种：黑猩猩、绒猴、短尾猴细胞培养：,人胚肺二倍体细胞原代狨猴肝细胞原代非洲绿猴肾细胞传代恒河猴肾细胞人肝癌细胞株,甲肝减毒活疫苗,病毒增殖慢无细胞病变,耐热（60 4h）耐酸（pH1 2h）耐有机溶剂（乙醚、氯仿）在水和水产品中存活数天数月,鉴于HAV有较强的抵抗力，因此对肝炎患者及其排泄物处理应特别小心。,4. 抵抗力：强,HAV灭活,高压 (121 20min)煮沸 (5min)干热(1801h)UV (1.1瓦1min)甲醛 (14 000、373d)氯 (10ppm15ppm、30min),二、致病性与免疫性,1.传染源: 患者（潜伏期末和急性期有传染性） 隐性感染者,2.传播途径: 消化道传播,毛蚶,3.发病过程,黄疸，发热，肝功能异常,HAV,肝炎,4. 致病机制: 尚不十分清楚,NK细胞 杀伤受感染的肝细胞CTL被激活 杀伤肝细胞IFN- 肝细胞表达HLAV Ab 复合物 肝组织+补体 肝炎,沉积, V在肝C大量增殖 肝C损伤 免疫病理损伤（主要）,HLA的介导,IgM： 急性期出现 早期诊断,感染后可产生持久免疫力, 主要为体液免疫。,5. 免疫性, 防止再感染,急性期后期或恢复期早期出现,IgG：,致病特点,隐性感染多 感染多见于儿童、青年 可呈爆发流行不易转为慢性或无症状携带与肝癌关系不大 不垂直传播 只有一个血清型，病后可产生较牢固免疫力,三、微生物学检查,HAV病程短，愈后良好，一般不作病原体分离，以检测病毒抗体、抗原或RNA为主。,检测抗-HAV IgM， IgG检测HAV抗原检测HAV RNA 免疫电镜病毒颗粒,四、防治原则,注意饮食卫生保护好水源加强粪便管理保护易感人群,预防,人血清或胎盘丙种球蛋白 减毒活疫苗甲肝疫苗 灭活疫苗 VP1基因疫苗,第2节 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV),Woodchuck hepatitis virus (WHV ) 土拨鼠肝炎病毒 Ground squirrel hepatitis virus (GSHV) 地松鼠肝炎病毒 Duck hepatitis virus (DHV)鸭 肝 炎 病 毒,HBV is the major member of the family Hepadnaviridae 嗜肝DNA病毒科.,是全球性公共卫生问题: 全世界HBV携带者超过3.5亿, 其中亚州、非洲和拉丁美洲地区约2.8亿，我国1.2亿，占全世界 HBV携带者的 1/3。 非洲西北部和南部、亚洲的中国和东南亚国家为乙型肝炎的高流行区，HBV携带率超过10%。 乙型肝炎感染率高的地区与原发性肝癌的发生率在地理上呈正相关性。,乙型肝炎 (hepatitis B),Geographic Distribution of HBV Carriers and Incidence of Hepatocellular Carcinoma (HCC),一、生物学性状,1.形态结构,大球形颗粒,小球形颗粒,管形颗粒,100-500nm,前S1蛋白 ( PreS1Ag )前S2蛋白( PreS2Ag )S蛋白 ( HBsAg ),衣壳 （20面立体对称）: HBcAg 核心,dsDNA: 不完全环状DNA多聚酶：病毒复制相关酶,Dane颗粒42nm,长链（-）:闭合短链（+）:半闭合,大球形颗粒(large spherical particle ) -具有感染性的完整的HBV颗粒,内层,外层,(脂质双层、包膜糖蛋白),小球形颗粒(small spherical particle),22nm，最常见的形式，中空颗粒，病毒装配过剩的包膜蛋白，主要为HBsAg，少量PreS1或PreS2。,管形颗粒(tubular particle),22 nm100-500nm，成分同小球型颗粒，许多小球型颗粒聚合而成。,2. 基因结构 双链不完全环状DNA ，负链DNA有4个ORF:,编码x蛋白(HBxAg) 癌变,编码P蛋白（有DNA多聚酶、反转录酶及RNase H活性） 与V复制有关,C基因： 编码HBcAg前C基因： 编码HBeAg（非结构蛋白）,S区C区P区：X区：,HBV基因结构,前S1基因: 编码PreS1Ag前S2基因： 编码PreS2Ag S基因： 编码HBsAg,PreS1 AgPreS2 Ag,HBV基因结构模式图,3. 抗原组成,Serotype,adr（我国汉族） adw（美国、西欧） ayr （亚洲） ayw（我国少数民族）,Genotype,A B C D E F G我国流行的主要为B和C型,HBsAg 亚型：,意义:,HBsAg(+)：感染HBV的标志 有肝炎症状+肝功能异常: 乙肝病人 无肝炎症状+肝功能正常: 携带者筛选献血员：HBsAg(-)才能献血鉴定血制品：血制品无HBsAg流行病学调查：血清型,基因型不同,追查传染源抗-HBs(+): 中和抗体，防止再感染,（2） PreS1Ag，PreS2Ag:,部位: 包膜、血液作用: 与肝细胞受体结合PreS1Ag, PreS2Ag(+): 是HBV复制和血液 传染性强的标志抗-PreS1和抗-PreS2(+): 中和抗体(阻断HBV 与肝细胞结合),HBcAg存在核衣壳上，不进入血流，不易从患者血清中检出。 HBcAg可分布于肝细胞的胞核、胞浆和胞膜上，是宿主CTL作用的主要靶抗原。 抗-HBc (IgM和IgG）：非中和性抗体 抗-HBc IgM(+): 是HBV复制和传染性强的标志 抗-HBc IgG(+): 是感染HBV的标志,（3） HBcAg ：,前C基因,C基因,表 达,前C / C 蛋白,切割、加工,HBeAg,HBcAg,分泌到细胞外（可溶性蛋白）,HBeAg可存在于血清中,HBV C区,（4）HBeAg：Pre-C与C基因共同编码Pre-C蛋白 Pre-C蛋白经切割加工后形成HBeAg,HBeAg(+)：是HBV复制及传染性强的标志。 急性乙型肝炎进入恢复期时 HBeAg ( - )，抗-HBe(+)； 抗-HBe (+)：表明机体获得了一定免疫力,预后良好（急性）。 HBeAg ( - )、抗-HBe(+)亦见于变异株、携带者及慢性乙型肝炎血清中。,意义:,急性乙肝血清学反应及临床表现,HBV 抗原、抗体检测结果的临床意义,诊断乙肝指标,免疫保护指标,抗-HBs抗-PreS,HBsAg(+) 抗-HBc(+)HBeAg(+),4.,4.,4. Model of HBV replication,Hepatitis B virus genome and transcripts,0.8 kb mRNA,结合,dsDNA,超螺旋cccDNA,3.5 kb mRNA,P蛋白+HBcAg+HBeAg前体蛋白,PreS2+HBsAg,2.1 kb mRNA,转录,RNAP,转译,前基因组,与P蛋白进入衣壳内,反转录,-DNA,复制,+DNA,dsDNA,DNAP,完整的环状dsDNA,2.4 kb mRNA,0.8 kb mRNA,HBxAg,PreS1+PreS2+HBsAg,cccDNA:covalently closed circular DNA,HBV replication cycle,复制特点:,反转录过程, 是病毒易发生变异的原因之一 病毒DNA整合于宿主细胞，与癌变有关 2.1kb 和2.4kb mRNA调控HBsAg 产生，如过量复制，可释放入血，造成HBsAg持续阳性,5. 抵抗力：最强的病毒,耐低温、干燥、紫外线耐高温：煮沸10min、高压灭菌法可杀灭V耐乙醇：70%乙醇不能杀灭病毒对0.5%过氧乙酸、5%次氯酸钠等敏感 （保留HBsAg的抗原性）,二、致病性与免疫性,2. 传播途径：,1. 传染源： 患者或无症状携带者,血行传播 母婴传播 性接触传播 生活密切接触传播,Sources of Infection for Persons with Hepatitis B,Sexual 30%,Transfusion 25%,Injection Drug Use 15%,Household Contact 12%,Pregnant women 10%,Other 3%,Unknown 5%,3. 致病机制,HBV的致病机制尚未完全清楚； 免疫病理反应是肝细胞损伤的主要原因; 机体对HBV的免疫应答能力决定临床类型。,HBV变异,S、PreS、PreC、C基因变异 Ag表位改变或不能转译 免疫逃逸,免疫耐受、免疫应答低下和HBV逃逸免疫作用是 HBV携带和慢性化的主要原因。,免疫耐受,HBV持续性感染 慢性肝炎,清除HBV,HBV,T cell,致敏T细胞,直接杀伤诱导凋亡,CTL LF,免疫病理损伤 Hypersensitivity ,HBcAg,肝C损伤肝炎,免疫病理损伤 Hypersensitivity III,HBeAg HBsAg,B,抗-HBe抗-HBs,Ag-Ab复合物,肝组织+补体,肝炎,栓塞毛细血管,肝C缺血,肝C坏死,TNF,肝C坏死,沉积,重症肝炎,免疫病理损伤 Autoimmune response,HBV 机体 肝C,肝特异性脂蛋白抗原(LSP)肝细胞膜抗原 (LWAg),暴 露,破坏肝C表面结构,自身抗体/自身CTL或淋巴因子,II /IV,致癌作用,HBxAg可反式激活细胞内原癌基因，是致癌的启动因子，引起原发性肝细胞肝癌。,Cirrhotic liver,Liver Cancer,Venous Collaterals Abdominal Wall,Complication of Cirrhosis - Ascites,Jaundice,Liver Palm,Spider naevus,Symptoms of HBV infection,三、微生物学检查,两对半 DNA DNA P,HBsAg，抗-HBs 抗-HBcHBeAg，抗-HBe,是HBV感染、复制和血液有传染性的直接标志诊断乙肝指标、药物疗效考核指标,是HBV复制和血液有传染性的标志诊断活动性肝炎的指标,预防,四、防治原则,治疗,抗病毒药物：贺普丁 贺维力干扰素、免疫调节剂护肝药物,加强对供血员筛选严格消毒，防止医源性传播主动免疫：注射乙肝疫苗被动免疫：注射高效价HBIg,第3节 丙型肝炎病毒（hepatitis C virus, HCV),Predominant cause of non A non B hepatitis,球形，50nm, 基因组为+ssRNA, 长约 9.5 kb，衣壳二十面体立体对称，有包膜，包膜上有剌突。,生物学性状：,Transfusion 40%,Injection Drug Use 30%,Household Contact 5%,Sexual 15%,Pregnant women 10%,Sources of Infection for Persons with Hepatitis C,Other 5%,80%输血后肝炎由HCV引起 隐性感染多 较HBV更易转为慢性 与肝硬化、肝癌关系密切 常与其他肝炎病毒混合感染 临床表现比急性乙肝轻 机体免疫力不牢固，感染后无保护性抗体,临床特点：,病毒的直接致病作用： 病毒在肝细胞内复制，直接损伤肝细胞 免疫病理作用： 特异性CTL对肝细胞的杀伤作用,HCV损伤机制：,第4节 丁型肝炎病毒（hepatitis D virus, HDV),HDV是一种缺陷病毒，表面为HBV包膜，主要含有HBsAg，内部为HDAg(抗原)，核心为环状-ssRNA ，约1.7 kb 。,35-37 nm,HDAg,HDV的特点：,复制：HDV