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文档简介
第8章 细菌感染的检查方法与防治原则,病原菌检测:检测病原菌及其抗原、代谢产物或核酸,病原菌检测:形态、分离与鉴定 病原菌抗原的检测 其他检测法:PCR等,第一节 细菌感染的诊断,血清学诊断:检测患者血清中特异性抗体,标本的采集和送检原则,无菌操作,早期采集,做好标记,尽快送检,一、病原菌检测(一)标本的采集与运送,适当标本,(二)细菌分离培养与鉴定1、细菌培养 接种于适当培养基,根据菌落特征作初步鉴别。2、形态学检查(1)不染色标本检查法 压滴法、悬滴法,用暗视野显微镜或相差显微镜检查(2)染色标本检查法 革兰染色法、单染色法、抗酸染色法、特殊染色法,3、生化试验 现已有多种微量、快速的生化反应试剂盒以及半自动或全自动检测仪器应用于临床。4、血清血鉴定 已知Ab(多价、单价诊断血清)查未知Ag,常作玻片凝集试验,确定细菌的种、型。5、动物试验 分离、鉴定致病菌,测定某些细菌的毒力;常用小鼠、豚鼠、家兔等。6、药物敏感试验 对指导临床选择用药,及时控制感染具有重要意义。,致病菌的分离和鉴定,药物敏感试验,标本,培养特征,形态特征,生化试验,血清学鉴定,动物试验,培养基,优点: 不受抗生素使用的限制 敏感性高1、酶免疫技术(EIA) 酶联免疫吸附法、酶标免疫组化法2、协同凝集试验 3、免疫荧光技术(IF)荧光菌球法4、对流免疫电泳(CIE)5、免疫印记技术,(三)病原菌抗原的检测,(四)病原菌核酸的检测 不同的细菌具有不同的基因结构,通过测定细菌的特异性基因序列进行比较和鉴定。 1、核酸杂交技术 2、PCR技术 3、基因芯片(gene clips)技术,PCR,二、血清学诊断,原理 用已知Ag检测患者血清中未知Ab及其效价的变化,可作为感染性疾病的辅助诊断。双份血清 恢复期或一周后血清抗体效价比早期升高4倍以上(含4倍),可确诊。 种类直接凝集试验(肥达试验)补体结合试验、中和试验乳胶凝集试验、ELISA,人工免疫,人工主动免疫 artificial active immunization疫苗(vaccine)类毒素,人工被动免疫 artificial passive immunization抗毒素抗菌血清丙种球蛋白其他免疫制剂,第二节 细菌感染的特异性预防,一、人工主动免疫 将疫苗及类毒素(抗原)接种于人体,使机体主动产生获得性免疫力。主要用于预防。(一)疫苗第一代疫苗:死疫苗、活疫苗第二代疫苗:亚单位疫苗、基因工程疫苗第三代疫苗:DNA疫苗(核酸疫苗)1、死疫苗:伤寒、霍乱、流脑、钩体病等死疫苗。2、活疫苗:BCG、鼠疫、炭疽、脊髓灰质炎、麻疹等减毒活疫苗。,两种疫苗优、缺点比较,活疫苗接种次数 1次接种剂量 小接种反应 轻/隐性感染免疫类型 体液、细胞免疫时间 持久稳定性 差毒力回复 有可能安全性 免疫缺陷者危险,死疫苗 2-3次 大 明显 体液 短暂 强 无 好,2、亚单位疫苗(subunit vaccine) 利用微生物的保护性抗原制成的不含有核酸、能诱发机体产生免疫应答的疫苗。如肺炎球菌、脑膜炎球菌荚膜多糖疫苗。3、基因工程疫苗 利用基因工程技术把编码病原体保护性抗原表位的目的基因,导入原核或真核表达系统后,用表达的保护性抗原所制成的疫苗。,4、核酸疫苗(nucleic acid vaccine)也称DNA疫苗,将编码保护性抗原的基因重组到质粒真核表达载体上,然后将重组的质粒DNA直接注射到宿主体内,外源基因在体内表达的抗原刺激机体的免疫应答。(二)类毒素 是用细菌的外毒素经0.3%0.4%甲醛处理后,其毒性消失但保留免疫原性。如白喉、破伤风类毒素。,二、人工被动免疫 输入含有特异性抗体的免疫血清、纯化免疫球蛋白抗体或细胞因子等免疫制剂,使机体立即获得特异性免疫力的过程。 抗毒素 用细菌类毒素多次给马注射,待其产生大量抗体后,放血并分离马血清经提纯后制成的制剂。如TAT、TDT等。抗菌血清,丙种球蛋白(1)血清丙种球蛋白 从正常人血中提取的免疫球蛋白(IgG、IgM)。(2)胎盘丙种球蛋白 从胎盘血中提取的免疫球蛋白(IgG)。其他免疫制剂,两种人工免疫方法的比较,第三节 细菌感染的治疗,抗菌药物的种类 抗菌药物的主要作用机制 抗菌药物的存
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