液相色谱串联三重四级杆质谱基础知识.ppt

检测中心培训 一 080114 液相色谱串联三重四级杆质谱基础知识 一液质联用 为什么要液质联用 有很多物质如硝基呋喃类 氨基糖苷类在常规的检测器如紫外 荧光检测器上没有响应的液质联用的实质质谱仪作为液相色谱的检测器 一液质联用 液质联用仪兽药残留中应用最广泛的一种液质联用仪 液相色谱串联三重四级杆质谱 液相色谱 质谱 数据处理系统 一液质联用 液质联用仪的组成 一液质联用 离子源最常用的离子源 电喷雾离子源 ESI 毛细管 四极预杆 干燥气 一液质联用 质量分离器兽药残留最常用的是三重串联四级杆 QqQ Q1 q2 Q3 一液质联用 整个质谱仪的模式图 Q1 q2 Q1 电喷雾离子源 检测器 二质谱基本原理 质谱 称量离子质量的工具 12units 0m e 二质谱基本原理 质谱 称量离子质量的工具 12units 12m e 二质谱基本原理 质谱 称量离子质量的工具 8910111213141516 12units 12m e 二质谱基本原理 质谱 称量离子质量的工具 8910111213141516 12units 14m e 二质谱基本原理 质谱 称量离子质量的工具 12m e 8910111213141516 质荷比 分子的数量 三质谱基本概念 质谱分析法 主要是通过对样品离子质荷比的分析而实现对样品进行定性和定量的一种方法质荷比 指带电粒子的质量与所带电荷之比值 以m e表示 是质谱分析中的一个重要参数 不同m e值的粒子在一定电磁场下 所运行的轨迹是不同的 三质谱基本概念 只有一定质荷比的离子才能通过质量分离器而被检测器所感应 三质谱基本概念 质谱图样品的分子在离子源内电离 产生各种质荷比 m e 的离子 然后通过质量分析器按其质荷比分离 分离后的离子依次被检测器检测并记录下来 形成一个按质荷比大小排列的图谱 三质谱基本概念 质谱图总离子流图 TIC 计算机可以把采集到的每个质谱的所有离子相加得到总离子强度 总离子强度随时间变化的曲线就是总离子色谱图 三质谱基本概念 总离子流图 TIC 总离子流图的横座标是出峰时间 纵座标是峰高 总离子色谱图与一般色谱仪得到的色谱图基本上是一样的 三质谱基本概念 质谱图选择离子流图 SIM 选取其中几个特征离子扫描 对保留时间作图 即得到选择离子色谱图 三质谱基本概念 选择离子流图 SIM SIM通过去除本底和其他无关离子的干扰 降低噪声 提高选择性 分辨率和灵敏度 可使复杂的TIC简化 对特定化合物的分析或化合物的分类十分有用 三质谱基本概念 质谱图 棒状图 对于电喷雾串联三重四级杆质谱 Q1中离子还是完整的 母离子 分子在q2中与Ar碰撞 产生子离子 子离子在Q3中分离 并为计算机所记录 可得到棒状图 三质谱基本概念 棒状图 横坐标是质荷比 m z 纵坐标是离子的相对强度 以基峰为100 经过计算机处理的质谱棒状谱图称为棒图 三质谱基本概念 棒状图 分子离子峰 进入质谱离子源的物质在电离过程中失去一个电子而形成的单电荷离子 它代表该物质的分子量 分子离子峰 碎片离子峰 三质谱基本概念 棒状图 基峰 丰度最高的那个峰离子丰度 检测器检测到的离子信号强度 分子离子峰 碎片离子峰 基峰 四质谱进行定性分析 质谱怎么确证物质的 色谱的保留时间母离子的质荷比子离子的特征 四质谱进行定性分析 欧盟2002 657 EC指令中规定在农药和兽药残留分析中以质谱作为确认方法 必须达到4点的要求 才能满足鉴定LC MS MS 一个母离子为1点 一个子离子为1 5点 那么确认时只需选择1个母离子和2个子离子即可达到4点的要求 二级质谱很容易到达此要求 四质谱进行定量分析 质谱的定量计算用LC MS MS进行定量分析 其基本方法与普通液相色谱法相同 即通过色谱峰面积和标样进行定量 五质谱是如何得到如此丰富的图谱的 质谱的扫描方式 质谱的扫描方式FullScan 全扫描 五质谱是如何得到如此丰富的图谱的 质谱的扫描方式 质谱的扫描方式FullScan 全扫描 残留分析的样品基质较为复杂 用全扫描的话 得到的图可能一个特征的峰都没有 五质谱是如何得到如此丰富的图谱的 质谱的扫描方式 质谱的扫描方式SIM 选择离子监控 五质谱是如何得到如此丰富的图谱的 质谱的扫描方式 质谱的扫描方式SIM 选择离子监控 与全扫描相比 基质的影响大大降低 得到一个m z特定的峰 但这就能定性了吗 五质谱是如何得到如此丰富的图谱的 质谱的扫描方式 质谱的扫描方式MRM 多级反应监测 五质谱是如何得到如此丰富的图谱的 质谱的扫描方式 质谱的扫描方式MRM 多级反应监测 在药残分析中 常用的扫描方式是多反应监测 五质谱是如何得到如此丰富的图谱的 质谱的扫描方式 质谱的扫描方式MRM 多级反应监测 多组分同时分析共流出物的分析母离子 子离子关系明确 定性能力