革兰氏阴性兼性厌氧杆菌2015

江西农业大学动物科学技术学院 邬向东兽医微生物学讲议十一,邬向东预防兽医学教研组二O一五年三月一日,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东第十章 革兰氏阴性兼性厌氧杆菌,包括肠杆菌科、弧菌科、巴氏杆菌科的细菌，是与兽医相关重要的病原菌，其中弧菌以水产动物为主，这里主要介绍家畜家禽相关病原菌。第一节 肠杆菌科第二节 巴氏杆菌科二 曼氏杆菌属三 里氏杆菌属四 放线杆菌属五 嗜血杆菌属,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东第一节 肠杆菌科,据生化反应、血清学试验、DNA同源性等，可将本科分为28个属，至少110个菌种。对属内各菌种或菌型的鉴定，除按生化特性区别外，有时可根据致病性、抗原结构、对某些噬菌体的敏感性等项来决定。对埃希氏菌、沙门氏菌属等各菌株的鉴定，常用血清凝集反应来分型，不一定用菌种名，而称血清型。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东肠杆菌科细菌共同特征,（一）形态和培养G杆菌，菌体两端钝圆，中等大小，约0.53.0m，无芽胞，有周身鞭毛，能运动，部分菌有荚膜，多数有菌毛。需氧或兼性厌氧。普通培养基上生长良好，形成中等大小光滑型菌落。液体培养呈均匀混浊。 （二）生化反应生化反应活泼，不同菌种分解糖、蛋白的能力不同，形成产物不同，以此可作菌种鉴定。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东肠杆菌科细菌共同特征,（三）抵抗力对热抵抗力不强，湿热60C、30min可杀灭；对低温有耐受；对一般消毒剂、抗生素敏感，但易产生耐药株；有些菌耐胆盐和抵抗染料的抑菌作用。 （四）抗原构造肠道杆菌抗原构造较为复杂，主要有O抗原、H抗原、荚膜或K抗原及菌毛抗原等，均可用血清学反应检出。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东肠杆菌科细菌共同特征,（五）致病因子主要有菌毛或菌毛样结构、荚膜或微荚膜、外膜、内毒素、外毒素及载铁体（siderophore）等。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东第一节 肠杆菌科,目录一、埃希氏菌属二、沙门氏菌属三、变形杆菌属四、肠杆菌属,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东一、埃希氏菌属,埃希菌属（Escherichia）包括5个种，血清型众多，多不致病，临床以大肠埃希氏菌最为常见。大肠埃希菌（E. coli）俗称大肠杆菌，大肠杆菌的多少是卫生检验指标之一。部分菌为致病菌，可引起多种幼畜感染。也是最常用分子生物学的实验材料。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（一）形态染色,G短杆菌，有鞭毛，能运动，具有周身鞭毛，无荚膜。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（一）形态染色,右图：光学显微镜下大肠杆菌形态。,右图：电子显微镜下大肠杆菌形态（伪着色）。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（二）培养及生化反应,普通培养基上形成中等大小光滑型菌落；在麦康凯培养基上形成红色菌落；在SS培养基上形成孤立红色菌落；,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东在EMB上形成黑色带金属光泽闪光的菌落,大肠杆菌在伊红美兰培养基上,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东在血平板上有-溶血,大肠杆菌在血液培养基上（有溶血环）,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东生化反应活泼,对葡萄糖、乳糖、麦芽糖等产酸产气靛基质（吲哚）试验阳性、甲基红（M-R）试验阳性、V-P试验阴性、柠檬酸盐利用试验阴性，不产生H2S，尿素酶试验阴性。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（三）抵抗力,在土、水中可生存数月；在含余氯的水中不能生存；胆盐、煌绿等对大肠杆菌有明显的抑菌作用；氯霉素、庆大霉素对其敏感，但易产生耐药性。 （四）抗原构造主要有O、H、K及菌毛抗原：O抗原有173种；K抗原有105种；H抗原有56种。例如：O157:K15:H16 。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（五）致病性,不同血清型的大肠杆菌常使不同各类动物发病，也有好几种血清型能对多种动物致病。引起人、畜肠道感染的大肠杆菌可分成：肠产毒性大肠杆菌（ETEC）肠致病性大肠杆菌（EPEC）肠侵袭性大肠杆菌（EIEC）肠出血性大肠杆菌（EHEC）肠粘附性大肠杆菌（EAEC）。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东1、肠产毒性大肠杆菌(Enterotoxigenic E.coli，ETEC),(1) 产生外毒素肠毒素。包括不耐热肠毒素(LT)和耐热肠毒素(ST)。(2) 粘着素抗原：主要有F4(K88)、F5(K99)、F6(987P)、F41等四种粘着素抗原，可增强细菌的致病。如仔猪黄痢。(3) 外毒素：神经毒素(neurotoxin)：可致肠毒血症，引起水肿与神经症状。如仔猪水肿病。ETEC型菌株均可能对仔猪、犊、驹和羔羊致病。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东大肠杆菌患病情况,仔猪黄白痢,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东大肠杆菌患病情况,仔猪黄白痢,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东大肠杆菌病畜情况,仔猪水肿病,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（五）致病性,2、肠致病性大肠杆菌（enteropathogenic E. coli. ，EPEC）：为发展中国家婴儿腹泻的重要病原。3、肠侵袭性大肠杆菌（enteroinvasive E. coli. , EIEC）：粘膜和溃疡。亦可引起豚鼠角膜结膜炎(Sereny test )。4、肠出血性大肠杆菌（enterohemorrhagic E. coli. ， EHEC）：出血性结肠炎。5、肠凝聚性大肠杆菌（enteroaggregative E. coli. , EAggEC）：儿童持续性腹泻的病因之一。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东畜禽致病大肠杆菌的分离与鉴定程序,（六）微生物学检查法,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（七）免疫,1、自家菌苗免疫；（仔猪E.coli.苗可用在母猪产仔前1月、半月分别免疫两次，据说免疫效果较好。）2、ST、LT及F4（K88）、F5(K99)、F6(987P)、F41共同制备菌苗免疫；3、基因工种菌免疫。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东二、沙门氏菌属,Salmonella的细菌种类繁多，迄今为止已经发现了2500个以上的血清型。它们主要寄生于人类及各种温血动物肠道，可引起各种性质的疾病。这些由沙门菌引起的疾病统称为沙门菌病(salmonellosis)。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东二、沙门氏菌属,（一）形态染色、培养和生化反应染色：G杆菌，除鸡伤寒与鸡白痢沙门氏菌外，其余都有周鞭毛和菌毛。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东沙门氏菌的革兰色染色鞭毛染色,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东沙门氏菌在不同培养基上生长性状,沙门氏菌在麦康凯培养基上生长性状。沙门氏菌在HEK培养基上形成黑色菌落,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（一）形态染色、培养和生化反应,培养：营养要求不高，（有鸡白痢沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌、猪伤寒沙门氏菌、羊流产和甲型副伤寒沙门氏菌等菌型在普通培养基上生长贫瘠，形成细小的菌落）在普通培养基上形成中等大小、半透明菌落，不分解乳糖，在肠道杆菌鉴别培养基上形成不着色菌落。沙门氏菌属各菌的生化反应较有规律性，对细菌有重要价值。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（一）形态染色、培养和生化反应,大肠杆菌与沙门氏菌的生化反应对照,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（二）抗原构造及分类,分类比较复杂，有O、H、Vi及菌毛等重要抗原。O、H是用于分型的基本抗原。1、O抗原：为细菌菌体抗原，即脂多糖；O抗原有许多组成成分，分别以1、2、3、4等数字表示。每种细菌常带有数种O抗原；不同种的细菌可有共同的O抗原。将具有共同抗原的沙门氏菌归为一组，用A、B、C、D表示，继Z之后，则用阿拉伯数字O51-O67表示。对温血动物致病的血清型大多数都在A-E组。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（二）抗原构造及分类,2、H抗原为鞭毛蛋白，性质不稳定，湿热60C、15min酒精处理即被破坏。沙门氏菌H抗原有两种，称第一相和第二相。前者为特异相，用a、b、cz以后用z1、z2、z3表示；后者为非特异相，用1、2、3、表示。具有两种相抗原的细菌叫双相菌、仅有某一相者称为单相菌。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（二）抗原构造及分类,3、Vi抗原成分为不耐热的聚N-乙酰D半乳糖胺醛酸。有抗吞噬作用，并保护菌体不受抗体和补体作用。初次分离的伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌有Vi抗原。具有Vi抗原的细菌可用Vi噬菌体分型。目前伤寒沙门氏菌的Vi噬菌体型已超过100个。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（三）抵抗力,在水中能存活2-3周，粪便中可活1-2个月，在冰冻土壤中可过冬。对热耐力差，湿热65C经15-20min即被杀死。5石炭酸或1:500升汞中5分钟杀死。胆盐、煌绿及其它染料对沙门氏菌的抑制作用较其它肠道菌小，故可用此染料制选择培养基分离培养。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（四）变异,1、HO变异；2、SR变异；3、VW变异；（带有ViAg为V菌株；丢失ViAg的为W菌株。）4、位相变异。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（五）致病性,本属杆菌均有致病性，它们通常侵害幼年动物，发生急性败血症、胃肠炎以及其它局部炎症。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东雏鸡白痢,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（五）致病性,据其对寄主的嗜好不同，可分两种不同类型：1、对寄主有专嗜性它们只对某一种类的寄主产生一定的疾病。（很少）2、具有广泛寄主范围的能在类以及多种畜禽中致病。（占大多数）,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（六）微生物学诊断,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东三、变形杆菌属(Proteus),其代表菌种为普通变形杆菌（P. vulgaris）奇异变形杆菌（P. mirabills）。为广泛分布于自然界的腐生菌，偶尔可致病。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（一）生物学性状,G杆菌，呈卵圆形或长丝状等多形性。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（一）生物学性状,不形成荚膜、有鞭毛，运动活泼，有菌毛。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（一）生物学性状,在湿润的固体培养基上呈扩散生长，于琼脂表面形成一层波纹状薄膜，称迁徙生长现象(Swarming growth)。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（一）生物学性状,本菌常为污染菌，以3-4琼脂培养可获得孤立菌落。本菌能分解葡萄糖，不发酵乳糖。能迅速分解尿素在鉴别是有参考价值。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（二）致病性,偶尔致牛、绵羊、山羊、犬等的幼畜腹泻，间或致成年家畜腹泻或犬的外耳炎，偶尔致人的下痢或食物中毒，在人的泌尿系统或伤口中可成为继发感染菌。在自然界中，对有机物分解有重要作用，在实验室常以污染菌出现。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东四、肠杆菌属（Enterobacter）,肠杆菌即产气杆菌。多分布于土壤和污水中。本属有两个主要种：阴沟肠杆菌(Ent. cloaca)和产气肠杆菌(Ent. aerogenes)，两者均不致病，偶尔出现于脓液或病灶组织中。本属菌为G杆菌，可利用柠檬酸盐为唯一碳源，37C可分解葡萄糖产酸产气，44.5C分解葡萄糖产酸不产气。不利用卫矛醇，VP试验阳性、M-R试验阴性，可缓慢液化明胶，不产生H2S、无鞭毛，无运动性。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东第二节 巴氏杆菌科,Pasteurella是以法国微生物学家巴斯德的姓所命名的一类杆菌，它是引起多种动物和人类疾病的病原菌。本属菌在分类学上属巴氏杆菌科，巴氏杆菌属与嗜血杆菌属、放线菌属一起作为巴氏杆菌科的成员，现新建立了曼氏杆菌属、里氏杆菌属等等。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东一、巴氏杆菌属（Pasteurella）,菌属的共同特征：卵圆形或短杆状的G菌；病料中呈两极染色；不运动，不产生芽胞；需氧或兼性厌氧；分解糖产酸不产气；不凝固牛乳；不液化明胶；氧化酶阳性。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东多杀性巴氏杆菌（P. multocida ),本属细菌已有20多种，其中以多杀性巴氏杆菌最为重要，是多种畜禽的致病菌。多杀性巴氏杆菌是引起多种畜禽巴氏杆菌病的病原。1994年第九版伯吉氏细菌鉴定手册列有3个亚种，即多杀亚种（P. multocida subspl. multicida）、败血亚种（P. multocida subspl. septica）及杀禽亚种（P. multocida subspl. gallicida）。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东多杀性巴氏杆菌（P. multocida ),本菌为主要可致动物的出血性败血症和传染性肺炎。是牛、羊、马、兔的出败，猪肺疫、禽霍乱等疾病的病原。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（一）形态染色,球杆状或短杆状，小杆菌。单在或双排列。病料涂片呈两极着色。新分离的强毒株有荚膜。G。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（二）培养及生化,需氧或兼性厌氧。营养要求严格。在血液培养琼脂上形成无溶血环，湿润、水滴样小菌落。血清肉汤：呈轻度浑浊，培养延长到46天，则变清，沉淀物粘稠沉于底部，表面有菌环。在血清平板上培养24小时，形成淡灰白、边缘整齐、表面光滑、闪光的露珠状菌落。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（二）培养及生化,生化反应：可分解葡萄糖、果糖、蔗糖、甘露醇、单奶糖等；一般不利用乳糖、鼠李糖、杨苷、山梨醇、肌醇、菊糖、侧金盏花醇等；Fo型分解伯胶糖不分解木胶糖；Fg型分解木胶糖而不分解伯胶糖。吲哚试验阳性，过氧化氢酶阳性，M-R试验阴性，V-P试验阴性、不产生H2S，不利用明胶。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（三）血清型,Carter根据K抗原将其分为A、B、D、E 6群；波冈、村田则根据O抗原将其分为16个型。将K、O二种抗原相结合，共组成22种血清型。我国分离的禽多杀性巴氏杆菌以5：A为多，其次为8：A；猪的以5：A和6：B为主，8：A和2：D其次；羊的以6：B为多；家兔以7：A为主，其次是5：A。C型为犬、猫的正常栖居菌，F型主要发现于火鸡，致病作用不明。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（四）抵抗力,抵抗力不强：干燥空气中，2-3天死亡；60C 20min，75C 5-10min可被杀死。在血液内保持毒力610天；冷水中能保持活力达2周，厩肥中可生存一个月。本菌易自溶：在无菌蒸馏水中或生理盐水中迅速死亡。对消毒剂敏感：3石炭酸，千倍升汞1min可杀灭，2来苏儿、福尔马林等几分钟就可杀灭。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（五）致病性,鸡、鸭、鹅禽霍乱；猪猪肺疫；牛、兔、羊、马等出败。实验动物中，以鸽对禽源巴氏杆菌最易感染，小鼠、家兔也易感。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东禽霍乱,鸡冠和肉髯变青紫色，有的病鸡肉髯肿胀，有热痛感。胃肠出血。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（六）微生物学诊断,1、镜 检：采集标本（渗出液、心血、肝、脾、淋巴结、骨髓等）涂片、染色（瑞氏染色或美兰染色）、镜检 两极着色小杆菌。2、分离培养：血平板接种、溶血情况、菌落形态、生化鉴定3、动物试验：实验动物（小鼠、鸽、兔等）接种，2448小时后，死亡、剖检、重新做镜检和细菌分离以鉴定细菌。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（七）免疫和治疗,1、免疫：弱毒活菌苗、氢氧化铝死菌苗、高免血清等。2、治疗：抗生素。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东二、曼氏杆菌属（Mannheimia）,1999年Angen等根据DNA杂交及16S rRNA序列的实验结果，建议建立这个新属，至少有7个种，其中5种已经定名，代表菌种为溶血性曼氏杆菌（M. haemolytica）。 溶血性曼氏杆菌(M. haemolytica)危害：牛羊肺炎，新生羔羊败血症。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东溶血性曼氏杆菌(M. haemolytica),生物学特征：G短杆菌，有呈多形性，无运动性，两极着色，荚膜有时看不到。营养要求同多杀性巴氏杆菌。固体培养上，呈圆形、光滑、湿润、带荧光。血平板上溶血明显，多次传代后溶血性可消失。在羔羊血琼脂上可生成双溶血环（内、外），在麦康凯平板上，生长缓慢，长成红色菌落。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东溶血性曼氏杆菌(M. haemolytica),本菌可分解葡萄糖、麦芽糖、肌醇、棉子糖、淀粉和乳糖产酸不产气；不分解侧金盏花醇、赤藓醇和菊糖；对卫矛醇、甘油、鼠李糖发酵不定。本菌吲哚试验、尿素利用试验、明胶试验均为阴性；紫乳变酸且凝固。本菌按其生化反应和致病性可分为A和T两个生物型（Biotypes），又按其荚膜抗原用间接血凝反应可区分为12个血清型(serotypes)。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东三、里氏杆菌属（Riemerella）,鸭疫里氏杆菌是本属的代表种，原名鸭疫巴氏杆菌。1991年Rossau等和Segers等先后证实，该菌与巴氏杆菌的rRNA不同源，建议并得到认可，建立了里氏杆菌新属，具体归属哪科还未定。鸭疫里氏杆菌（R. anatipestifer）鸭疫里氏杆菌是雏鸭传染性浆膜炎的病原，可引起18周龄、尤其是23周龄雏鸭大批发病死亡，生长发育受阻等。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东1、形态及染色,菌体呈杆状或椭圆形，大小0.30.5um0.76.5 um，偶见长丝状，长1124um。多为单个，少数成双或短链状排列。可形成荚膜，无芽胞，无鞭毛。瑞氏染色可见两极着色。革兰氏染色阴性。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东2、培养及生化特性-培养,本菌营养要求较高，普通培养基和麦康凯培养基上不生长。初次分离培养需要5%10%的CO2。在巧克力或胰蛋白胨大豆蛋胨琼脂（TSA）平板上，CO2培养箱或蜡烛缸中，37培养2448h，生长的菌落无色素，呈圆形、微突起、表面光滑、奶油样，直径12mm。在含血清或胰蛋白胨酵母的肉汤中，3748h培养，呈上下一致轻微浑浊，管底有少量沉淀。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东2、培养及生化特性-生化特征,本菌不发酵葡萄糖、蔗糖，可与多杀性巴氏杆菌区别。也不发酵半乳糖、乳糖、果糖、木糖、蕈糖、甘露醇、山梨醇、甘露糖和棉实糖。极少数菌株发酵麦牙糖或肌醇。靛基质、硝酸盐还原、柠檬酸盐利用、V-P试验、M-R试验、硫化氢产生、尿素分解等均为阴性。氧化酶、触酶试验为阳性。多不溶血，多液化明胶，G+C多为35mol%。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东3、血清型,目前比较复杂，1991年Sandhu等其统一并为19个型，以阿拉伯数字定名，1995年泰国发现20、21型。我国以1型为主。 4、抵抗力本菌抵抗力不强。鲜血培养基上置4冰箱保存容易死亡，通常45d要传代一次。对多种抗生素敏感，但易产生耐药性。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东5、致病性与免疫性,本菌可引起鸭传染性浆膜炎，鸡、鹅、火鸡及野生水禽也可发生。兔和小鼠不易感。本菌具有较好的免疫原性，可制备灭活菌苗免疫，效果尚可。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东6、微生物学诊断,取发病初期病鸭脑及心血，用巧克力培养基容易分离到本菌。肝、脾分离率低。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东四、放线杆菌属(Actinobacillus),对家畜有致病性的有：猪胸膜肺炎放线杆菌（A. pleuropneumoniae, APP）。林氏放线杆菌（A. ligniersii）；驹放线杆菌(A. equuli)；,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（一）猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（APP）,本菌原为猪胸膜肺炎嗜血杆菌(Haemophilus pleuropneumoniae)或副溶血嗜血杆菌(H. Parahaemolyticus)，但经DNA杂交试验表明，本菌与林氏放线菌有很高的同源性，因此在1983年起改为现名。本菌可引起猪传染性胸膜肺炎，是集约猪场常见的传染病之一。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（一）猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,1、形态染色小球杆菌，具多形态，新鲜病料呈两极染色，有荚膜和鞭毛，具运动性。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（一）猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,2、培养兼性厌氧，置10%CO2中可长出黏液型菌落。生长温度：37。普通培养基上不长，需添加V因子，常用巧克力培养基培养。在绵羊血平板上，可产生稳定的溶血，金黄色葡萄球菌可增强其溶血圈（CAMP试验+）,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（一）猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,3、抗原性根据其荚膜多糖及LPS的抗原性差异，将本菌分为15个血清型，其中1型和5型又分1a、1b及5a、5b两亚型。根据对NAD I的依赖性，又可分为：生物I型：依赖NDA I，包括112、15血清型；生物II型：不依赖NDA II，包括13、14血清型。毒力：1、5、9、11型最强，3、6型毒力较低。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（一）猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,4、致病性与免疫性猪是本菌高度专一的宿主，寄生在猪肺坏死灶内或扁桃体，较少在鼻腔。慢性感染猪或康复猪为带菌者。小于6月龄仔猪最易感。毒素是本菌最重要的毒力因子，不同血清型的菌株可产生细胞毒素：Apx，是一种穿孔素，有Apx I、ApxII、Apx III和Apx IV四种。Apx IV存在于所有血清型中。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（一）猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,人工感染APP在19h死亡口中流出血样渗出物。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（一）猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,肺充血水肿，有纤维素性渗出物,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（一）猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,整个肺表面纤维素性渗出物与胸膜中隔膜发生粘连,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（一）猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,5、微生物学诊断取病死猪肺坏死组织、胸水、鼻及气管渗出物做涂片，显微镜检查两极着色球杆菌。确诊：取上述病料接种巧克力培养基或绵羊血琼脂，置5%CO2 37培养过夜。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（一）猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,如有可疑菌落，进一步做CAMP试验，检查其脲酶活性及甘露醇发醇能力。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（二）林氏放线杆菌（A. ligniersii）,为牛木舌病的病原体，此菌还可侵害猪、羊，引起头颈部软组织脓疡。1、形态与染色杆菌，G，多形性：在血清、血琼脂上呈球杆状，大小为1.50.4um；在含葡萄糖、麦芽糖琼脂上呈长杆菌；在肉汤中呈链状、菌丝状。无运动性，无芽胞，无荚膜。石炭酸复红染色最好，有两极着染倾向。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东（二）林氏放线杆菌,2、培养及生化特性需氧或兼性厌氧；在病料中，呈硫磺样小颗粒状。将含小颗粒脓液研碎，接种于血清琼脂，24小时培养后可见细小、圆形、蓝灰色、半透明、粘稠、直径约1.5mm的菌落。延长培养时间，直径可扩大到4mm。多次传代后，粘稠性可消失。在肉汤中呈均匀浑浊生长。,江西农业大学动物科学技术学院 邬向东