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化学化工学院毕业论文模板化学化工学院毕业论文模板 空1行 目 空四格 录 黑体三号字加粗居中 空1行 以 下内容行间距离1 5倍行距 摘要 宋体四号字中间空两格 1 小四号 引言 宋体四号字中间空两格 11实验部分 宋体四号字 31 1仪器与试剂 宋体小四号字 31 2实验方法 宋体小四号字 32结果与讨论 宋体四号字 32 1吸收光谱 宋体小四号字 32 2测定条件的优化 宋体小四号 字 42 3分析方法特性 宋体小四号字 62 4共存物质影响 宋体小四号字 7 2 5样品分析 宋体小四号字 73结论 宋体四号字中间空两格 8参考文献 宋体四 号字 8致谢 宋体四号字中间空两格 11酶催化动力学光度法测定肾上腺素 宋体三号字加粗 居中 1 5倍行距 空两格 摘要 黑体小四 本文基于肾上腺 素对血红蛋白酶催化体系的抑制作用 建立了酶催化动力学光度法 测定肾上腺素的新方法 本实验从酸度 显色剂浓度 过氧化氢浓度及血红蛋白浓度等方面 研究了体系的最佳条件及动力学行为 测定的线性范围为4 5 10 7 1 4 10 5mol L 方法检出限为5 2 10 8mol L 对浓度为9 0 10 6mol L的盐酸肾上腺素进行11次平行测定相对标准偏差为3 5 此方法可用于药物中肾上腺素含量的测定 结果令人满意 楷体小四号字不加粗 1 5倍行距 标点为中文半角不加空格 空两格 关键词 黑体小四 肾上腺素 酶催化动力学光度法 血 红蛋白 楷体小四号字不加粗 分号为中文半角不加空格 空一 行 Determination ofAdrenaline byEnzymatic CatalyticSpectrophotometry Times NewRoman四号加黑 首英文字母大写 介词除外 Abstract Time s NewRoman小四加粗 冒号英文半角加粗后面加空格 A highsensitive andsimple spectrophotometricmethod for the determination of adrenalinebased onthe inhibitionof hemoglobinfortheoxidation ofH2O2with acidchrome blueK wasdeveloped The percentageinhibition I of systemis calculatedunder theoptimal experimentalconditions The calibrationcurve islinear inthe rangeof4 5 10 7 1 4 10 5mol L withthe detectionlimit of5 2 10 8mol L The relativestandard deviationof thismethod is3 5 at9 0 10 6mol L for11determinations This methodcan beused forthe determination of adrenalinein pharmaceuticalswith satisfactoryresults Times NewRoman小四不加黑 1 5倍行距 英文摘要正文部分标点为英文半 角加空格 调整好单词位置后分散对齐 英文摘要应符合英文语法 意思与中文一致 句型力求简单 通常应有 五个以上意义完整 语句顺畅的句子 Key Words Adrenaline Enzymatic catalyticspectrophotometry Hemoglobin Key WordsTimes NewRoman小四加黑冒号英文半角加黑后面空一格 内容Times NewRoman小四不加粗 1 5倍行距 分号英文半角后空一格 首英文 字母大写 引言 宋体四号加粗 顶格 引言内容宋体小四号不 加粗 所引文献标号按序排列 肾上腺素 AD 为儿茶酚胺类物质 CAs 是一类非常重要的生理学神经递质 它通过心血管的调解 新陈代谢 内脏运动等来维持人体内部动态 平衡和对急性和慢性压力的反馈 1 2 儿茶酚胺类物质是肾上腺髓质 肾上腺能神经元及肾上腺外嗜铬体 等合成和分泌的 这类物质及代谢物的分泌 代谢的测定在基础研 究及临床医学中有着重要意义 由于这类激素或神经递质在生物体 中的重要作用 促使人们不断改进和探索分离和检测这类物质及其 代谢物 肾上腺素是肾上腺髓质分泌的激素 一方面 它可使心血管收缩 心脑活动加强 血压急剧上升 另一方面 它是促进分解代谢的重 要激素 能加强肝糖原分解 迅速升高血糖 加强机体应付意外情 况的能力 此外 它还具有促进白质 氨基酸及脂肪分解 增强气体代谢 升 高体温等作用 3 在制药学上 肾上腺素被广泛地用来治疗精神失常 4 急性过敏 哮喘 支气管哮喘 心脏缓搏 心搏停止 青光眼和用作止血剂 5 通过检测人体肾上腺素及其代谢产物的浓度 为药物分析及临床提 供参考 因此 探索快速 方便 灵敏检测肾上腺素的方法具有重 要意义 目前国内 外测定肾上腺素的方法很多 主要有高效液相色谱法 6 7 荧光光度法 8 10 电化学分析法 11 毛细管电泳法 12 13 化学发光分析法 14 分光光度法 15 等 目前检测AD各种方法各有其特点 如荧光法重现性较好 但检测灵 敏度不能满足临床诊断的要求 高效液相色谱法 方法稳定 重复 性好 且取样方便 能较全面反映机体交感神经系统活性 缺点在 于回收率太低 液相化学发光分析法不需要大量的检测试剂 而且 可把探头小型化使整台仪器便于携带 但由于灵敏度的影响 只 能用于药剂检测中 2 很多方法在灵敏度 特异度和检测速度等方面还不能非常好地满足 临床疾病诊断的需要 总之 HPLC法仍是目前最为先进快捷的AD临床和实验室检测法 但 价格昂贵 操作较为复杂 而不需通过HPLC分离的荧光检测法是一种非常先进的分析手段 但 它也存在小剂量需要提纯 检测限太高等不足 2 在分光光度法测定法中未见酶催化动力学法测定肾上腺素的相关报 道 动力学是利用混合物中各组分反应速率的差异 通过检测与反应物 速率成比例关系的吸光度来计算待测物质的浓度 相对于其它方法 此法具有灵敏度高 反应选择性好 设备简单 操作方便的特点 易于推广 血红蛋白 Hb 具有和天然生物酶辣根过氧化物酶 HRP 相同的铁 卟啉辅基和相似的空间结构 因而具备了过氧化物酶的特性 并且 具有稳定 价廉的优点 16 在碱性介质中 血红蛋白对过氧化氢氧化酸性铬蓝K具有强烈的催化 作用 而肾上腺素对该体系具有一定的抑制作用 据此建立了测定肾上腺素的高灵敏度分析方法 本实验通过研究肾上腺素对体系的抑程度来实现对肾上腺素含量的 测定 此方法可用于药物中肾上腺素含量的测定 结果令人满意 1实验部分 一级标题宋体四号加粗 1 5倍行距 顶格 1 1仪器与 试剂 二级标题宋体小四号加粗 1 5倍行距 顶格 S 22PC型分光光度计 上海棱光技术有限公司 PHS 3C型酸度计 上海理达仪器厂 电子分析天平 北京赛多利斯天 平有限公司 牛血红蛋白 生化试剂 上海伯奥生物科学有限公司 准确称取牛血红蛋白0 3401g 用水溶解成5 10 5mol L的储备液 工作液储备液用水稀释为5 0 10 6mol L 现配现用 酸性铬蓝K 北京化学试剂厂 准确称取0 0587g 用水稀释成1 0 10 3mol L的储备液 工作液用水稀释成1 0 10 4mol L的工作液 现配现用 盐酸肾上腺素标准溶液准确称取0 0494g的盐酸肾上腺素 用水稀释 成50mL得到浓度为4 5 10 4mol L的储备液 工作液用水稀释成4 5 10 4mol L 待用 缓冲溶液按一定比例配制pH分别为9 1 9 5 9 8 10 1 10 4 10 7 11 0的缓冲溶液 以待使用 1 2实验方法 二级标题宋体小四号加粗 1 5倍行距 顶格 在10m L比色管中依次加入2 0mL的NH3 NH4Cl缓冲溶液 浓度1 0 10 4mol L的酸性铬蓝K溶液 1 0 10 3mol L的H2O2溶液 不同浓度的盐酸肾上腺素标准溶液 5 0 10 6mol L的牛血红蛋白 用水定容 在室温下放置15分钟后 用1cm吸收皿 以水作参比 在546nm处测 量吸光度 以不加牛血红蛋白和肾上腺素的试剂溶液为空白A0 不加肾上腺素 的试剂溶液吸光度A1 加盐酸肾上腺素的试剂溶液吸光度A2 其计 算抑制率I A2 A1 A0 A1用所得抑制率对盐酸肾上腺素的浓度作标准曲线 2结果与讨论 一级标题宋体四号加粗 1 5倍行距 顶格 2 1吸收 光谱 二级标题宋体小四号加粗 1 5倍行距 顶格 如图1所示 最大吸收波长均为546nm 加入血红蛋白后试剂溶液吸光度明显降低 而加入盐酸肾上腺素后体系吸光度降低减少 表明盐酸肾上腺素 对血红蛋白催化过氧化氢氧化酸性铬蓝K的体系有强烈抑制作用 2 2测定条件的优化 二级标题宋体小四号加粗 1 5倍行距 顶格 2 2 1酸度条件的影响 三级标题仿宋体小四号 1 5倍行距 顶 格 溶液酸度对酶促反应有很大的影响 所以NH3 NH4Cl缓冲溶液的pH要严格控制 按实验方法实验了不同pH的缓冲溶液 pH在9 1到11 0之间 时溶液 的吸光度 结果发现随着pH的升高 盐酸肾上腺素对体系的抑制作 用逐渐减小 如图2所示 其中pH 9 1与pH 9 5时加入牛血红蛋白溶液褪色不明显 不利于对 体系的测定 pH 9 8时褪色明显且盐酸肾上腺素对体系的抑制作用 较大 体系基本恒定 实验中选择pH 9 8的NH3 NH4Cl缓冲溶液作为反应介质 2 2 2显色剂浓度的影响 三级标题仿宋体小四号 1 5倍行距 顶 格 显色剂浓度的大小对体系有着较大的影响 本实验的显色剂为 酸性铬蓝K 按实验方法仅改变酸性铬蓝K的用量 研究其浓度对测 定的影响 结果发现随酸性铬蓝K4505005506006507000 000 050 10 0 150 200 250 300 350 40321A nm图1体系的吸收光谱 宋体五 号不加粗 居中 1 空白pH 9 8的NH3 NH4Cl 2 0 10 5mol L酸性铬蓝K 1 0 10 4mol LH2O22 空白 1 8 10 6mol L血红蛋白3 空白 9 0 10 6mol L盐酸肾上腺素 1 8 10 6mol L血红蛋白浓度的增加 I 先增大再减小 在酸性铬蓝K的浓度 为2 0 10 5mo L时I 达最大值 如图3所示 因此 实验选择显色剂的浓度为2 0 10 5mol L 9 09 510 010 511 0020406080100120I pH图2酸度的影响2 0mLNH3 NH4Cl 2 0 10 5mol L酸性铬蓝K 1 0 10 4mol LH2O2 9 0 10 6mol L盐酸肾上腺素 1 8 10 6mol L血红蛋白2 2 3H2O2浓度的影响 三级标题仿宋体小四号 1 5倍行距 顶格 H2O2在体系中是氧化剂 其浓度直接影响到试剂溶 液的褪色效果 浓度过大过小都会对实验测定产生不利影响 按实验方法加入不同浓度的H2O2溶液 发现其浓度为6 0 10 5 7 0 10 5mol L时显色剂褪色效果显著 I 出现最大值且基本恒定 实验选择H2O2溶液的浓度为7 0 10 5mol L 2 2 4血红蛋白浓度的影响 三级标题仿宋体小四号 1 5倍行距 顶格 1 01 52 02 53 0666870727476788082I C 10 5mol L 图3显色剂浓度的影响 宋体五号不加粗 居中 pH 9 8的N H3 NH4Cl 酸性铬蓝K 1 0 10 4mol LH2O2 9 0 10 6mol L盐酸肾上腺素 1 8 10 6mol L血红蛋白Hb在体系中为酶催化剂 它使过氧化氢氧化酸性铬 蓝K的体系活化 加速显色剂褪色 按实验方法加入不同浓度的血红蛋白 如图4所示 随Hb浓度的增加 盐酸肾上腺素对体系的抑制作用先增大再逐渐减小 在其浓度为1 0 10 6mol L时抑制率达最大且基本恒定 实验选择Hb的浓度为1 0 10 6mol L 2 3分析方法特性 二级标题宋体小四号加粗 1 5倍行距 顶格 在确定的最佳实验条件下制作标准曲线 盐酸肾上腺素的浓度 C 在4 5 10 7 1 4 10 5mol L范围内对该体系的抑制率 I 有较好的线性关系 其线性回归方程为5 0 09990 0160 0 62890 0273 10cI 0 9943 9 r n r为线性相关系数 n为实验次数 方法检出限 经3S b K经验公式计算为5 2 10 8mol L 其中S b为空白的标准偏差 K为线性矫正斜率 对浓度为9 0 10 6mol L的盐酸肾上腺素进行11次平行测定相对标准偏差为3 5 表 明该方法具有较好的重现性和精密度 将本法与其它测定方法进行比较 见表1 可见本法具有较高的灵 敏度 0 20 40 60 81 01 21 41 6707580859095100I C 10 6mol L 图4Hb浓度的影响 宋体五号不加粗 居中 pH 9 8的NH3 NH4Cl 2 0 10 5mol L酸性铬蓝K 1 0 10 4mol lLH2O2 9 0 10 6mol L盐酸肾上腺素 1 8 10 6mol L血红蛋白表1肾上腺素不同测定方法的比较 宋体五号不加粗 居中 测定方法检出限C mol L 线性范围C mol L 文献流 动注射 荧光分法1 10 62 7 10 6 5 4 10 5 11 离子色谱荧光检测法1 6 10 71 6 10 7 1 0 10 5 17 流注射分光光度法检测3 7 10 62 7 10 5 3 7 10 4 18 高效液相色谱法4 5 10 99 0 10 9 4 5 10 6 19 电化学分析法3 6 10 85 0 10 7 1 0 10 4 20 毛细管电泳法5 0 10 81 0 10 7 1 0 10 5 12 化学发光分析法7 0 10 92 0 10 8 1 0 10 5 14 酶催化动力学光度法5 22 10 84 5 10 7 1 35 10 5本法2 4共存物质影响 二级标题宋体小四号加粗 1 5倍行距 顶 格 实验考察了多种离子和物质对9 0 10 6mol L的盐酸肾上腺素测定的影响 在相对误差不大于 5 的条件 时 如表2所示大多数离子和物质对体系不干扰 只有少数离子存在 一定程度的干扰 如Cu2 Mg2 等 可以用EDTA作掩蔽剂 以消除 干扰 表2共存物质的影响 宋体五号不加粗 居中 共存物质及离子允许 倍数Cl K NO3 CO32 抗坏血酸1000Na 800Ca2 600OH 500Cu2 Mg2 12 5样品分析 二级标题宋体小四号加粗 1 5倍行 距 顶格 对盐酸肾上腺素注射液样品进行分析测定 分别将上海 禾丰制药有限公司 生产批号为070901 及天津金耀氨基酸公司 生产批号为0706071 生产的盐酸肾上腺素注射液用水稀释10倍后按 实验方法进行测定 同时进行加标回收实验 结果见表3 从表中看出 回收率为96 7 102 3 表3样品分析结果 n 5 宋体五号不加粗 居中 样品加标量 10 6mol L 测定值 10 6mol L RSD 回收率 01 053 61 0709010 901 923 8196 72 703 803 91101 900 900 11 07060711 352 291 81102 33 604 412 3297 23结论 一级标题宋体 四号加粗 1 5倍行距 顶格 本实验通过研究肾上腺素对体系的抑 程度来实现对肾上腺素含量的测定 建立了测定肾上腺素的高灵敏 度分析方法 在波长为546nm处对体系反应条件进行优化 体系实验的最佳条件酸 度为pH 9 8 显色剂的浓度为2 0 10 5mol L H2O2的浓度为7 0 10 5mol L 血红蛋白的浓度为1 0 10 6mol L 经过实验大部分离子或物质对此体系不产生干扰或干扰很小 结果 令人满意 此方法可用于药物中肾上腺素含量的测定 此法将会是又一快捷 方便测定肾上腺素的方法 参考文献 宋体四号加粗居中 具体参考文献是中文楷体五号字 不加粗 英文Times NewRoman五号不加粗 调整好单词位置后分散对齐 行距1 5倍 标点符号为英文半角加空 格 1 编号应为插入项目符号 参考文献数目不少于20篇 其中外文文 献数目不少于5篇 1 Burtis CA Ashwood ER Tietz textbookof clinicalchemistry M Philadelphia W BSaunders 1998 1570 1572 2 刘诚 黄俊 肖海燕 肾上腺素的检测进展 J 传感器与微系 统 xx 25 11 1 4 3 沈同 王镜岩 赵邦梯 等 生物化学 上册 第二版 M 北京 高 等教育出版社 1990 426 4 Deftereos TN Calokerinos AC Efstathiou CE Flow injectionchemiluminometric de terminationofepinephrine norepinephrine dopamine andL dopa J Analyst 1993 118 627 632 5 Goodman LS Gilman A The pharmacologicalbasis oftherapeutics ninthed M New York McGraw Hill 1996 105 120 6 中国药典委员会 中国药典 二部 1990 2981 7 陈福南 张 迎雪 章竹君 等 高效液相色谱化学发光检测人体血清及尿样中的盐 酸肾上腺素 J 分析化学 xx 30 11 56 59 8 童裳伦 朱岩 郭丹 等 离子色谱荧光检测法测定AD和多巴胺 J 分析化学 xx 29 10 1237 1239 9 代璞 陈钢 张晓 等 肾上腺素和去甲肾上腺素的一种荧光 测定法 J 华中师范大学学报 自然科学版 1996 30 1 199 202 10 张桂玲 蔺存国 杨景和 等 双波长标准加入荧光法同时测 定肾上腺素和去甲肾上腺素 J 青岛海洋大学学报 自然科学版 20 00 25 1 131 136 11 Palop SG Romero AM Calatayud JM Oxidation of adrenaline andnoradrenaline bysolved molecularoxygen ina FIAassembly J Journal ofPharmaceutical andBiomedical Analysis xx 27 1017 1025 12 Zhou TS Qin H Hui Y et al Separation anddeterminationof agonists inserum bycapillary zoneelectrophoresis withamper
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