子宫腺肌病患者诱生型一氧化氮合酶表达的研究

1 / 5子宫腺肌病患者诱生型一氧化氮合酶表达的研究作者：王秀伟范广忠靳晓倩 【关键词】子宫腺肌病;子宫内膜;诱生型一氧化氮合酶;免疫组织化学 子宫腺肌病是妇科常见病，以在子宫肌壁内出现子宫内膜腺体和间质为其病变征，此病多发生于 3050 岁经产妇，临床上往往以子宫增大、痛经和月经过多为其主要症状。近年来对该病的发生机制提出一些新的看法，关于血管生成、免疫等方面的异常在子宫腺肌病的发生发展中起重要作用。子宫内膜侵入子宫肌层后，血管生成活性的增强，为异位内膜的种植生成提供了有利条件1。NO 可诱导血管内皮细胞的分裂增生，调节血管生成及血流量，由此推测可在子宫腺肌的发生发展中发挥作用。所以本研究用免疫组化的方法，测定子宫腺肌病患者在位内膜与异位内膜诱导型一氧化氯合酶(iNOS)的含量，旨在探讨其在子宫腺肌病的发生发展过程中所起的作用和意义，为临床治疗提供理论依据。 1 资料与方法 2 / 5标本来源材料均取本院 XX 年 9 月XX 年 3 月手术切除并有完整临床资料的子宫标本，腺肌病组:子宫腺肌病 38例，患者年龄 3549 岁，平均年龄岁;子宫内膜组织学分期:增生期 20 例，分泌期 18 例。肌瘤组:无症状子宫肌瘤31 例，3851 岁，平均年龄岁;子宫内膜组织学分期:增生期 17 例，分泌期 14 例两组患者术前 3 个月内均未服用任何激素类药物。所有病例均行子宫全切或次全切除术，并经病理诊断证实。即用型 SABC 免疫组织化学染色试剂盒(产品编号:SA1022)为武汉博士德生物工程有限公司产品。 方法石蜡切片常规二甲苯脱蜡，梯度酒精水化，PBS液洗 5min,3%H2O25min,PBS 洗 5min;10%山羊血清室温10min;一抗(150)，冰箱 4过夜，PBS 洗 5min;二抗(1150)37温箱 30min,PBS 洗 5min;SABC30min,PBS 洗5min;DAB 显色 5min,自来水冲洗;苏木素复染，脱水透明，封片。 结果判定结果判断标准2以细胞浆出现黄色颗粒为阳性，表达强度用组织学评分表示。组织学评分为 Pi，其中 i 代表细胞浆染色强度，分为 4 级:0 级无黄色颗粒，1 级为淡黄色颗粒，2 级为黄色颗粒，3 级为棕色颗粒;P 代3 / 5表同一染色强度细胞所占计数细胞百分数，1、2、3、4、5分别代表染色细胞占计数细胞总数的0%15%、16%50%、51%85%、86%95%、96%100%。每张切片随机测定 5 个高倍镜视野(200 倍)的染色强度，取5 个视野的组织学评分均值作为最终得分。 统计学处理实验结果用 xs 表示，采用方差分析和两两比较 t 检验，P)。同时，两组子宫内膜腺上皮的增殖期和分泌期 iNOS 组织学评分比较，差异无显著性(P)，即无周期性变化，见表 1。表 1 两组患者正常内膜、异位内膜腺上皮细胞 iNOS 组织学评分比较注:*与肌瘤组正常内膜比较，P，与在位内膜比较，P 腺肌病组在位内膜与异位内膜 iNOS 组织学评分比较腺肌病组增殖期或分泌期异位内膜腺上皮细胞 iNOS 组织学评分均较在位内膜显著增加，两者比较，差异有显著性(P)，见表 1。腺肌病组与肌瘤组血管平滑肌 iNOS 组织学评分比较腺肌病组血管平滑肌细胞 iNOS 组织学评分()较肌瘤组血管平滑肌细胞 iNOS 组织学评分()显著增加，两者比较，差异有显著性(P)。 4 / 53 讨论 内源性 NO 是由一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)以 L?精氨酸为底物，在还原型辅酶(NADPH)存在下生成，催化该反应的 NOS 有两种同工酶，即结构型 NOS(constitutiveNOS,cNOS)和诱生型NOS(inducibleNOS,iNOS),前者合成的 NO 含量很小，主要参与人体的正常生理活动，主要存在与内皮细胞，神经原细胞，肾上腺皮质细胞和血小板等。机体内 iNOS 催化产生大量 NO 主要参与机体的病理生理过程，本研究结果显示，腺肌病患者在位子宫内膜与子宫肌瘤患者子宫内膜 iNOS 的表达强度无明显差异，均无周期性变化。腺肌病患者异位内膜 iNOS 的表达强度显著高于其在位内膜。另外 Schindl等1研究发现在子宫腺肌病中，在位内膜微血管密度与正常内膜间无差异，而异位内膜则高于在位内膜和正常内膜，且在月经周期中无改变，与本研究结果一致，说明子宫内膜在侵入子宫肌层后，血管生成活性增强。 另外本研究结果显示，在腺肌病组，血管平滑肌iNOS 表达强度高于肌瘤组，表明 NO 还通过血管扩张作用，增加血流量，为异位内膜种植提供条件。子宫内膜异位种植后，由于生理特性的改变3，可通过自分泌细胞因子诱5 / 5导 iNOS 产生增强而调节 NO 的合成。杨丹等4的实验结果提示，雌激素与 ER 结合后，可能通过增加血管平滑肌细胞的 iNOS 的活性和蛋白的表达，促进其生成和释放 NO 增加。另外，NO 可诱导内皮细胞的分裂、增生，调节血管形成为异位内膜的形成创造条件。没有 NO，生长中的肿瘤大小会因血供缺乏而