实验一微量移液器的使用与校准

实验一实验一 微量移液器的使用与校准微量移液器的使用与校准 一 实验目的 1 了解吸液管的操作原理和熟练掌握吸液管的操作方法 2 了解吸液管的校准方法和保证实验的精确度 二 实验原理 依靠活塞的上下移动 其活塞移动的距离是由调节轮控制螺杆 机构来实现 推动按钮带动推杆使活塞上下移动 排出腔内气 体 松手后 在复原弹簧的作用下恢复其原位 完成一次吸液 过程 三 实验材料 仪器 吸液管 尖端管 电子天平 防水膜 试剂 蒸馏水 四 实验步骤 一 准备工作 选择吸液管 反复练习 将防水膜放到电子天平中 并将天平调零 二 实验步骤 1 转动微量移液器的调节轮 使读数显示为所要取液体的 体积 2 把白套筒顶端插入吸头 在轻轻用力下压的同时 把手 中的移液器按逆时针方向旋转一下 3 轻轻按下推动按钮 推到第一档 4 将吸液尖垂直浸入蒸馏水中 浸入深度为 2 4mm 5 缓慢松开推动按钮 6 将微量移液器垂直放在天平上 按动推动按钮到第一档 液体泄出 在继续按动至第二档 是液体完全排出 放 松按钮 使推动按钮复原 7 观察电子天平 记录数值 8 每次用天平读取数值后要归零 9 每次完成测取数值后 要把防水膜取出 放到收容器中 10 按下吸液管活塞下侧的按钮 将尖端管退到垃圾桶中 五 实验结果 123平均误差值 六 讨论及注意事项 一 误差分析 1 吸液过程中 使移液器倾斜 导致移液不准确 2 在实验过程中 没有换吸头 3 一直使用一个移液器头 使吸头中有溶液的残留液 出 现误差 4 由于过快的放开按钮 是溶液吸入过快 过多 出现误 差 5 温度的关系 导致误差 二 注意事项 1 设定移液体积 从大量程调节至小量程为正常的调节 方法 逆时针旋转刻度即可从小量程调节至大量程时 应先调节至超过设定体积刻度 在调回至设定的体积 2 装配移液枪头 将移液枪垂直插入吸头 左右旋转半 圈即可 3 移液枪不应平放 4 每次试验后将刻度调制最大 5 移液枪所设量程不要超过规定量程 6 不能吸取强挥发性 强腐蚀性的液体 实验二实验二 用用 PH 计测定缓冲溶液的计测定缓冲溶液的 PH 值值 一 实验目的 1 了解电位法测定溶液 PH 的原理 2 学会使用 PH 计测定溶液 PH 值的方法 二 实验仪器和药品 仪器 数显 PH 计 小烧杯 吸量管 复合电极 温度计 药品 0 10mol LHAc 0 10mol LNaAc ph 4 标准缓冲溶液 ph 6 86 标准缓冲溶液 配制 PH 为 2 4 6 5 7 4PBS 溶液 三 酸度计的使用方法 1 打开电源开关 把测量选择开关拨向 PH 档 2 一次定位把电极用蒸馏水清洗 滤纸吸干 插入 PH 6 86 的 缓冲溶液中 然后调节定位调节器 使仪器指示的值与溶液 PH 值 相同 3 二次定位把电极用蒸馏水清洗 滤纸吸干 插入 PH 4 的缓 冲溶液中 然后调节斜率调节器 使仪器指示的值与溶液 PH 值相 同 4 取出电极 电极用蒸馏水清洗 滤纸吸干 将电极插入到待 测溶液中 待示数稳定后 记下 PH 值 四 实验方法和实验后处理 1 缓冲溶液的制备 母液的配制 0 2MNa2HPO4 称取 71 6g Na2HPO4 12H2O 溶于 1000ml 水 0 2MNaH2PO4 称取 31 2g NaH2PO4 2H2O 溶于 1000ml 水 各种溶度 PB 的配制 先配 0 2M PB PH 7 4 100ml 取 19ml 0 2mol L 的 NaH2PO4 81ml 0 2mol L 的 Na2HPO4 0 1M PB 取 500ml 0 2M PB 加水稀释至 1000ml 0 01M PB 取 500ml 0 2M PB 加水稀释至 1000ml 0 02M PB 取 500ml 0 2M PB 加水稀释至 1000ml D 组 配制 PH 7 4 0 2M NaH2PO4 19ml 0 2M Na2HPO4 81ml 四 实验结果 温度 27 3 烧杯编号 1 理论 PH 值7 4 PH 实测值7 72 五 PH 值的测定 1 将电极浸入待测烧杯中 轻轻摇匀 2 测量待测缓冲溶液的温度 3 记录电表的示数 4 测定后将读数开关放开 洗净电极 5 实验后处理 将范围选择器拨向零 关闭电源开关 蒸馏水洗净电极 取下复合电极 戴上橡皮帽 放回盒中 洗净容器 将桌面擦净 实验三纳米粒子对地塞米松的吸附动力学实验实验三纳米粒子对地塞米松的吸附动力学实验 一 实验目的 1 掌握紫外分光光度法测定地塞米松含量的基本原理和方法 2 掌握确证分析方法的效能指标内容和要求 3 熟悉建立分析方法的基本思路 二 实验原理 紫外 可见光谱是用紫外 可见光测获的物质电子光谱 它研究产生 于价电子在电子能级间的跃迁 研究物质在紫外 可见光区的分子吸 收光谱 当不同波长的单色光通过被分析的物质时能测得不同波长 下的吸收度或透光率 紫外吸收光谱的定性分析为化合物的定性分析提供了信息依据 动力学研究是整个吸附研究体系的重要组成部分 通过对吸附动力 学的研究 可以对以后的研究起到一定指导作用 并能够在动力学 层面上反映体系对的吸附行为 需要同学们在本次实验采取不同初 始浓度的地塞米松溶液 进行吸附动力学实验 从中寻求结果 三 实验器材和仪器 精密电子天平 超声清洗机 紫外分光光度计 离心机 10mL 和 2mL 容量瓶 烧杯 搅拌子 离心管 离心管盒 离心管架子 小型表面皿 实验室抹布 塑料洗瓶 烧杯刷 清洁剂 插线板 玻璃移液管 吸耳球 封口膜 剪刀 PE 手套 塑料吸管 小号称 量纸 ICM 石英吸收池 擦镜纸 标签纸 钥匙 移液器吸头 小 号滤纸 卷纸 移液管架 吹风机 PH 标定缓冲液各 5 包 氯化钙 磷酸钠 磷酸氢二钠 磷酸二氢钠 氢氧化钠 盐酸 甲醇各一瓶 乙醇 2 箱 地塞米松 5 克 多种纳米粒子 D 组 透明质酸硅酸钙 四 实验步骤 1 吸附动力学实验 1 分别配置 100mL 浓度为 10mM 的磷酸钠溶液 A 和 10mM 的 CaCl2 溶液 B 0 1M 盐酸溶液 0 1MNaOH 溶液 2 称取 200mg 纳米粒子于 10mL 离心管中 加入 5mL 溶液 A 超声分散 常温震荡 2h 离心 用去离子水清洗颗粒三次 37 度干燥 得到磷酸化的纳米粒子 3 同上 将溶液 A 换为溶液 B 4 用乙醇配置质量浓度为 100mg L 的地塞米松溶液 1L 采用对 半稀释后得到质量标准样品溶液 5 分别配置 100 50 25mg L 的地塞米松溶液 a b c 量取 20mg 纳米粒子至于烧杯中 分别加入 100mL 溶液 abc 分散均 匀 6 在指定时间点分别取出 2mL 上清液 离心 通过紫外分光光 度计测量上清液浓度 计算吸附量 并做图 7 剩余的纳米粒子 140mg 加入浓度为 100mg L 的地塞米松乙醇 溶液 280mL 封好 搅拌吸附过夜后离心 通过紫外分光光度计 测量上清液浓度 计算载药量 37 度干燥 得到的粒子用于体外 释放实验 2 体外释放实验 1 使用 pH7 4 的 PBS 溶液配制质量浓度为 100mg L 的地塞米松 溶液 25mL 采用对半稀释后得到标准样品溶液 2 配制 pH 为 5 7 6 5 和 7 4 8 0 的 0 01MPBS 溶液 取 5mg 已吸附地塞米松的纳米粒子于离心管中 分别加入 pH 不同的释 放介质 50mL 在指定时间取出释放液 5mL 并加入相同量的新 鲜释放介质 紫外检测取出的释放液中地塞米松浓度 五 数据处理 编号时间稀释后的值吸光度值 000 A 5 c50 5981 196 A 10 c100 5011 002 A 15 c150 4190 838 A 20 c200 4460 892 A 40 c400 4490 898 A 60 c600 5171 034 A 5 b50 9191 838 A 10 b100 9231 846 A 15 b150 9951 99 A 20 b200 881 76 A 40 b400 8571 714 A 60 b601 0132 026 A 5 a50 6562 624 A 10 a100 6472 588 A 15 a150 8613 444 A 20 a200 883 52 A 40 a400 7282 912 A 60 a600 8743 496 A的吸附动力学实验 0 0 5 1 1 5 2 2 5 3 3 5 4 051015204060 T min 吸光度值 100mg L 50mg L 25mg L 编号时间稀释后的值吸光度值 000 B 5 c50 4260 852 B 10 c100 4720 944 B 15 c150 40 8 B 20 c200 4290 858 B 40 c400 4690 938 B 60 c600 4720 944 B 5 b50 951 9 B 10 b100 9381 876 B 15 b151 0182 036 B 20 b200 831 66 B 40 b401 0042 008 B 60 b601 0182 036 B 5 a50 9233 692 B 10 a100 7873 148 B 15 a150 9543 816 B 20 a2014 B 40 a401 0024 008 B 60 a601 0514 204 B的吸附动力学曲线 0 1 2 3 4 5 051015204060 T min 吸光度值 100mg L 50mg L 25mg L 体外释放实验 APH值时间吸光度值 6 060 50 003 20 006 40 002 60 051 6 80 50 01 20 014 40 014 60 03 7 40 50 059 20 043 40 023 60 06 8 20 50 102 20 086 40 058 60 549 A的体外释放实验 0 0 1 0 2 0 3 0 4 0 5 0 6 0 5246 时间 吸光度值 PH 6 06 PH 6 8 PH 7 4 PH 8 2 BP