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第十八章常见病毒鉴定 本章内容 肝炎病毒 反转录病毒 疱疹病毒 肠道病毒 朊粒及其他病毒 学习目标及重点 学习目标 掌握流感病毒 肝炎病毒 人类免疫缺陷病毒 肠道病毒的主要生物学特点 各病毒的传播途径 临床检验和防治原则区别乙型肝炎病毒常见抗原抗体的组成及其临床意义五种肝炎病毒常用鉴定方法解释流感病毒变异和流行的关系了解朊粒的生物学特征本章重点 流感病毒 肝炎病毒 人类免疫缺陷病毒 肠道病毒的生物学特性和致病性 常见病毒的检验方法 第一节呼吸道病毒 呼吸道病毒一词并非是病毒分类学上的名称 而是指主要以呼吸道为侵入门户 首先在呼吸道粘膜上皮细胞中增殖引起呼吸道以及全身感染 造成呼吸道及其他器官损害的病毒的总称 第一节呼吸道病毒 一 流感病毒流行性感冒病毒 influenzavirus 简称流感病毒 是流感的病原体甲 A 抗原性易发生变异 多次引起世界性大流行乙 B 对人类致病性较低丙 C 只引起人类不明显的或轻微的上呼吸道感染 很少造成流行 一 生物学特性1 形态结构 1 形态 2 结构 核衣壳 第一节呼吸道病毒 2 分型与变异分型 根据NP和MP的不同流感病毒分为甲 A 乙 B 丙 C 三型 甲型流感病毒根据其表面HA和NA抗原性的不同 又分为若干亚型 变异 最主要的是抗原性变异 HA和NA抗原漂移 antigenicdrift 抗原转变 antigenicshift 第一节呼吸道病毒 3 培养特性 在鸡胚羊膜腔和尿囊腔中增殖红细胞吸附试验 hemoadsorptiontest 易感动物为雪貂4 抵抗力 抵抗力较弱不耐热 56 30分钟可灭活病毒室温下很快丧失传染性 第一节呼吸道病毒 二 微生物学检验1 标本 血清 咽漱液2 鉴定 电镜观察ELISA检查患者咽漱液中的抗原用单克隆抗体经免疫酶法PCR技术 核酸杂交等方法检出病毒或进行分型 第一节呼吸道病毒 三 临床意义传染源 患者 隐性感染者 被感染的动物传播途径 飞沫 经呼吸道进入体内致病机理 呼吸道上皮细胞感染增殖 病毒不入血 毒素样物质进入血液症状 上呼吸道症状 发热 头痛 全身酸痛 第一节呼吸道病毒 二 风疹病毒 一 生物学特性1 形态结构 单股正链RNA病毒有包膜 核衣壳为二十面体对称一个血清型人是唯一宿主2 抵抗力 抵抗力较弱不耐热 56 30分钟可灭活病毒对紫外线 乙醚 氯化铯 去氧胆酸等均敏感 第一节呼吸道病毒 二 微生物学检验1 标本 鼻咽分泌物 皮疹液 尿液 脑脊液 血液 骨髓等2 鉴定病毒培养 CPE 免疫学检测红细胞凝集抑制试验中和试验补体结合试验酶或荧光素标记单克隆抗体病毒核酸检测 PCR或核酸杂交技术 第一节呼吸道病毒 三 临床意义儿童是主要易感者 病后可终身免疫呼吸道传播局部淋巴节增殖后经病毒血症散播全身可垂直传播导致胎儿先天性感染 第一节呼吸道病毒 三 其他呼吸道病毒 一 SARS冠状病毒1 生物学特性 1 形态结构不规则球形 核酸为非节段单正链RNA直径60 220nm 有包膜刺突糖蛋白S 小包膜糖蛋白E 膜糖蛋白M 2 变异性 重组率高 容易发生变异 第一节呼吸道病毒 2 微生物学检验 1 标本 鼻咽拭子 咽漱液 粪便等 2 鉴定 电镜技术病毒培养 CPE免疫学检测 IgM IgGRT PCR基因芯片 第一节呼吸道病毒 3 临床意义 1 传播途径 严重急性呼吸综合征 飞沫 接触传播 2 临床表现可垂直传播导致胎儿先天性感染 3 致病和免疫免疫病理损伤是SARS致病的主要机制 4 预防治疗 第一节呼吸道病毒 三 其他呼吸道病毒 二 麻疹病毒1 生物学特性 1 形态结构球形 核心为完整非节段单股负链RNA有包膜 衣壳螺旋对称不容易重组 不容易发生变异 只有一个血清型 2 抵抗力 较弱 对一般消毒剂 紫外线 脂溶剂均敏感 第一节呼吸道病毒 2 微生物学检验 1 标本 鼻咽拭子 鼻咽洗液 痰 血和尿等 双份血清 2 鉴定 电镜观察包涵体病毒培养 免疫学检测 双份血清检测抗体RT PCR 第一节呼吸道病毒 3 临床意义 1 传染源传播途径 患者是唯一的传染源 主要经过飞沫传播 2 临床表现以皮丘疹 发热及呼吸道症状为特征 3 致病和免疫麻疹病后可获得牢固免疫力 极少发生再感染 第一节呼吸道病毒 三 其他呼吸道病毒 三 腮腺炎病毒1 生物学特性 1 形态结构球形 核心为单股负链RNA有包膜 衣壳螺旋对称只有一个血清型 2 抵抗力 较弱 紫外线 脂溶剂均敏感 第一节呼吸道病毒 2 微生物学检验 1 标本 发病早期唾液 脑脊液 双份血清 2 鉴定 病毒分离培养 免疫学检测 双份血清检测抗体RT PCR 第一节呼吸道病毒 3 临床意义 1 传染源传播途径 人是唯一宿主 通过飞沫或唾液污染的食品 玩具进行传播 2 临床表现本病潜伏期约2 3周 病毒侵入呼吸道上皮细胞和局部淋巴结内增殖后 进入血流 然后经血流侵入腮腺及其它腺体器官如睾丸 卵巢 胰腺等 临床表现主要为一侧或双侧腮腺肿大 伴发热 乏力 肌肉疼痛等 青春期感染者易并发睾丸炎或卵巢炎 并发睾丸炎者可导致男性不育症 腮腺炎也是导致儿童期获得性耳聋的常见原因 3 免疫腮腺炎病后一般可获得终身免疫 第一节呼吸道病毒 三 其他呼吸道病毒 第一节呼吸道病毒 三 其他呼吸道病毒 第一节呼吸道病毒 第二节肝炎病毒 肝炎病毒是指引起病毒性肝炎的病原体 人类肝炎病毒有甲型 乙型 丙型 丁型和戊型和庚型病毒之分 第二节肝炎病毒 一 甲型肝炎病毒 一 生物学特性1 形态结构属小RNA病毒科 线性单正链RNA 直径约为27nm 呈球形 二十面体立体对称 无包膜 HAV电镜图 第二节肝炎病毒 2 抵抗力耐受乙醚 氯仿等脂溶剂耐酸 在pH3的酸性环境中稳定不耐热 100 5min可使之灭活在海水 淡水 毛蚶 泥沙中存活数天至数月 第二节肝炎病毒 3 培养特性易感动物 黑猩猩 狨猴 鹰面猴 短尾猴允许性细胞 Vero 恒河猴胚肾细胞 FRHK 4 人肝癌细胞株 PLC PRF S 等在培养细胞中生长缓慢 无CPE 第二节肝炎病毒 二 微生物学检验HAV IgM检测 早期 快速诊断最可靠的血清学指标HAV IgG检测 主要用于了解既往感染史 疫苗免疫 效果评价或流行病学调查分离培养 原代肝细胞或恒河猴胚肾传代株细胞对HAV敏感 生长缓慢 不引起细胞裂解 第二节肝炎病毒 三 临床意义传染源 主要性患者和亚临感染者传播途径 粪 口途径传播 第二节肝炎病毒 二 乙型肝炎病毒 第二节肝炎病毒 二 乙型肝炎病毒 一 生物学特性1 形态与结构 小球形颗粒 直径22nm 管形颗粒 直径22nm 长度在50 700nm之间 大球形颗粒 即Dane颗粒 直径42nm 第二节肝炎病毒 第二节肝炎病毒 即完整的HBV颗粒 也称Dane颗粒 直径约42nm 分为包膜和核心两部分 包膜含HBsAg 糖蛋白和细胞脂肪 核心含核心蛋白 即乙型肝炎核心抗原 HBcAg 环状双股HBV DNA和HBV DNA多聚酶 第二节肝炎病毒 小球形颗粒 直径约22nm 管状颗粒 直径约22nm 长度100 500nm 这两种颗粒均由与病毒包膜相同的脂蛋白 即乙型肝炎表面抗原 HBsAg 组成 不含核酸 一般无传染性 2 基因组从感染HBV病人的血清中及感染肝脏提纯的病毒核心中分离出环状双股DNA 约3200bp HBVDNA负链有四个开放区 分别称为S C P及X 能编码全部已知的HBV蛋白质 S基因能编码主要表面蛋白 C区基因包括前C基因和C基因 分别编码HBeAg和HBcAg P区最长 编码病毒体DNA多聚酶 X区可能编码有154个氨基酸的碱性多肽 第二节肝炎病毒 3 抗原组成 1 表面抗原HBsAg存在于三型颗粒中 是HBV感染的主要标志pres1和preS2抗原的检作为病毒复制的指标抗 preS2抗体阳性常见于急性乙肝的恢复期 表示病毒正在或已经被清除抗 HBs保护性抗体 中和抗体 乙肝痊愈 临床 或免疫成功 接种疫苗 的标志 第二节肝炎病毒 2 核心抗原HBcAg仅存在于Dane颗粒中 刺激机体产生抗HBc IgG IgM 可在感染的肝细胞核心部位的表面存在 表明病毒在复制到血液中即被降解为HBeAg 一般血清学方法检测不到HBcAg 而只能检测到抗 HBc抗 HBc对机体无保护作用抗HBc IgM 是HBV近期感染或慢性感染者病毒活动的标志抗HBc IgG 持续时间长凡有过HBV感染者均可阳性 并可终身伴随 第二节肝炎病毒 3 e抗原HBeAg仅存在于Dane颗粒中 HBeAg是HBcAg的降解产物 游离存在于血液中 为病毒复制及强传染性的指标 产生抗 HBe 是预后良好的征象抗 HBe随着HBeAg的消失而出现抗 HBe的出现标志着病毒复制减少 传染性降低保护作用 第二节肝炎病毒 4 PreS1 PreS2与HBV DNA成正比是病毒复制的指标抗 PreS1 抗 PreS2在恢复期的早期出现阳性提示病毒正在或已经被清除是预后良好的指标 第二节肝炎病毒 第二节肝炎病毒 4 培养特性动物接种 黑猩猩 鸭 第二节肝炎病毒 5 抵抗力具有顽强的抵抗力 它对低温 干燥 紫外线 对