第21章-螺旋体.ppt

第二十一章螺旋体 spirochete 第一节钩端螺旋体属第二节密螺旋体属第三节疏螺旋体属 螺旋体 spirochete 是一类细长 柔软 螺旋状 运动活泼的原核细胞型微生物 基本结构与细菌相似 有细胞壁 原始核质 以二分裂方式繁殖和对抗生素等药物敏感等 Syphilis TreponemapallidumLeptospirosis LeptospirainterrogansRelapsingfever BorreliarecurrentisLymedisease Borreliaburgdorferi Spirochetediseasesofhumans 螺旋体目致病性螺旋体的种类 Spirochetestructure protein fattyacids Borreliaburgdorferi Treponemapallidum Leptospira 病原性螺旋体的特性 第一节钩端螺旋体属 Leptospira 问号状钩端螺旋体 L interrogans 双曲钩端螺旋体 L biflexa 螺旋细密 规则 形似细小珍珠排列的细链 一端或两端呈钩状 菌体常呈C S或8字型革兰染色阴性 不易着染Fontana镀银染色法 染成棕褐色运动活泼 形态与染色 一 生物学性状 营养要求较高 常用含10 兔血清的Korthof培养基适宜生长温度为28 30 最适pH7 2 7 6钩端螺旋体在人工培养基中生长缓慢 在液体培养基中 培养一周左右 呈现为半透明云雾状生长需氧或微需氧 培养特性 Korthof培养基 成分蛋白胨400mg 氯化钠700mg 碳酸氢钠10mg 氯化钾20mg 氯化钙20mg 磷酸二氢钾120mg 磷酸氢二钠44Omg 蒸馏水500ml 无菌兔血清 灭活 8 10ml 将各成分溶于蒸馏水内煮沸20min 以滤纸滤 调至pH为7 2 分装烧瓶内每瓶100ml 121 灭菌20min 无菌采取兔心血分离血清 置56 水浴箱中30min以破坏补体 上述蛋白胨盐溶液每100ml中加入无菌兔血清8 10ml 混合后 用无菌分装中号试管中 每管5ml 置56 水浴箱30min 37 温箱中孵育2天 剔去污染者 抵抗力 弱 热抵抗力弱 60 1min即死亡0 2 来苏 1 2000升汞 1 石炭酸经10 30min被杀灭对青霉素敏感在湿土或水中可存活数月 抗原性 属特异性蛋白抗原 genus specificproteinantigen 糖蛋白或脂蛋白群特异性抗原 serogroup specificantigen 脂多糖复合物型特异性抗原 serovar specificantigen 菌体表面多糖显微镜凝集试验 microscopicagglutinationtest MAT 凝集吸收试验 agglutinationabsorptiontest AAT 分型 全世界已发现及确定有25群和273血清型国内已发现19群和74个血清型 是世界上发现血清型最多的国家 主要菌群 波摩那群 pomona 黄疸出血群 icterohaemorrhagiae 犬群 canicola 流感伤寒群 grippotyphosa 七日热群 hebdomadis Leptospirosisisawidelyspreaddiseaseofglobalconcern Infectioncausesflu likeepisodeswithfrequentsevererenalandhepaticdamage suchashaemorrhageandjaundice Inmoreseverecases massivepulmonaryhaemorrhages includingfatalsuddenhaemoptysis canoccur Herewereportthecompletegenomicsequenceofarepresentativevirulentserovartypestrain Lai ofLeptospirainterrogansserogroupIcterohaemorrhagiaeconsistingofa4 33 megabaselargechromosomeanda359 kilobasesmallchromosome withatotalof4 768predictedgenes Intermsofthegeneticdeterminantsofphysiologicalcharacteristics thefacultativelyparasiticL interrogansdiffersextensivelyfromtwootherstrictlyparasiticpathogenicspirochaetes TreponemapallidumandBorreliaburgdorferi althoughsimilaritiesexistinthegenesthatgoverntheiruniquemorphologicalfeatures AcomprehensiveanalysisoftheL interrogansgenesforchemotaxis motilityandlipopolysaccharidesynthesisprovidesabasisforin depthstudiesofvirulenceandpathogenesis Thediscoveryofaseriesofgenespossiblyrelatedtoadhesion invasionandthehaematologicalchangesthatcharacterizeleptospirosishasprovidedcluesabouthowanenvironmentalorganismmightevolveintoanimportanthumanpathogen RenSX FuG JiangXG ZengR MiaoYG XuH ZhangYX XiongH LuG LuLF JiangHQ JiaJ TuYF JiangJX GuWY ZhangYQ CaiZ ShengHH YinHF ZhangY ZhuGF WanM HuangHL QianZ WangSY MaW YaoZJ ShenY QiangBQ XiaQC GuoXK DanchinA SaintGironsI SomervilleRL WenYM ShiMH ChenZ XuJG ZhaoGP UniquephysiologicalandpathogenicfeaturesofLeptospirainterrogansrevealedbywhole genomesequencing Nature 2003Apr24 422 6934 888 93 流行环节 传染源 多种动物 在感染动物肾脏内长期存在 随尿排出传播途径 直接接触传播 带菌尿污染环境 人可通过收割水稻 接触雨水 洪水或其他机会 通过皮肤粘膜细微破损处感染母婴传播人群易感性 人群普遍易感 隐性感染率高 流行特征 流行地区 遍及全世界 以热带及亚热带地区多见 国内26个省市自治区均有本病发生或流行 以长江流域及其以南 东南沿海及西南各省市自治区较严重 近年来发病率有所下降 但在部分地区仍有流行发病季节 多在雨季夏秋季 6 9月 8 9月为高峰青壮年 农民 渔民及下水道工人等高发 致病性与免疫性 致病物质 类似细菌内毒素与外毒素 内毒素样物质 ELS 或称脂多糖样物质 LLS 溶血素 破坏红细胞膜细胞毒性因子 CTF 致细胞病变作用 CPE 物质 所致疾病 钩端螺旋体病 leptospirosis 一种人畜共患传染病 传染源 传播途径 鼠和猪 粘膜或破损皮肤胎盘垂直传播 临床表现 疾病特点 起病急 高热 乏力 全身酸痛 眼结膜充血 腓肠肌压痛 表浅淋巴结肿大 PathogenesisLeptospiraentersthehostthroughmucosaandbrokenskin resultinginbacteremia Thespirochetesmultiplyinorgans mostcommonlythecentralnervoussystem kidneys andliver Theyareclearedbytheimmuneresponsefromthebloodandmosttissuesbutpersistandmultiplyforsometimeinthekidneytubules Infectivebacteriaareshedintheurine Themechanismoftissuedamageisnotknown 发病机理 钩端螺旋体 皮肤或黏膜 血流 全身毛细血管的中毒性损 早期 中期 恢复期 感染中毒期器官损害期单纯败血症 leptospitemia 迟发型变态反应 肺出血后发热内脏损害 肝炎反应性脑膜炎 间质性肾炎眼部炎症 脑膜脑炎闭塞性脑动脉炎 临床表现 潜伏期2 20日 一般7 13日 临床分型1 单纯型 发热 肌肉疼痛 以腓肠肌和腰背肌明显 结膜充血 腓肠肌压痛 浅表淋巴结肿大及压痛 其它 肝肿大 咽痛 红肿 2 肺出血型 病程3 4天 轻度肺出血 咳嗽 咳血 肺部少许湿罗音 胸片可见散在点状或小片阴影 肺弥漫性出血 发热及中毒症状加重 气紧 心慌 窒息 胸片双肺广泛点片状阴影或大片状融合 神志恍惚或昏迷 发绀 呼吸不规律 大量咳血 窒息死亡 轻度中度重度消化道症状较明显重出血无重度重度凝血功能基本正常异常明显异常尿蛋白阴性阳性 以上管型可见较多预后良好可逐渐恢复较差 3 黄疸出血型 病程4 8天 4 肾功能衰竭型 常与黄疸出血型合并出现 主要表现为蛋白尿及少量细胞和管型 严重可出现尿毒症 急性肾衰的表现 5 脑膜脑炎型 发热3 4天后出现脑膜脑炎的临床表现 死亡率 肾衰70 肝功能衰竭20 严重出血10 后发症 后发热 经治疗或自愈后再度发热 1 3天可自退 不需治疗反应性脑膜炎 在后发热时或稍后出现 钩体培养阴性 预后良好眼的后发症 退热1W 1M 虹膜睫状体炎 脉络炎或葡萄膜炎等闭塞性脑动脉炎 波摩那型钩体病流行后2 5月 变态反应所致 脑基底部多发动脉炎导致脑缺血 引起偏瘫 失语等 大多可恢复 免疫性 特异性体液免疫为主 感染后及病后仅获同型免疫力 故可二次感染发病 微生物学检查法 发病10天内取血液 2周后取尿液 有脑膜刺激者取脑脊液直接镜检分离与鉴定接种至Korthof培养基 置28 孵育阳性标本 在2周内可见培养液呈轻度混浊 暗视野显微镜检查 有 则用已知诊断血清鉴定其血清群和血清型 阴性标本 分离培养应连续观察4个月 仍无生长者动物接种幼龄豚鼠或金地鼠腹腔接种DNA探针杂交及PCR法检测钩体DNA 血清学诊断 病初和发病后第3 4周各采血清一次 有脑膜刺激症状者采取脑脊液方法 显微镜凝集试验 MAT 间接凝集试验以乳胶 聚苯乙烯 或活性炭微粒为载体 吸附钩端螺旋体可溶性抗原作为指示物 防治原则消灭传染源 大力灭鼠 加强病畜管理切断传播途径 保护好水源 避免或减少与疫水接触提高易感人群免疫力 对流行区的居民 矿工 饲养员及外来易感人员进行多价钩体死疫苗接种治疗 钩体对多种抗生素敏感 但以青霉素效果最好 对过敏者可用庆大霉素或金霉素 第二节密螺旋体属 Treponema 人类致病的密螺旋体有四种 梅毒螺旋体 T pallidum 梅毒 syphilis 雅司螺旋体 T pertenue 雅司病 yaws 地方性螺旋体 T endemicum 地方性梅毒 endemicsyphilis 品他螺旋体 T carateum 品他 pinta 生物学性状 8 14个致密而规则的小螺旋 两端尖直运动活泼革兰染色阴性 不易着染Fontana镀银染色法 染成棕褐色 形态与染色 OM outermembraneEf endoflagellaorperiplasmicflagella LP1 2 lipoproteinspg peptidoglycanCM cytoplasmicmembraneBF bodyfibrilsWM cellwallmembrane 不能在无活细胞的人工培养基中生长繁殖在家兔上皮细胞培养中能有限生长 繁殖慢 培养 抵抗力 极弱 对温度和干燥特别敏感对常用化学消毒剂敏感 1 2 石炭酸数分钟死亡对青霉素 四环素 红霉素或砷剂均敏感 致病性与免疫性 致病物质荚膜样物质 菌体表面的黏多糖和唾液酸 免疫抑制透明质酸酶 有利于扩散所致疾病 梅毒人是梅毒的唯一传染源获得性 性接触传播先天性 母体 胎盘 胎儿免疫性 感染性免疫细胞免疫比体液免疫重要 获得性梅毒 syphilis 期 初期 梅毒 感染性极强 破坏性小感染后3周左右局部出现无痛性硬下疳 多见于外生殖器 一般4 8周后 常自愈 期梅毒 感染性强 破坏性小发生于硬下疳出现后2 8周 苍白亚种螺旋体血症 全身皮肤 粘膜常有梅毒疹 全身淋巴结肿大 有时亦累及骨 关节 眼及其他脏器 期 晚期 梅毒 感染性小 破坏性大发生于感染2年以后 亦可长达10 15年的 病变可波及全身组织和器官 基本损害为慢性肉芽肿 局部组织坏死 损害常进展和消退交替出现 皮肤 肝 脾和骨骼常被累及 可危及生命 Developmentoftheclinicalstagesofsyphilisovertime Chancreofprimarysyphilis PrimarySyphilis PenileChancre Source CDC NCHSTP DivisionofSTDPrevention STDClinicalSlides PrimarySyphilis LabialChancre Source CDC NCHSTP DivisionofSTDPrevention STDClinicalSlides Secondarysyphilis asampleofskinmanifestations SecondarySyphilis Palmar PlantarRash Source SeattleSTD HIVPreventionTrainingCenterattheUniversityofWashington UWHSCERSlideBank Source CDC NCHSTP DivisionofSTDPrevention STDClinicalSlides SecondarySyphilis PapulosquamousRash Source CDC NCHSTP DivisionofSTDPrevention STDClinicalSlides SecondarySyphilis GeneralizedBodyRash Source CincinnatiSTD HIVPreventionTrainingCenter Source CDC NCHSTP DivisionofSTDPrevention STDClinicalSlides SecondarySyphilis Condylomatalata Source CDC NCHSTP DivisionofSTDPrevention STDClinicalSlides Neurosyphilis SpirochetesinNeuralTissue Source CDC NCHSTP DivisionofSTDPrevention STDClinicalSlides Silverstain 950 x LateSyphilis UlceratingGumma Source CDC NCHSTP DivisionofSTDPrevention STDClinicalSlides 先天性梅毒 胎传梅毒 多发生于妊娠4个月之后引起胎儿的全身性感染 导致流产 早产或死胎出生梅毒儿 呈现马鞍鼻 锯齿形牙 间质性角膜炎 先天性耳聋等特殊体征 Saddlebacknose Congenitalsyphiliscanproducetell talesignsininfectedpersons asample CongenitalSyphilis Hutchinson sTeeth Source CDC NCHSTP DivisionofSTDPrevention STDClinicalSlides CongenitalSyphilis MucousPatches Source CDC NCHSTP DivisionofSTDPrevention STDClinicalSlides CongenitalSyphilis PerforationofPalate Source CDC NCHSTP DivisionofSTDPrevention STDClinicalSlides 微生物学检查法 1 标本 期梅毒 硬下疳渗出液 期梅毒 梅毒疹渗出液或局部淋巴结抽出液2 显微镜检查3 血清学诊断 非特异性 非螺旋体抗原试验抗原 正常牛心肌的心脂质 血清中的反应素 抗脂质抗体 方法 USR unheatedserumreagi