气相色谱法测定食用酒中乙醇含量.ppt

实验一气相色谱法测定食用酒中乙醇含量 一实验目的1 了解气相色谱仪的基本结构 2 学习和掌握使用氢火焰离子化检测器的基本操作 3 掌握以内标法进行色谱定量分析的方法及特点 4 学习气相色谱法测定乙醇含量的分析方法 二 实验原理气相色谱法是一种高效 快速而灵敏的分离分析技术 当液体样品由进样口注入后立即被汽化 并被载气带入色谱柱 经过多次分配而得以分离的各个组分逐一流出色谱柱进入检测器 随时间变化而产生的电信号由记录仪得到气相色谱图 对气相色谱图进行数学分析 即可对样品进行定性定量分析 三 仪器与试剂1 仪器 气相色谱仪 氢火焰检测器 FID 色谱柱 微量注射器 容量瓶 10cm3 色谱工作站 吸量管 2 5cm3 2 试剂 无水乙醇 A R 无水n C3H7OH A R 丙酮 食用酒 四 实验步骤1 色谱操作条件柱温 90 汽化室温度 150 检测器温度 130 N2 载气 流速 40cm3 min H2流速 35cm3 min 空气流速 400cm3 min 2 标准溶液的测定用吸量管准确吸取0 50cm3无水乙醇和0 50cm3无水n C3H7OH于10cm3的容量瓶中 用丙酮定容至刻度 摇匀 用微量注射器吸取0 5 L标准溶液 注入色谱仪内 记录各色谱峰的保留时间tR和色谱峰面积 求出以无水n C3H7OH为标准物的相对校正因子 3 样品溶液的测定用吸管吸取1 00cm3的食用酒样品和0 50cm3的内标物 无水n C3H7OH 于10cm3容量瓶中 用丙酮定容至刻度 摇匀 用微量注射器吸取0 5 L样品溶液 注入色谱仪内 记录各色谱峰的保留时间tR 对照比较标准溶液与样品溶液的tR 以确定样品中的醇 记录C2H5OH和n C3H7OH色谱峰面积 求出样品中C2H5OH的含量 实验二气相色谱法测定生物柴油中脂肪酸甲酯 一 实验目的1 了解气相色谱仪的基本构造与一般使用方法2 掌握气相色谱检测器的原理和操作 3 了解程序升温色谱法的操作特点 4 学会用气相色谱仪进行归一化法定量分析 二 实验原理程序升温是指色谱柱的温度按照适宜的程序连续地随时间呈线性或非线性升高 在程序升温中 采用较低的初始温度 使低沸点的组分得到良好分离 然后随着温度不断升高 沸点较高的组分逐一 推出 由于高沸点组分较快地流出 因而峰形尖锐 与低沸点组分类似 在一定的色谱操作条件下 每种物质有一定的保留时间 而响应值与进样量成线性关系 当样品中所有组分都能流出色谱柱 并能给出可以测定的信号时 可以采用采用归一化法进行定量分析 归一化法只适用于样品中所有组分都从色谱柱流出并被检测器检出 且都在线性范围内 同时又能测定或查出所有组分相对校正因子的样品 三 仪器与试剂1 仪器 6890型气相色谱仪 色谱柱 HP innowax毛细管色谱柱 30 0 25 0 25 氢火焰离子化检测器 微量注射器 2 试剂 生物柴油 正己烷 四 实验步骤1 色谱操作条件 汽化室温度280 检测器温度280 柱温采用程序升温 初始温度170 保持0 5min 以5 min的升温速率升至200 然后以15 min的升温速率升至240 保持时间5min 载气 N2 柱头压60kPa 氢气 32mL min 空气 320mL min 进样量 1 L 2 取一定量的生物柴油样品于1mL的容量瓶中 用正己烷定容后 在上述色谱条件下进行气相色谱分析 记录下各色谱峰的保留时间和峰面积 根据公式 1 计算各脂肪酸甲酯的百分含量 实验三高效液相色谱法测定萘 一 实验目的认识高效液相色谱仪 掌握高效液相色谱仪的基本操作 2 掌握高效液相色谱法进行定性和定量分析的原理 3 掌握外标法进行定量分析的方法 二 实验原理在一定的色谱操作条件下 每种物质有一定的保留时间 而响应值与进样量成线性关系 外标法也叫标准曲线法 三 仪器与试剂仪器 ShimadzuLC 10ATvp高效液相色谱仪 紫外吸收检测器 254mm C18柱 25cm 4 6mm 微量注射器 超声波清洗器1台 溶剂过滤器1套 2 试剂 甲醇 色谱纯 二次蒸馏水 萘 AR级 四 实验步骤1 色谱操作条件 色谱柱 C18柱 流动相 甲醇 水 80 20流速 1mL min检测波长 254nm柱温 40 进样量 20 L 2 标准溶液配制 3 样品溶液的配制 4 进样并记录色谱图 五 数据处理与分析 实验四内标法测定联苯 一 实验目的进一步熟悉高效液相色谱仪的基本构造与一般使用方法 2 理解内标法的测定原理和优点 3 初步学会设计色谱法进行样品测定的实验步骤 并以萘为内标物测定样品中联苯的含量 二 实验原理在一定的色谱操作条件下 每种物质有一定的保留时间 而响应值与进样量成线性关系 内标法也叫内标标准曲线法 三 仪器与试剂仪器 ShimadzuLC 10ATvp高效液相色谱仪 紫外吸收检测器 254mm C18柱 25cm 4 6mm 微量注射器 超声波清洗器1台 溶剂过滤器1套 2 试剂 甲醇 色谱纯 二次蒸馏水 萘 联苯 AR级 四 实验步骤1 色谱操作条件 色谱柱 C18柱 流动相 甲醇 水 90 10流速 1mL min检测波长 254nm柱温 40 进样量 20 L 2 标准溶液配制 3 样品溶液的配制 4 进样并记录色谱图 五 数据处理与分析 实验五常见阴离子色谱分析 一 实验目的了解离子色谱仪的基本构造与一般使用方法 2 能用于测定样品中常见阴离子的含量 二 实验原理离子色谱法是以为离子交换树脂为固定相 电解质溶液为流动相的液相色谱方法 常以电导检测器作为通用的检测器 常见阴离子经过阴离子柱分离后 利用保留时间进行定性分析 利用峰面积进行定量分析 三 仪器与试剂仪器 ICS 90型离子色谱仪 电导检测器 阴离子分析系统 微量注射器 2 试剂 Na2SO4 NaNO3 NaCl 均为分析纯 9mmol LNa2CO3溶液 四 实验步骤1 色谱操作条件的设置 2 标准溶液配制 3 样品溶液的配制 4 进样并记录色谱图 五 数据处理与分析 实验六分子荧光光谱分析法测定维生素B2 一 实验目的了解荧光光谱分析基本原理 2 掌握荧光法的定量分析方法 3 了解日立F 2500型荧光分光光度计的构造及其使用方法 二 实验原理维生素B2 核黄素 在一定波长的激发光照射下会发射出绿色荧光 根据荧光强度在一定浓度范围内与荧光物质浓度成正比 用标准曲线法对样品进行定量分析 三 仪器与试剂仪器 日立F 2500型荧光分光光度计 液体样品架 50mL容量瓶8个 100mL烧杯2个 洗瓶一个 玻璃棒二根 蒸馏水 2 试剂 1 的醋酸溶液 维生素B2标准溶液 称出10 0mg维生素B2先溶于少量的1 的醋酸溶液 然后转移到1000mL容量瓶中 用1 的醋酸溶液定容至刻度 摇匀 至阴暗处保存 此液含维生素B210 0 g mL 四 实验步骤1 按照日立F 2500型荧光分光光度计的使用方法开好仪器 2 配制系列标准溶液 取5个50mL容量瓶 分别加入1 00 2 00 3 00 4 00 5 00mL浓度为10 0 g mL的标准溶液 用水稀释至刻度 摇匀 3 标准曲线的绘制把各标准样品置于试样架内 设置好仪器的工作条件 用蒸馏水做空白 分别扫描空白和标样的荧光光谱 根据峰高和浓度绘制标准曲线 4 未知试样的测定准确称出一定量的未知试样于小烧杯中 用水溶解并定容至100mL容量瓶内 摇匀 用测定标准曲线相同的条件 测其荧光强度 五 数据处理与分析 根据试液的荧光强度 从标准曲线上查出试液中维生素B2的浓度 按下列公式计算维生素B2的含量 维生素B2的含量 C 100 G g g C 试液中维生素B2的浓度 从标准曲线上查出 单位是 g mL C 未知试样的重量 单位是克 g 100 试样被稀释的体积 实验七紫外吸收光谱法测定苯甲酸 一 实验目的了解紫外吸收光谱仪的基本构造与一般使用方法 2 能用于测定样品中苯甲酸的含量 二 实验原理苯甲酸在225nm处有最大吸收峰 其吸光度与浓度的关系服从朗伯 比尔定律 三 仪器与试剂仪器 UV1600紫外分光光度计 10mL容量瓶7个 20mL 5mL吸量管各1支 2 试剂 0 1mol L 1NaOH溶液 苯甲酸钠 AR 蒸馏水 四 实验步骤1 苯甲酸钠贮备液的配制 称量经过干燥的苯甲酸钠适量于1000mL容量瓶中 用水溶解 并定容 2 苯甲酸钠工作溶液的配制 取20 00mL贮备液稀释定容至1000mL 3 苯甲酸钠系列标准溶液的配制 分别取苯甲酸钠工作溶液0 5 00mL按下表配制 五 数据处理与分析 1 标准曲线的绘制 以苯甲酸钠系列标准溶液的吸光度为纵坐标 相应的浓度为横坐标 绘制作A C标准曲线 2 样品溶液中苯甲酸钠含量计算 从A C标准曲线上查出X值 从而求出样品中苯甲酸的含量 实验八双波长法同时测定维生素C和E 一 实验目的进一步熟悉紫外吸收光谱仪的基本构造 掌握其一般使用方法 2 能用双波长法同时测定双组分的含量 二 实验原理吸光度具有加合性 根据两组分吸收曲线的性质 选择两个合适的测定波长 通过解联立方程的可以同时测出样品中双组分的含量 三 仪器与试剂仪器 UV1600紫外分光光度计 50mL容量瓶10个 20mL 5mL吸量管各2支 2 试剂 维生素C 维生素E 无水乙醇 四 实验步骤1 维生素C和维生素E标准溶液的配制 2 维生素C和维生素E紫外吸收曲线的绘制 确定测定波长 3 维生素C和维生素E标准曲线的绘制 4 未知试样的测定 五 数据处理与分析 1 维生素C吸收曲线的绘制 2 维生素E吸收曲线的绘制 3 根据吸收曲线测定波长的选定 4 维生素C标准曲线的绘制 5 维生素E标准曲线的绘制 6 样品溶液中维生素C和E含量计算 实验九原子吸收光谱法测定井水 河水中镁 一 实验目的 学会原子吸收光谱法测定金属元素的原理与方法 了解原子吸收分光光度计的基本构造 初步熟悉其操作方法 掌握火焰法测镁的条件选择 二 实验原理将样品试液吸入空气 乙炔火焰中 在火焰的高温下 镁化合物离解为镁基态原子 基态原子蒸气对镁空心阴极灯发射的特征谱线产生吸收 将测得的试样溶液的吸光度扣除试剂空白的吸光度 利用标准曲线法 确定试液中的镁含量 三 仪器与试剂 仪器 TAS 986型 GGX 型原子吸收分光光度计 试剂 10 g mlMg标准液 四 实验步骤 配制Mg标准系列取10 g mlMg标准液0 50 1 00 0 50 2 00 2 50ml 分别置于5个50ml容量瓶中 用蒸馏水稀释至刻度摇匀 得Mg标准系列 样品 井水直接取4 00ml稀释至100ml 河水过滤后取10ml 稀释至100ml 仪器检测条件 按照上述条件 根据仪器操作步骤依次从低到高浓度测定标液和样液 五 数据处理采用标准曲线法处理 样品稀释倍数 附一TAS 986原子吸收分光光度计火焰法操作规程 正确连接仪器及计算机各连线和插头 确认仪器电源开关处于 关 位 再开启稳压器电源 顺序打开打印机 显示器 计算机电源开关 等待计算机处于 Windows 界面 装上待测元素空心阴极灯 并记下灯位 打开TAS 986主机电源开关 双击 AAwin 软件图标 联机 确定 仪器自动进入自检 自检完成后 设定和选择工作灯和预热灯 下一步 修改或输入正确的灯电流 分光带宽 燃气流量 燃烧器高度和位置 下一步 寻峰 下一步 完成 在任务栏击 仪器 选择 燃烧器参数 调节火焰原子化器的前后 上下及角度位置 其对准光路 击 仪器 选择 扣背景方式 选择 氘灯 或 自吸 扣背景 并输入适当的氘灯电流或窄脉冲电流 在能量窗口再进行调节和能量自动平衡 若不进行背景校正 本步可省去 击 参数 按钮 在常规界面输入 测量重复次数 采样间隔 及 采样延时参数 在显示界面输入 吸光度显示范围 及 页面更新时间 在数据处理界面选择 计算方式 输入 积分时间 滤波系数 确定 击 样品 按钮 选择 校正方法 曲线方程 浓度单位 下一步 选择 标准系列样品个数 输入 标准系列样品浓度值 下一步 选择 未知样品个数 完成 顺序打开空压机 风机开关 工作开关 待压力稳定后 检查并调节出口压力为0 25 0 3Mpa之间 推荐压力0 25Mpa 10 打开乙炔钢瓶总阀 检查并调节出口压力为0 05 0 09Mpa之间 推荐压力0 06Mpa 11 击 点火 按钮点火 吸喷蒸馏水1 2分钟 吸喷标准系列空白溶液击 校零 按钮自动调零 12 击 测量 按钮 顺序吸喷标准系列溶液并在测量窗口击 开始 按钮测量标准溶液 作校准曲线 13 吸喷未知样品溶液 击 开始 按钮测量未知样品 全部未知样品测量完毕后击 终止 按钮退出测量 吸喷蒸馏水1 2分钟清洗燃烧器 14 击 应用 按钮 选择 实验记录 输入 测量元素 样品名称 分析员 记录 确定 15 在测量表格上击右键 选择 表格设置 选择所需显示和打印的项目 在任务栏击 打印 按钮 选择所需打印的内容 击 确定 打印相应内容 16 关闭乙炔钢瓶总阀 烧去管路中余气 待火焰熄灭后按空压机 放水阀 放水 关闭空压机 工作开关 1 2分钟后关闭 风机开关 17 退出AAWin操作软件 关闭TAS 986主机电源 关闭打印机 计算机 稳压器电源 18 整理实验室卫生 检查实验室水 气 电安全 附二GGX 型原子吸收分光光度计操作规程 1 开机前准备 将主机各操作钮置于适当位置 安装空心阴极灯 2 开机 依次开稳压器 总电源 调灯电流后预热15 20分钟 选择分析线及狭缝宽度后 调灯及燃烧器的位置 调负高压 用 状态检查 工作选择 检查负高压与 15V电源是否正常 3 点火 关紧主机上各气体调节针阀 将 空气 笑气 钮旋至 空气 开排废气装置 开空压机 调空气输入压为2 3kg cm 2 打开助燃气针阀 开大至限压开关被启动后 调助燃气流量 依次打开乙炔钢瓶总阀 分阀 调节乙炔输出压力0 8kg cm 2 调燃气流量后点火 4 测定依次从低到高浓度测定标液和样液 最佳条件选择方法见说明书