胰岛素所致低血糖休克及药物和激素对血糖的影响

胰岛素所致低血糖休克及药物和激素对血糖的影响胰岛素所致低血糖休克及药物和激素对血糖的影响 实验贡献率 王雪实验贡献率 王雪 25 成爱玲 成爱玲 25 李永瑶 李永瑶 25 秦春霞 秦春霞 25 一一 实验名称 实验名称 胰岛素所致的低血糖休克及药物和激素对血糖的影响胰岛素所致的低血糖休克及药物和激素对血糖的影响 二二 实验目的 实验目的 学习监测血糖的方法 同时观察胰岛素及药物和激素对血糖的影响 从学习监测血糖的方法 同时观察胰岛素及药物和激素对血糖的影响 从 而加深理解药物和激素影响血糖水平的机制 而加深理解药物和激素影响血糖水平的机制 三三 实验原理 实验原理 1 胰岛素 胰岛素 1 促进葡萄糖转运 葡萄糖经细胞膜异化扩散进入细胞内需细胞膜上 促进葡萄糖转运 葡萄糖经细胞膜异化扩散进入细胞内需细胞膜上 的葡萄糖运载体 的葡萄糖运载体 GLUT4 蛋白 胰岛素可使 蛋白 胰岛素可使 GLUT4 从细胞内转位到细从细胞内转位到细 胞膜上 加速葡萄糖向细胞内转运 胞膜上 加速葡萄糖向细胞内转运 2 调节糖代谢 可加速葡萄糖酵解和氧化 促进糖原合成并抑制糖原 调节糖代谢 可加速葡萄糖酵解和氧化 促进糖原合成并抑制糖原 分解和糖异生 从而促进糖的利用而减少糖的生成 分解和糖异生 从而促进糖的利用而减少糖的生成 3 抑制脂肪和蛋白质分解代谢而促进其合成代谢 可抑制脂肪酶的活 抑制脂肪和蛋白质分解代谢而促进其合成代谢 可抑制脂肪酶的活 性 促进脂肪合成并抑制其分解 减少游离脂肪酸和酮体的生成 减轻脂性 促进脂肪合成并抑制其分解 减少游离脂肪酸和酮体的生成 减轻脂 肪酸对葡萄糖氧化的抑制 可促进氨基酸进入细胞并促进蛋白质合成 从肪酸对葡萄糖氧化的抑制 可促进氨基酸进入细胞并促进蛋白质合成 从 而减少糖异生的原料 使糖异生减少 而减少糖异生的原料 使糖异生减少 2 肾上腺素 肾上腺素 肾上腺素有升高血糖的作用 激动肾上腺素有升高血糖的作用 激动 2 受体 抑制胰岛素分泌 激动受体 抑制胰岛素分泌 激动 2 受体 促进胰高血糖素分泌 受体 促进胰高血糖素分泌 3 甲状腺激素 甲状腺激素 2 TH 能加速肠粘膜吸收葡萄糖 增加外周组织利用糖以及糖原合成与分能加速肠粘膜吸收葡萄糖 增加外周组织利用糖以及糖原合成与分 解 提高糖代谢速率 解 提高糖代谢速率 TH 还能增强肝糖异生 也能增强肾上腺素 胰高还能增强肝糖异生 也能增强肾上腺素 胰高 血糖素 皮质醇和生长激素的生糖作用 血糖素 皮质醇和生长激素的生糖作用 TH 水平升高能对抗胰岛素 使水平升高能对抗胰岛素 使 血糖升高 血糖升高 4 胰高血糖素 胰高血糖素 胰高血糖素与肝细胞膜上的相应受体结合后 激活肝细胞内的磷酸化酶 胰高血糖素与肝细胞膜上的相应受体结合后 激活肝细胞内的磷酸化酶 脂肪酶和与糖异生有关的酶系 加速糖原分解 脂肪分解和糖异生 脂肪酶和与糖异生有关的酶系 加速糖原分解 脂肪分解和糖异生 5 糖皮质激素 糖皮质激素 促进糖原异生 能增加肝及肌肉组织中蛋白质分解产生的氨基酸及其中促进糖原异生 能增加肝及肌肉组织中蛋白质分解产生的氨基酸及其中 间代谢产物合成糖原 减慢葡萄糖分解为间代谢产物合成糖原 减慢葡萄糖分解为 CO2 的氧化过程 从而有利于中的氧化过程 从而有利于中 间代谢产物在外周组织再合成葡萄糖 增加血糖来源 减少机体细胞摄取间代谢产物在外周组织再合成葡萄糖 增加血糖来源 减少机体细胞摄取 葡萄糖 葡萄糖 6 生长激素 生长激素 生理剂量的生长激素能促进胰岛素的分泌 具有降低血糖的作用 而过生理剂量的生长激素能促进胰岛素的分泌 具有降低血糖的作用 而过 量的生长激素则抑制糖的利用 具有升高血糖的作用 量的生长激素则抑制糖的利用 具有升高血糖的作用 四四 实验对象 实验对象 小鼠小鼠 五五 药品与器材药品与器材 生理盐水 胰岛素针剂 生理盐水 胰岛素针剂 20 葡萄糖溶液 葡萄糖溶液 1 10000 肾上腺素溶液 胰肾上腺素溶液 胰 高血糖素针剂 糖皮质激素针剂 甲状腺素针剂 生长激素针剂 血糖检高血糖素针剂 糖皮质激素针剂 甲状腺素针剂 生长激素针剂 血糖检 测仪 小鼠手术器械 纱布 注射针头 注射器 鼠笼 小鼠固定器 苦测仪 小鼠手术器械 纱布 注射针头 注射器 鼠笼 小鼠固定器 苦 味酸 味酸 3 六六 实验方法 实验方法 1 胰岛素所致低血糖休克胰岛素所致低血糖休克 1 随机选取随机选取 32 只体重在只体重在 18 22g 之间的健康小鼠作为实验对象 之间的健康小鼠作为实验对象 2 实验前小鼠禁食实验前小鼠禁食 12 小时 不禁水 避免食物引起血糖波动导致实验结果小时 不禁水 避免食物引起血糖波动导致实验结果 不准确 不准确 3 采用随机数字表法随机分为四组 并用苦味酸分别标记 采用随机数字表法随机分为四组 并用苦味酸分别标记 4 四个组分别为生理盐水组和胰岛素低剂量 四个组分别为生理盐水组和胰岛素低剂量 0 25u kg 中剂量 中剂量 1u kg 高剂量 高剂量 4u kg 受试组 受试组 5 对四组分别给予生理盐水和不同剂量的胰岛素 具体给药方法如下 均对四组分别给予生理盐水和不同剂量的胰岛素 具体给药方法如下 均 为皮下注射为皮下注射 生理盐水组 生理盐水组 0 1ml 10g 胰岛素低剂量组 胰岛素胰岛素低剂量组 胰岛素 0 25U kg 0 1ml 10g 0 025U ml 胰岛素中剂量组 胰岛素胰岛素中剂量组 胰岛素 1U kg 0 1ml 10g 0 1U ml 胰岛素高剂量组 胰岛素胰岛素高剂量组 胰岛素 4U kg 0 1ml 10g 0 4U ml 6 观察四组小鼠 是否出现低血糖休克 精神不安 四肢抽搐 继而瘫软 观察四组小鼠 是否出现低血糖休克 精神不安 四肢抽搐 继而瘫软 预计约 预计约 30min 然后对各组小鼠尾静脉采血测血糖 然后对各组小鼠尾静脉采血测血糖 7 记录实验数据 记录实验数据 血糖血糖12345678 生理盐水生理盐水 胰岛素低胰岛素低 胰岛素中胰岛素中 胰岛素高胰岛素高 4 2 胰岛素所致低血糖休克后的解救胰岛素所致低血糖休克后的解救 1 随机选取随机选取 24 只体重在只体重在 18 22g 之间的健康小鼠作为实验对象 之间的健康小鼠作为实验对象 2 实验前小鼠禁食实验前小鼠禁食 12 小时 不禁水 避免食物引起血糖波动导致实验结果小时 不禁水 避免食物引起血糖波动导致实验结果 不准确 不准确 3 采用随机数字表法随机分为三组 记为高剂量采用随机数字表法随机分为三组 记为高剂量 1 高剂量 高剂量 2 高剂量 高剂量 3 并用苦味酸分别标记 并用苦味酸分别标记 4 三个组均先注射高剂量胰岛素三个组均先注射高剂量胰岛素 4U kg 0 1ml 10g 0 4U ml 5 观察三组小鼠 是否出现低血糖休克 精神不安 四肢抽搐 继而瘫软 观察三组小鼠 是否出现低血糖休克 精神不安 四肢抽搐 继而瘫软 预计约 预计约 30min 然后对各组小鼠尾静脉采血测血糖 然后对各组小鼠尾静脉采血测血糖 6 对出现休克的小鼠分别给药 观察低血糖休克的恢复情况 并于给药对出现休克的小鼠分别给药 观察低血糖休克的恢复情况 并于给药 15min 后再次测血糖 具体给药方式如下 腹腔注射后再次测血糖 具体给药方式如下 腹腔注射 高剂量高剂量 1 20 葡萄糖溶液葡萄糖溶液 0 1ml 10g 高剂量高剂量 2 1 10000 肾上腺素溶液肾上腺素溶液 0 1ml 10g 高剂量高剂量 3 生理盐水溶液 生理盐水溶液 0 1ml 10g 7 记录实验结果 记录实验结果 血糖血糖 第一 第一 次次 第二第二 次 次 12345678 高剂量高剂量 1 高剂量高剂量 2 高剂量高剂量 3 三 药物及激素对血糖的影响 三 药物及激素对血糖的影响 5 1 另随机选取小鼠另随机选取小鼠 48 只 体重在只 体重在 18 22g 之间称重 采用随机数字表法随机之间称重 采用随机数字表法随机 分为分为 6 组 每组组 每组 8 只 用苦味酸分别标记 只 用苦味酸分别标记 2 对各组小鼠给予不同药物或激素 具体给药方法如下 均腹腔注射对各组小鼠给予不同药物或激素 具体给药方法如下 均腹腔注射 一组 一组 0 1mg ml 的胰高血糖素溶液的胰高血糖素溶液 0 1ml 10g 二组 二组 5mg ml 的糖皮质激素的糖皮质激素 0 1ml 10g 三组 三组 40mg ml 的甲状腺素的甲状腺素 0 1ml 10g 四组 低剂量 四组 低剂量 0 05U ml 的生长激素 的生长激素 0 1ml 10g 五组 高剂量 五组 高剂量 0 1 U ml 的生长激素 的生长激素 0 1ml 10g 六组 生理盐水六组 生理盐水 0 1ml 10g 3 血糖测定 各组腹腔注射完药物后血糖测定 各组腹腔注射完药物后 15 分钟从小鼠尾静脉采血测血糖 分钟从小鼠尾静脉采血测血糖 4 记录实验数据 记录实验数据 血糖血糖12345678 一组一组 二组二组 三组三组 四组四组 五组五组 六组六组 6 实验预期结果实验预期结果 一 高剂量组出现低血糖休克 其余三组小鼠不会 一 高剂量组出现低血糖休克 其余三组小鼠不会 6 二 三组均会出现低血糖休克 用 二 三组均会出现低血糖休克 用 20 葡萄糖溶液和葡萄糖溶液和 1 10000 肾上腺肾上腺 素溶液能及时解救小鼠的低血糖休克 使血糖逐渐恢复 生理盐水组小鼠素溶液能及时解救小鼠的低血糖休克 使血糖逐渐恢复 生理盐水组小鼠 血糖未恢复 血糖未恢复 三 第六组小鼠血糖正常 其余各组小鼠血糖均有不同程度的变化 三 第六组小鼠血糖正常 其余各组小鼠血糖均有不同程度的变化 由于生理剂量的生长素能促进胰岛素的分泌 具有降低血糖的作用 由于生理剂量的生长素能促进胰岛素的分泌 具有降低血糖的作用 故第四组小鼠血糖降低 其余四组小鼠血糖均有不同程度的升高 故第四组小鼠血糖降低 其余四组小鼠血糖均有不同程度的升高 七 统计分析七 统计分析 1 选择不同药物和激素作用于小鼠后血糖浓度的平均值与生理盐水组小鼠的血选择不同药物和激素作用于小鼠后血糖浓度的平均值与生理盐水组小鼠的血 糖浓度的平均值做比较 看不同药物和激素对血糖的影响 糖浓度的平均值做比较 看不同药物和激素对血糖的影响 2 用用 Excel 软件计算实验后各组血糖的均数和标准差 并进行软件计算实验后各组血糖的均数和标准差 并进行 t 检验 和生检验 和生 理盐水组比较差别的显著性 血糖浓度为理盐水组比较差别的显著性 血糖浓度为 mmol l 八 实验注意事项八 实验注意事项 1 实验中各种药物 激素的浓度 剂量应准确 选择注射部位时应特别注意 实验中各种药物 激素的浓度 剂量应准确 选择注射部位时应特别注意 以免损伤小鼠脏器 以免损伤小鼠脏器 2 尾静脉采血测血糖时操作应迅速 采血完后立即止血 尽量减少小鼠出血量 尾静脉采血测血糖时操作应迅速 采血完后立即止血 尽量减少小鼠出血量 3 实验结果处理时 若个别小鼠血糖出现较大偏差 可考虑舍弃 实验结果处理时 若个别小鼠血糖出现较大偏差 可考虑舍弃 九 可行性分析九 可行性分析 1 本实验中所涉及的药物的浓度 剂量 给药途径 作用时间均有相关文件支本实验中所涉及的药物的浓度 剂量 给药途径 作用时间均有相关文件支 持 持 2 本实验设计中贯穿了统计学思想 如确定样本量 结果分析等 本实验设计中贯穿了统计学思想 如确定样本量 结果分析等 3 实验操作简单易行 可在现有实验条件下进行 实验操作简单易行 可在现有实验条件下进行 7 4 尾静脉采血一次采血量有限尾静脉采血一次采血量有限 可多次采集可多次采集 对小鼠的影响较小对小鼠的影响较小 所以在小鼠糖所以在小鼠糖 尿病研究中常用尾静脉采血来测定其血糖浓度 尿病研究中常用尾静脉采血来测定其血糖浓度 5 实验分三部分 组员实验分三部分 组员 4 人 在操作上不存在人员不足的问题 人 在操作上不存在人员不足的问题 6 实验采用控制变量法 使实验结果更具有科学性 实验采用控制变量法 使实验结果更具有科学性 7 实验小组人员都经过经过设计前的查阅文献和构思 认真的讨论 多次修改 实验小组人员都经过经过设计前的查阅文献和构思 认真的讨论 多次修改 对实验的目的 原理 操作都很清晰 保证实验的顺利进行 对实验的目的 原理 操作都很清晰 保证实验的顺利进行 本实验参考文献 本实验参考文献 1 胰岛素惊厥实验材料的选用与实验结果的分析胰岛素惊厥实验材料的选用与实验结果的分析 沈旭明沈旭明 2 胰岛素低血糖休克胰岛素低血糖休克 韦建恒韦建恒 3 两种检测小鼠血糖方法的比较两种检测小鼠血糖方法的比较 赵晓唐赵晓唐 张红艳张红艳 刘春燕刘春燕 张园张园 4 胰岛素小鼠皮下注射的降血糖作用研究胰岛素小鼠皮下注射的降血糖作用研究 吴润生吴润生 范世锦范世锦 梅赟梅赟 钟月春钟月春 邱丽敏邱丽敏 张礼烙张礼烙 邹丽宜邹丽宜 5 胰岛素小鼠血糖法双交叉实验程序设计胰岛素小鼠血糖法双交叉实验程序设计 李治平李治平 赵晓唐赵晓唐 张红艳张红艳 刘春燕刘春燕 张张 园园 6 创伤刺激