刘东强应化101-我国食品安全检测技术的现状与前景 2.doc

我国食品安全检测技术的现状与前景摘要：目前食品安全问题已经成为全世界备受关注的问题。文章介绍了目前常用的食品安全快速检测技术，并对我国食品安全检测技术的研究进展、应用现状及发展方向进行了论述。关键词：食品安全；快速检测技术；研究进展；应用现状；发展方向在工业化及全球化高速发展的今天，随着食品生产和生活水平的现代化，人们对食品的消费逐渐向社会化转变，由原来主要由家庭烹饪转向以专业企业加工生产为主，食品安全的隐患也随之增加。目前食品安全问题已经成为我国开展农产品和食品对外贸易，获得国际市场准人的重要制约因素。从根本上解决我国的食品安全问题，就必须对食品的生产、加工、流通和销售等各环节实施全程管理和监控，这就需要大量能够满足这一要求的快速、方便、准确、灵敏的食品安全分析检测技术。因此，近年来这类技术发展很快，尤其以现代生物技术为基础的食品安全检测技术发展最快。所谓食品快速检测是指作为理化检验，能够在内得出检验结果即可认为是较快的方法。1 目前常用的食品安全快速检测技术生物学技术发展很快，种类很多，其中大多数都能用于食品安全检测。当前比较常用的快速检测方法主要有陕速检验纸片法、免疫学技术、分子生物学检测方法等。.免疫学技术免疫学技术通过抗原和抗体的特异性结合反应，再辅以免疫放大技术来鉴别细菌。免疫方法的优点是样品在进行选择性增菌后，不需分离，即可采用免疫技术进行筛选。由于抗原抗体反应的特异性，所以该方法的种类特别多，目前用于食品安全检测的技术主要有免疫磁珠分离法、免疫力检测试剂条、免疫乳胶试剂、免疫酶技术、免疫深沉法或免疫色谱法等。由于免疫法有较高灵敏度，样品经增菌后可在较短的时间内达到检出度，抗原和抗体的结合反应可在很短时间内完成。如利用免疫磁珠分离技术可有效地收集、浓缩大量样品中的少量病原微生物，为研究 阳性副溶血性弧菌引起的食物中毒的预防提供了重要的应用价值。胶体金免疫层析法可用于迅速检测沙门氏菌，将抗沙门氏菌多抗用抗原吸收法封闭与其菌的交叉反应，标记胶体金溶胶制成探针，采用多膜复合的方法制成免疫层析条，有良好的开发应用前景。. 快速检验纸片法目前已经有许多微生物检测纸片，可分别检测菌落总数、大肠菌群、霉菌、沙门菌、葡萄球菌等，这些纸片陕速检测与传统检测方法之间的相关性非常好。如用大肠菌群快检纸片检测餐具的表面，操作简便、快速、省料，特异性和敏感性与发酵法符合率高。美国 公司生产的 （） 试纸还加入了染色剂、显色剂，增强了效果，而且避免了热琼脂法不适宜受损细菌恢复的缺陷。在大肠菌群检测方面，国际方法报告的是 值而不是每克食品中的大肠菌群数， 法则可以得出精确数据。霉菌陕速检测纸片采用 或 生化培养箱培养 就可以观察结果，能够准确、快速地反映食品中霉菌的实际污染情况。纸片法与国标法在霉菌检出率上无显著性差异，且菌落典型，易判定。纸片荧光法利用细菌产生某些代谢酶或代谢产物的特点而建立的一种酶底物反应法。只需检测食品中大肠菌群、大肠杆菌的有关酶的活性，将荧光产物在 紫外光下观察即可。同时纸片可高压灭菌处理， 保存，简化了实验准备、操作和判断。 分子生物学检测方法1.3.1农产品加工聚合酶链式反应是近年来分子生物学领域中迅速发展和广泛应用的一种技术。 技术检测细菌的基本原理是应用细遗传物质中各菌属菌种高度保守的核酸序列，设计出相关引物，对提取到的细菌核酸片段进行扩增，进而用凝胶电泳和紫外核酸检测仪观察扩增结果。从曾开始到得出实验结果一般仅需，再加上富集的时间，整个过程所需的时间可以控制在之内。目前对该法自身的应用研究也日新月异，如派生出免疫捕获 、荧光定量基因芯片技术等。1.3.1 免疫捕获 PCR 法根据特异性抗体与病原菌菌体抗原特异性结合的免疫学原理，将特异性抗体包被于磁珠或管壁上，富集或捕获菌悬液和标本中的病原菌，再进行 反应，即可检测目标病原菌。如病原菌检测，基于生化特性的传统培养法约需，而本方法只需 ，如有必要，亦只需增菌以提高灵敏度。1.3.2 荧光定量 PCR 法荧光定量在传统的基础上添加一条标记个荧光基团的探针，构成了能量传递结构,端荧光基团发出的荧光可被的荧光基团吸收。当有特异发生时，探针在过程中被酶的外切酶活性作用分解，荧光抑制作用消失，从而引起荧光信号的增长。在 过程中，连续不断地检测反应体系中的荧光信号变化，并由循环数与荧光值作图，阳性反应管呈现特征性的曲线，根据曲线特征可判断体系中是否有特异 扩增，同时与一系列标准比较可对体系中模板进行定量。荧光定量采用闭管检测扩增后无须电泳，减少了污染的可能性。用检测荧光值代替肉眼分析结果，灵敏度比定性可以提高个数量级。1.3.3 细菌直接计数法主要包括流式细胞仪和固相细胞计数法。流式细胞仪通常以激光作为发光源，经过聚焦整形后的光垂直照射在样品流上，被荧光染色的细胞在激光束的照射下产生散射光和激发荧光。光散射信号基本上反映了细胞体积的大小；荧光信号的强度则代表了细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度，由此可通过仪器检测散射光信号和荧光信号来估计微生物的大小、形状和数量。流式细胞计数具有高度的敏感性，可同时对目的菌进行定性和定量。目前已经建立了细菌总数、致病性沙门菌、大肠埃希氏菌等的 检验方法。固相细胞计数可以在单个细胞水平对细菌进行快速检测。滤过样品后，存留的微生物在滤膜上进行荧光标记，采用激光扫描设备自动计数。每个荧光点可直观地由通过计算机驱动的流动台连接到上的落射荧光显微镜来检测，尤其对于生长缓慢的微生物，检测用时短使该方法明显优于传统平板计数法。1.3.4 ATP 生物发光法该法是近年发展较快的一种用于食品生产加工设备结晶度检测的快速检测方法。利用 生物发光法分析技术和体细胞清除技术，测量细菌和体细胞，细菌 的量与细菌数成正比。用生物发光分析技术检测肉类食品细菌污染状况或食品器具的现场卫生学检测，都能够达到快速适时的目标。1.3.5 微型自动荧光酶标法（Mini VIDAS）该法是利用酶联荧光免疫分析技术，通过抗原抗体特异反应，分离出目标菌，由特殊仪器根据荧光的强弱自动判断样品的阳性或阴性。法检测食品沙门菌较常规法敏感特异，用其检测为阴性的样品能很快作出非沙门菌的判断，比常规法可提前天。2 我国食品安全检测技术的研究进展经过我国食品安全检验实验室科研人员的多年努力，我国在农药残留检测、兽药残留检测、重要有机物的痕量与超痕量检测、食品添加剂与违禁化学品检验方法、生物毒素和中毒控制常见毒素检测、食品中重要人畜疾病病原体检测技术等方面的研究取得很大进展。2.1兽药残留检测技术方面研究我国开展了多残留仪器分析和验证方法研究。完成了包括 兴奋剂、激素、磺胺、四环素类、氟霉素类、硝基呋喃类、内酰胺类、苯并咪唑类、阿维菌类、喹喏酮类、硝基咪唑类、氨基糖苷类、氨基硫脲类等项药物的检测研究。完成新型综合微量样品处理仪、超临界流体萃取在线富集离线净化装置、高效快速浓缩仪、便携式酶标仪的研制。2.2 在农药残留检测技术方面的研究重点研究酶抑制法和仪器分析法。酶抑制法检测试纸已研制成功，测试盒及酶速测仪也研究成功，胶体测试条正在研究。食品中种农药残留系统检测技术正在研究中，已建立了苄嘧磺隆等种农药单残留检验方法。食品安全移动检测车也已研制成功，并正在开发陕速样品净化仪等其他小型设备。. 在重要有机污染物的痕量与超痕量检测技术方面的研究完成二恶英、多氯联苯和氯丙醇的痕量与超痕量检测技术的研究；建立了种具有二恶英活性共平面单体同位素稀释高分辨质谱方法；建立了以稳定性同位素稀释技术同时测定食品中氯丙醇方法；建立了食品中丙烯酰胺、有机锡、灭蚊灵、六氯苯的检测技术。. 在生物毒素检测技术方面的研究研究成功真菌毒素、藻类毒素、贝类毒素试剂盒和检测方法，建立了果汁中展青霉素的高效液相色谱方法。. 在食品添加剂、饲料添加剂与违禁化学检验技术方面的研究开展了纽甜、三氟蔗糖、防腐剂的快速检测；进行了番茄红色素、辣椒红色素、甜菜红色素、红花色素、饲料添加剂虾青素、白梨芦醇等的检测研究；建立了阿力甜、姜黄素，保健食品中的红景天甙、种脂肪酸测定方法，番茄红素和叶黄素、红曲发酵产物中开环结构的定量分析方法，食品（焦糖色素、酱油）中 甲基咪唑含量的毛细管气相色谱分析方法，芬氟拉明、杂氟拉明、杂醇油快速检验方法，磷化物快速检验方法。3 食品安全快速检测技术的应用现状随着世界经济的全球化，食品跨国界和跨地区的流通越来越频繁，各种食品的安全事故和隐患也呈扩展趋势，食品安全快速检测技术在当前得到了很好的推广和应用。控制农药残留对人体的危害，最为有效的方法之一是强化对食品中农药残留检测的力度。国内外诸多研究者研究开发了多种农药残留的快速检测方法。 参考文献1刘晓芳.水库工程防渗漏处理J.城市建设理论研究（电子版），2011(31). 2刘玉华.论水库工程中的防渗漏控制J.科技致富向导，2011(14). 3赵立峰.水库工程防渗漏处理技术分析J.中国科技博4牛智有 ,韩鲁佳.食品安全质量管理体系 ( HACCP)及其应用发展现状J .粮油加工与食品机械 ,2004 (4) :59 - 61.5张志洁 ,林清玉.我国食品安全检测主要应用技术的研究及现状J .食品工业科技 ,2003 ,24 (12) :89 - 91 ,102.6 Mallat E ,Barzen C ,Abuknesha R ,et al. Fast determination of paraquat residues in water by an optical immuno sensor and validation using capillary elect rop ho resisult raviolet detection. Anal. Chim. Acta. , 2001 ( 427 ) :165 - 171.7郑和辉 ,吕静 .农药残留检测技术进展概况 J .农药科学与管理 ,1997 ,18 (2) :10 - 12.8王选年 .盐酸克伦特罗的残留及检测 J .动物医学进展 ,2002 ,23 (3) :41 - 46.9郑明辉 .二 英类化合物分析研究进展 J .分析测试学报 ,2002 ,21 (4) :91 - 94.10何欣荣 .食品安全与食源性疾病控制研究进展 J .安徽预防医学杂志 ,2002 (6) :384 - 388.11关怀 .新的食源性疾病与食品安全 J .国外医学 :卫生学分册 ,2001 ,28 (1) :17 - 19.12姚文国 ,朱水芳 .转基因食品检验分析技术概述 J .粮油食品科技 ,2003 ,11 (1) :26 - 28.13侯为道 ,张丽 ,杨梅 .食源性疾病的流行因素及监测与控制进展 J . Jo urnal of Preventive Medicine Info r2matio n ,2003 ,19 (2) :118 - 121.14金