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文档简介
标本采集与处理,浙江绿城医院 钟步云,标本采集概述,为保证临床检验质量,必须对实验室检查全过程实行质量控制。包括检验分析前、分析中和分析后三个阶段的质量控制,其中分析前质量控制是前提。国内外均有报道,检验结果差错中70%左右来自分析前,而且这分析前的差错是仪器、试剂、质控品和标准品等再好也无法解决的。,分析前质量控制包括:患者的准备,标本的采集,标本的储存,标本的运送,标本的处理,己知的和需考虑的生物因素与干扰因素等。,患者的准备,根据所采标本的类型和所分析的物质而定。许多非疾病因素如是否空腹、精神状况、体力活动、使用药物和食物等都可影响检验结果。因此,在标本采集前要根据需要对患者做好相应准备。一般要求患者处于安静状态,晨起时的精神、体力、情绪等因素影响较小。如可能,患者最好停服干扰检验的药物,根据检测项目和标本类别选择相应的容器。,空腹血采集前至少要空腹8小时,血脂测定须禁食1214小时,情绪紧张、激动会使血糖升高,吗啡、可卡咽可使淀粉酶升高,采血前按摩前列腺可使酸性磷酸酶升高,醛固酮检测要在起床活动前取卧位血,起床后活动2小时取立位血,尿液按不同检查项目分别留取晨尿、随机尿、计时尿,大便隐血检查前要素食,禁食含动物血的食物,细菌培养标本最好在使用抗生素之前等。,标本的储存:当标本不能及时送检时,已釆集的标本要按检验要求的贮存条件,如窒温、冷藏、冰浴、温浴或防腐贮存。标本要直立于稳定、干燥、避光、密闭的环境中,避免振摇。检测好的标本也要按规定条件保存一定时间,以备复查。,标本运送:防止标本外溢、蒸发、污染。严格控制运送途中温度。运送途中避免剧烈振动。标本送到实验室后的核对、交接、签收。,标本的处理:标本接收、核对唯一标识、检验项目与标本类型一致、确认标本有效(无损坏、污染),检验费验收等。实验室收到标本后按检验项目要求及时正确地予以分类、处理。,已知的和必须考虑的生物因素与干扰因素:常见的干扰因素有:溶血脂血、黄胆血血液凝固或部分凝固或细小凝固颗粒抗凝药物、治疗药物及其代谢产物、输注液。抗凝剂、残留容器的洗涤液、细菌、霉菌。,(一) 标本溶血常见原因及对检验结果的影响,溶血标本对检验结果影响很复杂,常见有:1)血细胞内成分释放出来,影响血清(血浆)测定项目结果,如K、游离Hb、LDH、Cr、ALT、直接胆红素,Na、UA、CK、rGT等。2)溶血导致红细胞计数,并影响由此换算的红细胞各项指标异常。,3)血红素对仪器光学测定的干扰。4)血细胞成分对检验方法的影响。如血细胞释放的腺苷酸激酶对CPK检测方法的影响。所以溶血标本不能用。,(二)血标本凝血常见原因及对检验结果的影响,血标本凝血常见原因有: 1.抽血后忘记或简单晃动几下,全血与抗凝剂混合不匀,导致凝血(肉眼难以观察的小凝块)。 2.抗凝剂相对不足。3.采血不顺利,导致组织损伤,组织凝血活酶进入血标本而致外源性凝血。,凝血对检验结果的影响有:1)凝血试验项目因疑血因子己部分消耗而不准确。2)血细胞计数项目尤其是血小板计数结果受影响,。 3)血液凝块可阻塞血细胞分析仪管口或管内腔。,(三)采血量、抗凝剂的问题,1.所抽血量应足够试验用量,同时略有多余,以备复测。2.抽取的血液量应与抗凝剂的比例适中。血液比例多,抗凝剂不足,易出现微小血凝决,影响很多试验结果;血液比例少,抗凝剂过量,影响凝血因子测定结果,如APTT延长;过多抗凝剂会改变血细胞形态,如EDTA浓度达到2.5mg/ml,中性粒细胞肿胀,分叶核消失,血小板肿胀、崩解,导致血细胞计数出错等。,3.不同抗凝剂的用途不同、配制浓度不同,抗凝剂与血液的比例也不同。所以,真空采血时必须按真空采血管所标示的抗凝剂种类和采血量的位置采血。,(四)凝血试验(因子)标本采集,临床上同时采集多管血标本时,凝血试验标本以第一管为好。因为第二、三管血标本的凝血试验检测结果可能与第一管有明显差异。其原因可能与后面采集的血标本某些凝血因子被激活有关。,凝血试验血标本以室温保存为好,及时送检,及时检测。0.11mol/L枸橼酸盐抗凝剂与血液的比例为1:9,要求准确。由于真空采血管采血后上部空余部分称为“死腔”,血液与死腔管壁接触摩擦可使血小板激活释放PF4。PF4会中和血液中的肝素,使APTT检测结果缩短。因此,在选择APTT监测肝素用药时或监测血小板功能时,应选用死腔少的真空采血管。,(五)脂血标本、黄疸标本对临床检验结果的影响,脂血标本由于血清混浊对比色分析的干扰外,脂蛋白可以结合亲脂成分,降低与抗体的结合,从而干扰免疫检测结果。 黄疸标本由于总胆红素增高,常会干扰如血糖、肌酐等许多生化检测项目。,标本采集的基本原则,1. 按检验项目申请单要求认真填写,这是临床检验工作的第一步。2. 采集标本前,要核对检验申请单病人基本信息是否属实?核对标本容器、标识与申请单上信息是否相符?核对无误后再采集或收集标本。3. 按标本采集方法采集,要收集足够的标本于规定的容器中并及时送检。4. 在标本采集、送检过程中有不明地方及时与检验科联系。,实验室拒收标本的规定,1. 标本属性(含病人资料)不清、标记错误或无标记、标本标识与申请单标识不符。2. 抗凝剂错误或比例错误。3. 标本收集管使用错误。4. 血常规、凝血试验、血沉等抗凝血标本有凝块或凝固。5. 细菌培养标本未用无菌容器、被污染、标本已干、储存或运送不当(该冷藏而未冷藏、不应冷藏而冷藏,厌氧菌培养而未厌氧保存运送)等。6. 病理标本标识不清或与申请单不符、光标本无申请单或有申请单无标本、标本无固定液或已自溶、腐败、干涸。7. 病理标本不完整、送检单不规范(缺病史、手术所见或填写不全、字迹不清难认者),标本种类、数量或体积形态描述与送检单不符。等等,一. 常规标本采集方法,(一)血液标本采集:1. 一般血液生化检验标本以早晨采集空腹(采血前禁食12小时)静脉血为佳。1.1 血常规、凝血试验等抗凝血标本,应优先采集,分 别采入含有特定抗凝剂管中,并立即颠倒8次混匀。1.2 生化检验项目如肝功能、血脂、蛋白质、尿酸、无机离子、酶类测定,采入专用洁净试管(冷天可放 置37水浴),待凝固后立即分离血清。1.3 血糖、糖耐量试验采用血糖专用抗凝管采血,采血后颠倒8次混匀,1小时内分离血清(血浆)并及时冷藏送检。1.4 血清免疫检验项目采入专用血清标本试管。1.5 特殊检验项目按特殊要求的方法、时间、标本管、采集处理(如高血压三项、皮质醇)。,2. 真空采血管使用指南:,2.1 黄色头盖:内含分离胶,分离血清快。生化全套, 肝、肾功能,血脂,电解质,急诊生化,心肌酶, 过敏原,乙肝三系及多种免疫血清学检查标本。2.2 红色头盖:不含分离胶,分离血清慢。用途同上 述。通常用于血清免疫检测标本。2.3 紫红色头盖:含EDTA K2/K3抗凝剂,用于血常规、 血交叉、流式细胞分析、糖化血红蛋白、ACTH等 检测标本。,2.4 蓝色头盖:含枸橼酸盐抗凝剂,用于PT、APTT、 FIB、TT,出凝血全套,溶血试验,纤溶试验等 检测标本。2.5 黑色头盖:含枸橼酸盐抗凝剂,用于血沉试验。2.6 灰色头盖:含草酸盐、氟化钠抗凝剂,用于血糖 测定标本。2.7 绿色头盖:含肝素抗凝剂,常用于血液微量元素 分析、血粘度标本。2.8 高血压三项有专用抗凝管。,3. 注意准确选用标本管、抗凝管,注意抽血量与 抗凝剂的比例,抗凝血则立即颠倒8次混匀。,3.1 血常规检查:用EDTA-K2抗凝剂1.5mg,可抗凝全 血1ml,抽血量以真空采血管刻度为准。轻轻颠倒 8次混匀。3.2 血沉检查:用0.11mol/L枸椽酸钠抗凝剂0.4ml,加 全血1.6ml轻轻颠倒8次混匀。3.3 凝血试验:用0.11mol/L枸椽酸钠抗凝剂1份加全血 9份,采血量以真空采血管刻度为准。轻轻颠倒8次 混匀。,3.4 血糖测定:用含氟化钠抗凝剂,取全血2ml,轻轻 颠倒8次混匀。3.5 生化项目测定:用血清,不抗凝,取全血4ml。3.6 免疫项目测定:用血清,不抗凝,取全血3ml。3.7 血气分析:动脉血,肝素抗凝,隔绝空气,取血 1ml,用双手挫动脉采血器(管)立即混匀后送检。3.8 内分泌激素检查:根据内分泌实验室要求抽血。3.9 血药浓度检测:根据临床药理实验室要求抽血。,(二)采集血标本的注意事项:,1. 空腹采血前应禁食12小时(血常规检验除外), 空腹采血时间尽可能在上午7时9时抽取。2. 做到唯一性标识,按照采血规范操作要求,不同的 检验项目应有不同的标识。采用真空采血管可以做 到。标本容器的标签(标识)要求有科别、床号, 患者姓名、性别,标本名称及量,检验目的,采集 时间。,3. 采血前4小时勿喝茶、咖啡、吸烟及饮酒。最好了解 病人对烟、酒、咖啡及成瘾性药物的接触史,供评价检验报告时参考。4. 采血尽量安排在服药、其他检查和治疗之前进行。血液细菌培养标本,最好在使用抗生素前抽取。5. 不能在病人“应激状态”下抽血,尤其是血脂、血糖、内分泌激素检查。(“应激”是指身体在生理状态下对周围环境变化的应答,进而导致实验室检查指标改变的一种适应状态)。应激对生理两个最显著的影响是血糖和皮质醇的增高。6. 抽血时病人的体位姿势尽量统一,坐位或卧位。,7. 止血带使用应在1min内完成,松紧度以能阻止静脉血流可,当血液进入针筒后即可松开止血带。如要重复使用止血带抽血,应在另一手臂上抽。8. 抽取血液以缓缓、均匀抽取为宜,应避免快速用力抽拉针心的做法。9. 药物浓度监测血标本,应根据药物浓度峰值期和稳定期时间抽取。10. 防止过失性采血:如边输液边抽血;留置静脉导管取血做凝血试验或从导管直接取血(必须先弃去相当于导管体积12倍量的血液后再取血标本)。11. 血标本抽取后,应贴好标签或条形码,注明抽血时 间,及时送检。12. 如要送较远实验室检测(需1小时以上送到)最好 先分离好血浆或血清后送检。,13. 红细胞中许多成分的浓度比血清中高几倍或几十倍,溶血可 影响该成分的分析,如血钾、乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶、谷 草转氨酶等溶血时会升高,而钠在溶血时会降低,故血液采 集要特别注意防止溶血。13.1 注射器及针头必须洁净干燥无菌,最好使用一次性注射器。13.2 止血带压脉时间不能过长,否则易引起多种成分的改变及 血管内溶血。13.3 抽取血液后应先将针头取下,缓慢将血液注入特定试管。13.4 抽血时针筒内产生的气泡不要注入试管中,否则易引起溶 血。,13.5 采取血标本后要及时分离血清,血中许多成分采血后可有 较大降低,如血糖可因红细胞酵解而明显降低;有些酶放 置后易失活,如前列腺酸性磷酸酶,室温1小时活性丧失 50%。分离血清及血浆时离心速度不宜过高,离心时间不 宜过长。14. 避免在静脉输液、服药时抽血作为待检标本。15. 血标本若不能及时送检,应分离血清或血浆放4保存。16. 测定免疫球蛋白IgG、IgM、IgA,C反应蛋白,C3、C4项 目的标本应及时分离血清放4,及时送检。17. 糖化血红蛋白用EDTA或肝素抗凝,不同的检测仪器与方法 需选用其相应的抗凝管。18. 一般情况下,正常人血清约占全血体积的55%,即1ml全血 约可以分离出0.5ml血清。,我院实际发生标本采集差错:,1. 血常规、凝血试验标本出现凝固或小凝块。2. 血液与抗凝剂比例不对,如凝血试验标本血量少(未到标示位)或血量多(高于标示位)。3. 标本溶血。4. 在输液手臂抽血标本(出现很高的血钾或血糖值)。5. 在留置静脉导管(埋针处)取血做凝血试验或从导管直接取血,未按规定必须先弃去相当于导管体积12倍量的血液后再取血标本。6. 血气分析标本抽取静脉血(应抽动脉血)送检,抽血后未及时与抗凝剂混匀,出现凝块,针头未封闭,出现汽泡。也有抽血后放置1个小时后送检。,7. 标本条码标识与标本检验项目不符,也有病人姓名、性别错误。标本管上条码标识与卷标本管的条码标识不一致。8. 细菌培养标本中血液细菌增菌培养瓶使用错误,痰培养标本留取方法不对(唾液),尿培养标本留取方法不对(细菌污染)。9. 交叉配血标本申请单上抽血者不签名。10.大便常规标本不用大便标本盒,用纸包送检。 等等!,(三)尿液标本采集,1. 存在的问题:1.1 尿标本常收集晨尿,采集的尿液标本放置时间 较长后才检验,有时会影响检验结果的准确性。1.2 临床用药对尿液检验的干扰较多见。1.3 患者留尿不规范,患者准备不到位。尤其是女性尿标本的留取,常不规范,故常被生殖道分泌物污染。尿液标本应该避免经血、白带、精液、粪便等混入,此外还应注意避免烟灰、糖纸等异物混入。不同的检测项目要选用适当的防腐剂。,2. 尿液标本常用防腐剂,2.1 浓盐酸:用量510ml1000ml尿液,适用于24小 时尿儿茶酚胺、VMA、17-羟和17-酮类固醇等测定。2.2 甲苯:用量510ml1000ml尿液,适用于24小时 尿肌酐、尿糖、蛋白质、丙酮等测定。 2.3 冰醋酸:用量510ml24小时尿液,适用于24小 时尿醛固酮测定。2.4 甲醛:用量25ml1000ml尿液,适用于尿液细 胞、管型的保存,如12小时尿沉渣细胞计数(Addis计数)。,3. 尿液常规检验标本采集: 定性检验随机采集中段尿样本,而定量分析需收集24小时尿样。收集以上两种标本,患者要按严格的步骤留取。下表为女性留取中段尿的步骤。 表 用于细菌培养的女性中段尿样收集方法 四块肥皂饱和的纱布、四块干纱布、手套、无菌容器, 戴上手套,两腿分开站在抽水马桶前,用一只手分开阴唇, 用肥皂饱和的纱布从前到后擦洗生殖器区域四次, 用干纱布从前到后擦四次, 一只手拿起盛尿容器, 排尿入抽水马桶, 将盛尿容器位于尿流中, 将残余尿排入抽水马桶。,(四) 脑脊液标本: 以无菌操作方法抽取脑脊液,注意分三管,第一管35ml于无菌试管中,用于细菌培养;第二管35ml用作脑脊液生化项目检验;第三管35ml用作脑脊液细胞计数。及时送检。(五) 胸、腹水标本,最好加0.51ml枸橼酸抗凝剂 混匀,以防凝固影响细胞计数。其余穿刺液如 心包积液、关节腔液、鞘膜积液在无菌操作抽 取标本后,及时送检。,(六) 前列腺标本取出后,必须马上送门诊化验室检 查,以防干燥。(七) 精液标本: 供标本者禁欲5天,用手淫法获取精液标本,保存在专用容器玻璃小瓶中,保暖,马上送检。 注意:请勿使用避孕套收集标本。,二. 特殊标本采集方法,(一)高血压系列1. 高血压三项(肾素、血管紧张素、)1.1 病人准备:阻断剂、血管扩张剂、利尿剂及甾体激素、甘草等影响体内肾素水平,一般要在停药后2周测定肾素活性(PRA),利血平等代谢慢的药物应在停药3周测定。不易停药的病人改服胍乙啶等影响PRA较小的降压药。钠摄入量影响机体PRA水平,故病人测定PRA前3天应适当减少食盐摄入量,最好同时测定取血前24小时尿钠含量,以供分析PRA结果时参考。,1.2 标本采集:肘静脉取血5ml,拔除针头后注入到酶抑制剂抗凝 管中(采血管应有盖塞),将管口封好后颠倒数次,混匀后即 刻放入冰水浴中或4冰箱中12小时,取出后 2500转分 离心5分钟;或混匀后即刻离心(最好在4)分离血浆。将 血浆密封后放入低温冰箱保存(-15以下)。1.3 标本类型、量:专用抗凝管采血分离血浆, 取2ml送检。1.4 标本保存:低温冰箱保存(-15以下),可保存2个月。1.5 注意事项:申请单上应注明抽血时的体位(卧位:病人在早上 68时起床前,取静脉血;立位:病人起床后活动3小时,取 静脉血)和饮食情况(普食饮食,低钠饮食); 标本未及时分离血浆、反复冻融、溶血、保存不当、使用过期 抗凝管等均可使结果受到影响。,2. 醛固酮2.1 病人准备:留样前应停服利尿剂至少3周,停服抗 高血压药物1周。2.2 标本采集:血浆醛固酮测定应采用肝素抗凝,采集 后立即分离血浆,置20保存待测;尿液标本则 留取24小时尿量,用1015ml盐酸防腐。2.3 申请单上注明:抽血时的体位(卧位、立位)和饮 食情况(普食饮食,低钠饮 食);尿液标本要准 确纪录24小时尿量。,3. 儿茶酚胺:3.1 血儿茶酚胺: 病人准备:采血前须停用中药、有色药、香蕉、茶叶及巧 克力3天以上,(最好在临床症状最明显时,如 血压最高时抽血)。 标本采集:用紫红色头盖血常规标本管抽血2ml,颠倒8次 混匀,1小时内分离血浆送检。3.2 尿儿茶酚胺: 病人准备:留尿前应禁用类固醇激素、中药、有色药、激 素、降压药、镇静药等;留尿标本前,停服任 何药物3天以上。 标本采集:收集24h尿液,用510ml浓盐酸防腐,记下总 量,混匀取510ml尿送检。,(二) 糖耐量试验、胰岛素释放试验、C肽释放试验,1. 病人准备:试验前3日,每日进食碳水化合物不低于250300克,且维持正常活动,影响试验的药物(如:咖啡因、口服避孕药、水扬酸盐等)应在3日前停用,试验前病人应1016小时不进食。2. 标本采集:临床上常用方法是清晨抽空腹血后,口服100克葡萄糖,于服糖后0.5、1、2、3小时各抽血2ml(共5次)。3. 标本处理与保存:采血后1小时内分离血清并及时冷藏送检或采用血糖专用抗凝管采血,标本保存:28保存。,(三)毒品检测标本采集及注意事项,1. 标本类型:新鲜随机尿液,不含任何防腐剂及其他杂质。2. 标本量:2ml3. 标本保存条件:标本保存于干净的试管或容器中,于28冷藏保存,有效期为2天,于-20冷冻保存,有效期为1个月。,(四) 皮质醇、促肾上腺皮质激素(ACTH)标本采集及注意事项,正常人皮质醇的分泌存在昼夜节律变化,午夜2224时最高,清晨68时最低。一般为早上8点或下午4点采血,送检时务必在申请单上注明采血时间。皮质醇:用血清2ml,即红色头盖血清管, 抽血34ml。ACTH:用紫红色头盖血常规标本管,抽血 2ml立即颠倒8次混匀。,(五)T细胞亚群标本采集及注意事项。,1. 标本类型:必须采用EDTA抗凝血。2. 标本量:2ml3. 该项目不同年龄段时的参考值不尽相 同,所以送检时请务必在申请单上注明 病人年龄。,三. 病理组织标本采集送检注意事项,1. 前期准备要点:1.1 逐项准确填写病理检查申请单。1.2 容器须洁净,容器瓶口易大。1.3 若同一病人不同标本或同一标本的不同部 位送检,请分别置不同容器。2. 标本采集要点:2.1 取标本时忌用有齿钳夹取或挤压,以免产 生人为细胞变形。2.2 采集标本时需保持其完整,切勿任意切割。,3. 标本固定要点:3.1 宜采用10%福尔马林液,有特殊要求者除外,例如检查组织内糖类及尿酸结晶(需用乙醇固定);固定液的量至少为待检标本体积的45倍以上。3.2 离体标本必须立即全部固定,固定时容器须密闭,避免固定液挥发或溅出。3.3 固定长条形标本时尽量避免弯曲扭转。3.4 固定穿刺获得的小组织应先放在滤纸上,然后固定,以保证组织平直,避免组织遗失。3.5 标本若不能及时送检需及时处理,常温下,标本在10%福尔马林液内可保存数天甚至数周。,4. 条形码粘贴要点:盛放标本的容器外壁必须及时贴上条形码、病人姓名、标本名称等,其信息必须与病理检查申请单上信息相一致。5. 标本核对要点:5.1 病理申请单与标本核对无误后分别装入相应容器送检。5.2 标本应包括全部手术切除部分。5.3 以下情况属不合格标本:主要病灶已被剜出的标本;一块分多处检查的标本;干涸标本;严重自溶或腐败的标本;未及时固定的标本;与申请单不符合的标本。,四. 病理细胞标本采集送检注意事项,1. 前期准备要点:1.1 逐项准确填写细胞学检查申请单。容器及玻片必须清洁。1.2 有传染可能的标本,如结核性胸腹水、肺结核病人的支气管纤维镜灌洗液等,请在申请单上注明,以引起检查者的重视。2. 标本采集要点:2.1 宫颈TCT:避免经期取样;24小时内禁止盆浴、性生活及阴道上药;采集须使用特殊采样器2.2 一般涂片:操作动作要轻巧,避免损伤细胞;涂片厚薄适宜;细胞成分涂在玻片右侧23范围内。,3. 标本固定要点:3.1 固定液易采用95%浓度的乙醇,有特殊要求者除外。3.2 固定方法1:获取标本后,立即固定,固定15分钟后 取出晾干。此法适用于痰液、鼻咽、胃 肠道和肺支 气管等刷片及穿刺细胞学 涂片(除浆膜腔积液及脑脊液外)、宫 颈刮片等。固定方法2:获取标本后,先离心、涂片、晾干、再固 定,固定15分钟后取出晾干。 此法适用于尿液、浆膜腔积液及脑脊液等其他体液标本。,4. 条形码粘贴要点: 固定晾干后的玻片必须及时在左侧13处贴条形码,该条形码必须与细胞学检查申请单上条形码相一致。5. 标本核对要点:5.1 细胞学检查申请单与标本核对无误后分别装入 相应容器送检。5.2 送检的标本必须新鲜,并有足够的数量。5.3 用干净牙签将两玻片分隔,确保涂细胞面向 内,用回形针或皮筋固定后与申请单共同送检。,6. 液基细胞学检测(LPT)标本采集,病人准备:病人在检查前三天停止性生活,检查前停外用 药,避免经期取样,并请洗外阴部。标本采集:使用专用LPT采样器,用窥阴器扩开阴道,先观察宫颈表面,如粘液、血液较多者,应先用棉签轻轻擦净粘液、血液,再用LPT采样器插入子宫颈内,直到只有刷子最下面的刷毛暴露在子宫颈外为止,用手轻轻固定、防刷子滑出;然后,将宫颈刷向同一方向转动35圈,不要太用力或转得过多,以免出血,再将含细胞的毛刷取出放入装有保存液的瓶中固定并保存细胞。送检。注意:送检单填写清楚病人姓名、年龄、月经等各项资料, 贴上条形码后送检。,五. 微生物检测标本采集方法,用于细菌培养的标本收集时应注意无菌操作,特别是原本应是无菌的标本。病人在采集标本做该项目时至少停用抗生素一周以上。1. 下呼吸道分泌物(痰液):嘱患者早上起床后用清水漱口,不要刷牙,深咳出第一口痰,吐在塑料痰盒中,及时送检。2. 尿液(中段尿):在医护人员指导或协助下,以无菌手段采取中段尿约3ml入无菌试管中,立即送检。,3. 粪便:取有黏液、脓血部分粪便置于塑料盒中,如为稀水便,可直接收集于塑料盒中,送检。4. 眼、耳、鼻、咽拭子:将棉拭子沾取少许无菌生理盐水(如沾取的太多,可在无菌生理盐水瓶壁上挤去多余的水分),然后采取可疑部位的分泌物,接种于血平板上,送检。5. 脓液:用沾有生理盐水的棉拭子沾取脓液,要尽量多取一些于灭菌试管中送检。,6. 血液:6.1 凡怀疑菌血症和败血症的患者,无菌条件下采血培养(应尽量在未使用抗菌素前采血,如已使用抗菌素,应尽量选择抗菌素在体内浓度最低时采血,假如病人每天静脉滴注抗菌素时,应该在病人第二天使用抗菌素之前采血培养。如果病人每8小时用药一次,应该在病人第二次用药之前采血,尽量避过抗菌素在体内浓度的高峰期)。6.2 成人每次采血5-10ml,小儿采血2-3ml。6.3 常规消毒病人采血部位,抽一定量血液后,另换一无菌针头,消毒接种瓶口后将血液接种在瓶内,轻轻摇匀。6.4 从抽血到接种入血培养瓶,动作要快,防止血液凝固,及时送检或37过夜后送检。,7. 穿刺液:胸腹水、心包积液、关节腔液、鞘膜积液在无菌操作抽取标本后,及时送检。8. 胆汁:由专科医生以无菌方法取胆汁10ml注入无菌试管中及时送检。9. 脑脊液:以无菌方法取脑脊液,注意分三管,第一管35ml于无菌试管中,用于细菌培养;(第二管 用作脑脊液生化检验;第三管用作脑脊液细胞计数),及时送检。,10. 生殖器官标本,10:阴道、子宫颈及前列腺液等分泌物应由医 师采集,收集于无菌试管内送检。10.1 支原体(解脲、人型)培养+药敏:病人准备:病人在采集标本做该项目时至少停用抗生素一周以上。标本类型:生殖器分泌物。标本采集:支原体对干、热抵抗力差,标本采集后尽快接种于支原体运输培养基中送检。,男性:用无菌男性拭子蘸取灭菌盐水少许深入尿道口内22.5处取分泌物,将拭子按无菌操作洗在支原体运输培养基中送检。前列腺液亦可用棉拭子尽量多的蘸取后洗于支原体运输培养基中。中段尿可直接送检。女性:用蘸取少许无菌生理盐水的棉拭子取宫颈管内口12处单层柱状上皮细胞,取样拭子不可碰到壁,将拭子按无菌手续洗在支原体运输培养基中送检。 标本保存条件:室温可保存8小时;4可保存24小时。,10.2 淋球菌培养+药敏病人准备:病人在采集标本做该项目时至少停用抗生素一周以 上。标本类型:生殖器分泌物。标本采集:男性:男性尿道炎急性期患者可用沾有少许生理盐水的无菌拭子取脓性分泌物。非急性期病人,可用无菌细小棉拭子沾取少许生理盐水轻轻插入尿道2-4深处,转动拭子,然后取出。女性:女性患者先用无菌棉拭子擦去宫颈口分泌物,再用另一沾有生理盐水的棉拭子插入宫颈口内1处旋转,取出分泌物。采标本以后马上把棉拭子插入淋球菌运输培养基中送检。保存条件:培养基常温下不超过24小时送检。,10.3 衣原体抗原检测: 标本类型:生殖器分泌物。 标本采集:男性:男性患者将拭子插入尿道24,停留35秒钟后旋转 一 周取出,将取样后的拭子放入无菌试管中送检。女性:女性患者在取样前先用另外的拭子或棉球将宫颈口外的 沾液抹去,再将取样拭子插入宫颈管内至棉花部分全部 插 入,旋转并停留20秒取出,不要碰到宫颈外及阴道 壁,将取样后的拭子放入无菌试管中送检。标本保存条件:标本采集后室温保存即可,24小时内送检。 支原体、衣原体、淋球菌检测各需单独的拭子,如同时检 测三项,至少需要三根拭子。,10.4 念珠菌培养+药敏:病人准备:病人在采集标本做该项目时,至少停用抗生素一周以上。标本类型:生殖器分泌物。标本采集:怀疑阴道念珠菌感染需要做培养及做药物敏感试验的患者,用蘸有生理盐水的棉拭子蘸取大量豆腐渣样白带或可疑白带倒悬于无菌试管中送检。标本保存条件:标本采集后在28保存,24小时内送检。,六. 空气培养采集方法,1. 采样时间:选择消毒处理后与进行医疗活动之前采样。2. 采样高度:与地面垂直高度80150cm3. 布点方法:室内面积30,设一条对角线上取3点,即中心一点,两端各距墙1m处取一点,室内面积30,设东、南、西、北、中5点,其中东、南、西、北点距墙1m。4. 采样方法:用9直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5分钟后送检培养。在平皿上注明各采自哪个室,用胶布把平皿和平皿盖子固定好以免在送检途中平皿和平皿盖子分离而造成污染。5. 标本保存:采样后必须尽快送检,时间不超过6小时,若样品保存于0-4,送检时间不超过24小时。,七. 遗传学检测标本采集要求,1. 标本采集:外周血标本可使用配送的肝素抗凝管(遗传专用)进行采集血标本,采集后立即将试管轻轻颠倒混匀,以免凝血;脐带血标本、骨髓标本可以在穿刺成功后,打开配送的肝素抗凝管盖,将脐带血或骨髓注入采集管中,采集后立即将试管轻轻颠倒混匀,以免凝血,请注意无菌操作,不要污染管盖。胸腹水标本可在采集后注入废弃生理盐水注射液瓶中,并用75Uml的肝素抗凝。请避免使用注射器采集血标本后直接注入采集管的方式进行标本采集,以免引起溶血;请勿使用EDTA等抗凝管采集标本。,2.标本量:外周血、脐带血、骨髓:4ml;胸腹水100ml。3.标本送检:合格标本须于采血后当天送至遗传实验 室;标本有溶血、凝血现象,也视为不合格标本。 骨髓标本应尽快送至实验室。4.标本保存:标本采集后置于18-25保存,不可冷冻,不可放置于高温环境中。5.申请单填写:请完整填写申请单,尤其是标本采集时间、性别、病史、临床诊断等。,八. 微量元素标本采集要求,1. 血液标本1.1 采血时不能戴乳胶手套(对锌有污染),可使用“PE”(塑料)手套(或不 戴手套把手洗干净)。1.2 橡皮塞对锌有污染,故普通采血管不可使用,建议使 用本中心提供的专用管。(专用管有三种,贴红标签 管为铅、硒专用管,即全血管,内有肝素;贴蓝标签 管为血浆分离管,内有肝素;贴黄标签管为锌铜铁钙 镁专用管,即血浆管。)1
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