生物技术专业08级分子生物学试题(B卷)(参考答案).doc

天水师范学院生化学院20102011学年度第二学期 生物技术专业2008级考试试题参考答案（B卷） 科目：分子生物学题目一二三四五六总分得分一 名词解释1Hyperchromatic：DNA的变性发生在一个狭窄的温度范围内，在DNA的变性过程中，它在260nm处的O.D值先是缓慢上升，达到某一温度后骤然上升，称为增色效应。2Error-prone repair：是指DNA受到严重损伤、细胞处于危急状态时所诱导的一种DNA修复方式，修复结果只是能维持基因组的完整性，提高细胞的生成率，但留下的错误较多，故又称SOS修复，使细胞有较高的突变率。3Restriction endonuclease：特异性地结合在一段特殊DNA序列之内或附近，并在此处切割双链DNA的一类核酸内切酶。4Dot-blotting：指将DNA或RNA样品直接点在硝酸纤维素膜上，然后与核酸探针作分子杂交以显示样品中是否存在特异的DNA或RNA，同一样品经不同倍数的稀释可得到定量的结果，故它是分析DNA或RNA快速、节时和经济的方法。5Ribozyme：是具有催化活性的RNA，它们大部分参与RNA的加工和后熟。 6Gene family：真核细胞的DNA都是单顺反子，许多相关的基因常常按功能成套组合，一套基因就是一个基因家族。家族中各成员的表达水平和酶活性可以很不相同，但通常是密切相关的。通常分为简单多基因家族、复杂多基因家族和发育调控的复杂多基因家族。7Basic-leucine zipper：在许多调控蛋白中发现的一段富含亮AA的序列，这个区域易形成螺旋或卷曲螺旋的构象，具有这种“拉链”形式的两个蛋白就能形成稳定的二聚体。拉链区以外的AA大都呈碱性，具的结合DNA的本领。 8Fusion protein：指蛋白的N末端由原核DNA序列或其它DNA序列编码，C端由真核DNA的完整序列编码。这样的Pr由一条短的原核多肽或具有其它功能的多肽和真核Pr结合在一起，故称为融合蛋白。9asRNA：一种通过与mRNA互补形成双链结构而调节基因表达的RNA分子，称之为asRNA。10Corepressor：生物合成的酶类受其终产物的抑制，如组AA为组AA生物合成酶类的终产物，这种酶称为阻碍酶。导致某种阻碍酶数量降低的终产物则称为辅阻碍物（corepressor）二、填空1核苷酸由三部分组成，这三部分是碱基、戊糖、磷酸。2在PCR反应中的三个循环步骤依次为变性、退火、延伸。3在DNA聚合酶中，持续合成能力最强的酶是T7DNA聚合酶，能耐高温的酶是Tag DNA polymerase，其最适活性温度为74。4将DNA从凝胶转移到NC膜上用核酸探针进行杂交的方法称为Southern-blotting。5真核生物DNA水平的调控方式有基因丢失、基因扩增、基因重排与变换。6由于真核细胞的DNA都是单顺反子，许多相关的基因常常按功能成套组合，一套基因就是一个基因家族。通常分为简单多基因家族、复杂多基因家族和发育调控的复杂多基因家族。7DNA的甲基化作用是在甲基化酶的作用下发生的一种基因修饰作用。分析基因序列中特定核苷酸上碱基的甲基化状态常用一组切割相同序列但对DNA甲基化敏感性不同的同裂酶来进行。8DNA损伤的切除修复需要4种酶的一系列作用来完成，这四种酶依修复次序分别是核酸内切酶、核酸外切酶、DNA聚合酶和DNA连接酶。9真核基因在大肠杆菌中的表达方式主要有融合蛋白、非融合蛋白、分泌型蛋白、包涵体。10DNA微点阵芯片的制作方法主要有原位合成型和点膜型两类。三、选择题 1在溶液中，DNA为B型，当水合的B-DNA脱水，或由于加入乙醇或盐而使水的活度降低时，DNA就转变为A型，A-DNA每匝螺旋的碱基对数为（ B ） A 10 B 11 C 12 D 13 2用于纯化mRNA的层析方法是（ A ）A 亲和层析 B 排阻层析C 吸附层析 D 离子交换层析 3在DNA的5端标记时，需把ATP中的磷酸转移到核酸的5OH上，用于转移的这种酶是（ B ）A 末端转移酶 B 磷酸激酶C 碱性磷酸酶 D S1核酸酶 4DNA结构中，活性最高的构象是：（ B ） A A-DNA B B-DNA C Z-DNA D 超螺旋DNA 5在乳操纵子中，阻遏蛋白结合的是：（ A ） A 操纵基因 B 启动基因 C 结构基因 D 调节基因 6当外源基因在原核细胞，尤其在大肠杆菌中高效表达时，往往产生（ D ）。A 融合蛋白 B 非融合蛋白 C 分泌型蛋白 D 包涵体 7对基因工程载体的描述，下列哪个不正确：（ D ）A.都可以转入宿主细胞B.都有限制性核酸内切酶的识别位点C.都可以连接进目的基因D.都是环状双链DNA分子E.都有筛选标志 8真核生物基因组中没有：（ C ）A.内含子B.外显子C.转录因子D.插入序列E.高度重复序列9锌指蛋白结构体与哪种蛋白质功能有关？（ B ） A 激酶活性 B DNA结合 C mRNA剪接 D DNA复制10组成细菌核糖体的亚基是（ B ）。 A 20S，40S B 30S，50S C 40S，60S D 50S，70S四、问答题与分析题 1简述原核生物与真核生物RNA聚合酶的主要区别。（一） 原核生物的RNA聚合酶： 研究最为详细的是大肠杆菌RNA聚合酶 1 该酶负责合成细菌中所有mRNA、rRNA和tRNA分子的合成。 2 它由因子及核心酶两个部分组成。 因子是一种Pr因子，负责RNA合成的起始。 核心酶由两个a亚基，一个亚基和一个亚基组成（a2）。 与因子相结合的核心酶又称全酶，总相对M、N：4.8105D每个细胞中约有7000个,根据细胞生长情况,任何时候都可有2000-5000个酶在执行转录DNA模板的功能。 3 因子的作用是负责模板链的选择和转录的起始，它是酶的别构效应物，使酶专一性识别模板上的启动子。 核心酶负责转录由全酶识别并形成单链DNA的模板。当聚合酶按53方向延伸RNA链时，解旋的DNA区域也随之移动。 两个亚基结合启动子区，亚基结合核苷酸，结合模板DNA。是利复平和链霉素两种RNA合成抑制剂的结合位点，前者抑制转录的起始，后者抑制RNA链的延伸。（二）真核生物RNA聚合酶 真核生物中有3种RNA聚合酶，分别叫、。主要根据对-鹅膏蕈碱（-amanitine）的敏感性不同来区别。 1 RNA聚合酶：基本不受-鹅膏蕈碱的抑制，在大于10-3mol/L时才表现出轻微的抑制作用。此酶存在于核仁中，其功能是合成rRNA。 2 RNA聚合酶：对-鹅膏蕈碱最为敏感，在10-910-8mol/L浓度下就被抑制。存在于核质中，其功能是合成mRNA。 3 RNA聚合酶：对-鹅膏蕈碱的敏感性介于酶和酶之间，在10-510-4mol/L时表现出抑制作用。存在于核质中，其功能是合成tRNA。2什么是c DNA文库？同基因组文库有何差别？利用纯化的总mRNA在逆转录酶的作用下，合成互补的DNA即cDNA，选用合适的载体，将合成的cDNA重组导入寄主细胞，经筛选得到的cDNA克隆群称为c DNA文库。其不含内含子，由于细胞内的基因在表达的时间上并非统一，具有发育的阶段性和时间性，有些则需要特殊的环境条件，所以，c DNA文库是不可能构建得十分完全的，即任何一个c DNA文库都不可能包含某一生物的全部编码基因。c DNA文库同基因组文库的差别为（1）基因组文库克隆的是任何基因，包括未知功能的DNA序列，c DNA文库克隆的是具有蛋白质产物的结构基因，包括调节基因。（2）基因组文库克隆的是全部遗传信息，不受时空影响，c DNA文库克隆的是不完全编码的DNA序列，因它受发育和调控因子的影响。（3）基因组文库的编码基因是真实基因，含有内含子和外显子，而c DNA克隆的是不含内含子的基因。3真核生物染色质结构的变化对基因调控有何影响？转录发生之前，染色质常常会在特定的区域被解旋或松驰，形成自由DNA。这种变化包括核小体结构的消除或改变，DNA本身局部结构的变化如双螺旋的局部超旋或松驰，DNA从B-DNA变为Z-DNA等。这些变化导致结构基因暴露，促进转录因子与启动区DNA的结合，从而导致基因的转录。活跃表达的基因所在的染色质上含有对DNase的超敏感位点(hypersensitive site)，即率先降解位点。每个活跃表达基因都有一个或数个超敏感位点，大多位于基因5端启动区。每个超敏感位点是一段长约100-200bp的DNA序列。非活跃基因的5端相应位点不表现对DNase的超敏感性。4某一质