不同来源白头翁药材的皂苷含量比较

1 / 6不同来源白头翁药材的皂苷含量比较作者：时维静,胡跃进,王海侠,谭志静【摘要】 目的 以白头翁皂苷 B4 作为指标,考察不同来源白头翁的质量,为白头翁的加工和选用提供参考。方法 采用高效液相色谱法,对购自亳州中药材大市场白头翁药材与饮片 5 个样品和滁州野生白头翁进行含量测定。结果 在 510 g 范围内线性关系良好,回归方程 Y276 350X12 180,R2 6。结论 不同来源的白头翁药材皂苷B4 含量差异较大。 【关键词】 白头翁；产地；白头翁皂苷 B4；含量测定；高效液相色谱法Key words：Pulsatilla chinensis；original place pulchinenoside B4；content determination；HPLC白头翁为毛茛科植物白头翁 Pulsatilla chinensis(Bge.)Regel 的干燥根1,为多年生草本植物,具有清热解毒、凉血止痢、燥湿杀虫的功效。目前市场上以野生采集品为主,由于产地不一,加工和饮片的切制方法不同,对有效成分的含量影响较大。本试验从亳州中药材大市场不同的摊位购白头2 / 6翁药材 3 种、饮片 2 种,采集滁州凤阳九华山野生白头翁,计 6 个样品。以白头翁皂苷 B4 为对照品,采用高效液相色谱法测定其含量,为白头翁的加工和选用提供参考。1 材料美国 Waters 1525 型高效液相色谱仪,2487 DAD 紫外检测器,Breeze 色谱工作站(美国 Waters)；TU-1810SPC紫外可见分光光度计(北京普析通用有限公司)；BS21S 精密电子天平(德国赛多利斯天平有限公司)。白头翁皂苷 B4,暨南大学叶文才教授惠赠。乙腈、甲醇为色谱纯；水为超纯水；其余试剂均为分析纯。2 方法与结果白头翁样品的采集市场样品采集于 XX 年 9 月,在亳州中药材大市场不同的摊位购白头翁药材 A、B、C 3 种及饮片 D、E 2 种。A产地长春；B 产地河南；C 产地安徽；D 购自亳州京皖饮片厂,产地内蒙古；E 购于亳州中信饮片厂,产地安徽。滁州凤阳九华山白头翁于 XX 年 8 月采集,清水洗净,拭干,立即置 105 干燥箱杀酶 5 min,取出,待温度降至 50 ,再放入干燥箱中烘干,编号为 F。白头翁皂苷 B4 含量测定检测波长的确定取白头翁对照品溶液,以甲醇溶液作空白基线,在3 / 6400190 nm 波长范围内扫描。结果表明,白头翁皂苷 B4在 205 nm 波长处有最大吸收,甲醇溶液对样品的测定无干扰。色谱条件固定相：ZORBAX SB-C18 柱( mm150 mm, 5 m)；流动相：乙腈-水(2872)；体积流量 mL/min；检测波长205 nm；柱温：室温。标准曲线的制作称取 mg 白头翁皂苷 B4 置 10 mL 容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇均,即得 mg/mL 浓度的白头翁皂苷 B4 溶液,取 5 mL 置 10 mL 容量瓶中,甲醇定容至刻度得 mg/mL,依次类推,进行倍比稀释得、 、 2、 6 mg/mL 6 个梯度浓度的对照品溶液,进样量 20 L。以进样量为横坐标,峰面积积分值为纵坐标绘制标准曲线,得回归方程 Y276 350X12 180,R2 6。白头翁皂苷 B4 在 510 g 范围线性关系良好。供试品溶液的制备 精密称定各样品白头翁粗粉 g,置圆底烧瓶中,加 95%乙醇溶液 100 mL 回流提取 2 h,提取 3 次,过滤,静置 12 h。回收乙醇浓缩至 20 mL,取 1 mL 放入 100 mL 的容量瓶中,加4 / 6甲醇定容至刻度,即每毫升溶液相当于原药材。于 m 微孔滤膜滤过,作为供试品溶液。系统适用性考察 在上述色谱条件下,分别吸取对照品溶液和供试品溶液各 20 L,注入液相色谱仪,测定。结果表明,供试品中白头翁皂苷 B4 与其相邻峰的分离好,保留时间适中(近 8 min)。结果见图 1。精密度试验精密吸取对照品溶液 20 L,注入液相色谱仪中,平行测定 5 次,在上述色谱条件下测定,对照品峰面积的 RSD%。结果表明精密度良好。稳定性试验精密吸取同一供试品溶液 20 L,注入色谱仪中,在上述色谱条件下,于 0、2、4、6、8、12、24 h 范围内测定,结果表明,供试品溶液在 24 h 内稳定性良好,供试品白头翁皂苷 B4 峰面积 RSD%。重复性试验取滁州凤阳白头翁 100 g,粉碎、混匀。分为 5 份(各 20 g),照供试品溶液制备项下操作,制成供试品溶液,在上述色谱条件下测其白头翁皂苷 B4 的峰面积,RSD%,表明重复性良好。5 / 6回收率试验精密称取已知皂苷 B4 含量的样品 g,分别加入皂苷B4 对照品适量,依供试品溶液的制备方法处理成 5 份,按上述色谱条件进样分析。回收率(n5)为%,RSD%。不同来源白头翁皂苷 B4 含量比较(见表 1)表 1 不同来源白头翁皂苷 B4 含量测定结果3 讨论地理环境和气候条件是有效成分积累的基础2,所以,来源于不同地区的白头翁药材,白头翁皂苷 B4 含量有一定的差异。样品 C、E、F 产地均为安徽,为什么含量相差如此之大？经我们多年研究表明,一是白头翁为多年生草本植物,不同的采收时间对其含量有影响；二是白头翁在干燥过程中存在酶解现象,所以杀酶后再 50 干燥,其含量较高；三是白头翁皂苷为水溶性物质,饮片切制过程中润洗不当可导致其丧失,故饮片中其含量较低。中药材和饮片是中药质量源头,其真