新生儿筛查-张文敏

串联质谱检验项目介绍新生儿筛查,项目组 张文敏2013年11月09日,内容,1.遗传代谢病介绍 2.质谱技术在遗传代谢病检测中的应用 3.中国目前市场状况,遗传代谢病 Inborn Errors of MetabolismInherited Metabolic Disorders，IMD,属单基因遗传病,在出生缺陷疾病中占有重要地位;它是遗传性生化代谢缺陷的总称,因单基因突变,导致与蛋白质、碳水化合物、脂肪、类固醇等代谢有关的酶或转运蛋白缺陷，使得代谢通路受阻致病。发病机制： 底物蓄积、产物的缺乏、旁路代谢产生毒副产物、调控导致中间产物过剩、细胞器功能异常（溶酶体贮积症、过氧化物酶体疾病、线粒体病）。 遗传代谢病是现代儿科领域最具发展前景的方向之一，临床质谱技术、分子生物学、生物信息学的应用，为遗传代谢病的检测和诊断提供了快速发展的时机。,遗传,代谢,1、多数为常染色体隐性遗传2、多数确诊需要基因检测,1、采血时间在充分哺乳，72小时后2、多种疾病通过饮食干预可以控制。,遗传代谢病的发展,美国：1962日本：1966中国：1981,遗传代谢病的分类:,1.氨基酸代谢病:苯丙酮尿症、枫糖尿病、同型胱氨酸尿症、酪氨酸血症等；2.脂肪酸氧化缺陷病：肉碱棕榈酰合成酶缺乏症、肉碱/酰基肉碱移位酶、中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症等；3.有机酸代谢病：甲基丙二酸血症、丙酸血症、异戊酸血症、戊二酸血症等；4.碳水化合物代谢病：半乳糖血症、G6PD缺乏症、糖原累积病等；5.尿素循环障碍和高氨血症：氨甲酰磷酸合成酶缺陷、瓜氨酸血症、精氨酸琥珀酰血症等；6.溶酶体贮积症:戈谢病、尼曼皮克病、粘多糖病等；7.线粒体病；8.其他：类固醇激素、脂类、维生素、辅酶和辅助因子、糖基化、金属代谢、卟啉、嘌呤嘧啶代谢等；,遗传代谢病的特点,1.病种：4000种，多数为常染色体隐性遗传，常见病500多种；2.少见病，发病率低；3.临床表现：喂养困难、发育落后、肌张力改变、嗜睡、昏迷、抽搐、多动症、不明原因的心肌病、肝脾肿大；临床怀疑容易，确诊太难；4.常规化验：缺乏特异标志物；5.部分基本代谢物检测可提示：低血糖、酸中毒、高血氨、高乳酸等；6.影像学检查：头颅CT或MRI缺乏特异表现.,首要遗传代谢病,注：25种次要疾病（secondary tagerts），疾病是首要疾病鉴别诊断的一部分。,新筛市场情况-各国筛查情况,新筛市场情况-我国筛查情况,新筛市场情况-我国筛查情况,检验技术,一、苯丙酮尿症筛查方法： (1)、细菌抑制法，(2)、荧光分析法，(3)、酶法，(4)、高效液相色谱法，(5)、氨基酸分析法，(6)、高效毛细管电泳法。而国家新筛技术规范中规定的方法是荧光分析法、定量酶法、细菌抑制法和串联质谱法。各省较多使用的是细菌抑制法和荧光分析法。二、先天性甲状腺功能减低症：以促甲状腺素（TSH）作为筛查指标，规定的筛查方法为时间分辨免疫荧光分析法（Tr-FIA）、酶免疫荧光分析法（FEIA）和酶联免疫吸附法（ELISA）。,新筛流程图,采血规范,新筛市场情况-各省筛查情况,几组数据展示,29省的945家助产单位（七五期间的86-87一整年）共采集到28069例出生缺陷，占千分之11.79.新生儿死亡的原因中，由于缺陷导致的死亡占据了33%以上。2007年-2011年 浙江省筛查257972例，筛查出14种遗传代谢病共37例，阳性率1/6970.（全国的阳性率目前为1/3000）今年，2013年是世界新生儿疾病筛查开展 50周年,临床质谱学,仪器1.质谱仪：将被测物质分子电离成各种质荷比m/s不同的带电粒子，然后应用电磁学原理，使这些带电粒子按照质荷比大小在空间或时间上分离，排列成图谱，通过测定离子峰的强度，获得确定化合物的相对分子质量、分子式，从而定性或定量；2.串联质谱仪： 将两个质谱仪经一个碰撞室串联而成，第一台质谱仪作为分离器；第二台作为分析仪，用作组份的鉴定器，对混合物进行直接分析。,临床质谱学,临床质谱学-质谱仪原理,质谱法：一种测量电荷-质量比的分析方法； 同位素成分 有机物构造 元素成分,临床质谱学-质谱仪应用,临床质谱学-质谱仪分类,临床质谱学各种质谱仪,ICP-MS等离子体质谱仪,临床质谱学各种质谱仪,电感耦合等离子体质谱仪,临床质谱学各种质谱仪,离子体发射光谱质谱仪（ICP-MASS ）,电喷雾电离质谱,临床质谱学各种质谱仪,气相色谱- 质谱仪(GC-MS),临床质谱学各种质谱仪,四极杆傅立叶变换串联质谱仪（solariX）-布鲁克-道尔顿,临床质谱学各种质谱仪,实验方法,仪器的适用性与灵敏度,部分中心采用的仪器,串联质谱技术检测的疾病谱,1.氨基酸代谢病： 14种；2.脂肪酸氧化障碍疾病：13种；3.有机酸血症：15种.,新筛市场情况-各地区收费,市场容量,中国2012年串联质谱新筛市场-9000万人民币1.浙江省妇幼：4000万（政府买单、省卫生厅文件要求送）；2.金域检验：2500万；3.上海新华医院：1000万左右；4.北京敏路思：500万左右（依托北京儿童医院收标本，和日本的诊断数据库）；5.北京协和洛奇：300万（北方区域较多）；6.艾迪康：100万左右（如湖北等地）.,金域检验,1.5台质谱仪，年检验量近8万人份；2.2010年启动，2011年和2012年在全国各地举办了大量的市场活动；3.许多省份如福建、四川、重庆、云南、东三省、江苏、贵阳等都在往金域送标本；4.除串联质谱开展氨基酸和酰基肉碱检测外，也开展气相质谱有机酸检测。,我们的市场容量估计,全国妇儿医院共有286家，其他有产科的综合医院还有许多。针对有产科的医院客户进行推广，每月的数量大约在30-100例/家浮动。（目前我们接受标本的一家卫生院级