色谱柱的充填和安装ppt课件.ppt

色谱柱的充填和安装 主讲 总目录 复习 色谱柱 不锈钢填充色谱柱 玻璃填充色谱柱 无机吸附剂 高分子多孔小球 化学键合固定相 不常用 1 国产型号 GDX系列 2 美国 ParapakQ ParapakN ParapakT chromosorb等 1 活性炭 2 石墨化炭黑 3 碳素 TDX 0X系列4 硅胶 5 氧化铝 6 分子筛 4A 5A 13X 气固色谱填充柱固定相的种类 想一想 固定相的作用是什么 技术要求是什么 颗粒大小有什么要求 1 增加与样品接触的表面积 2 细小 均匀 多孔 3 标准大小颗粒 60 140目 常用的是60 80目和80 100目 复习 色谱柱 复习 色谱柱 想一想 填充柱和毛细管柱的内经和长度一般是多少 填充柱 长度 2 3米 内经 2 4mm 毛细管柱 长度 10 100米 内经 0 1 0 8mm 常见的商品柱是0 18 0 25 0 32 0 53mm 常用的是后两种 问题 色谱柱失效后的主要表现及失效原因 填充色谱柱的主要填充方法是什么 新装填的色谱柱的老化方法及老化目的 一 填充柱的填充方法 Why 失效后的主要表现 色谱峰不好和组分显著变短 2 对气液色谱来说 是使用过程中 1 色谱柱失效后的主要表现和失效原因 分离 保留时间 失效的主要原因 1 对气固色谱来说是 固定相的活性或吸附性能降低了 固定液逐渐流失所致 方法与步骤 主要填充方法 泵抽填充法 操作步骤 1 把色谱柱的一端塞上玻璃棉 接真空泵 2 另一端接一漏斗 3 在抽吸下加入固定相 边装边敲打色谱柱 至固定相不再进入为止装好后 塞上玻璃棉 2 填充色谱柱的主要填充方法 特别强调 装柱要求要填充得均匀 紧密 切忌有空隙 固定相填充的好坏 将直接影响柱效率 3 色谱柱的老化及目的 老化目的 是把固定相的残存溶剂 低沸点杂质 低分子量固定液等赶走 使记录器基线平直 并在老化温度下使固定液在担体表面有一个再分布过程 从而涂得更加均匀牢固 老化步骤 将色谱柱连接于色谱仪器上后 应先试压 试漏 而后在比正常分析温度高50 左右 比固定相最高使用温度低 而且温度恒定的情况下用载气吹洗数小时后可承受分析 一般称此为色谱柱子的老化过程 主要讲填充柱的老化 特别强调 装填好的色谱柱 经过老化一段时间后 柱效及性能均稳定了 这样才可使用 二 岛津GC 2014填充柱的安装方法 安装前的准备工作 1 准备工作 手套 转换头 隔垫 螺母 玻璃衬管 柱子 扳手等工具 2 关闭色谱电源 1 不锈钢填充柱的安装 1 在INJ边的不锈钢柱适配器插上玻璃衬管 2 安装INJ边的不锈钢柱至连接口 1 将INJ边带有玻璃衬管的不锈钢柱插入样品入口 从柱箱一边 2 用手拧紧柱适配器螺母 3 转动玻璃衬管扳手 拧紧至一半 固定螺母 3 安装DET边柱适配器至检测器 注意1 有两种可以安装在检测器上的不锈钢柱适配器 用于TCD和其它检测器 4 固定检测器边的适配器用手拧紧柱适配器螺母 用扳手拧紧一半 小心 检查螺母类型 如果适配器用仅用于玻璃柱的螺母固定时螺母会失灵 5 安装不锈钢柱至适配器 在不锈钢柱和适配器间加上垫圈 共2个接口 注意1 当使用橡皮垫圈时 放上一片后手动上紧垫圈顶部的GM型螺母 注意2 当使用铝制柱垫圈时 放上2至3片后手动上紧垫圈顶部的GM型螺母 6 固定不锈钢柱使用扳手拧紧后固定不锈钢柱和适配器之间的连接口 共2个连接口 1 在玻璃柱上套上盖螺母在柱末端放上连接部件 顺序为 盖螺母 垫圈 后部的环和硅O型圈 放置后部环边缘朝向硅O型圈 2 在柱箱中安装玻璃填充柱 注意1 如果分析小于250 使用硅橡胶O型环 在柱末端放上连接部件 顺序为 盖螺母 垫圈 后部的环和石墨压环 放置后部环边缘朝向石墨压环 在柱末端放上连接部件 顺序为 盖螺母 垫圈 套管和用于TCD的石墨压环 末端可以选择两种 硅O型环和石墨压件 部件 根据分析温度而定 注意2 如果分析超过250 使用石墨压环 注意3 如果TCD检测器 放置TCD石墨压环 在检测器末端放置套管 因为套管可以起到后部环的作用 所以不需要配制此环 通过 玻璃衬管 法连接在玻璃衬管法中 在样品入口插入玻璃衬管 1 从柱箱边将玻璃衬管一半插入样品入口 2 在柱入口末端插入玻璃衬管 较短的一端 2 在柱箱中安装玻璃柱 3 将玻璃柱两端插入安装口 样品入口 检测器口 用手拧紧盖螺母 4 用扳手在入口 检测器口固定盖螺母 注意 如果放置了硅橡胶O型环 较松的固定盖螺母 如果放置了石墨压环 拧紧一半又1 3圈 通过 柱方法 法连接 在此方法中 不插入玻璃衬管 此方法中 直接将样品注射入柱会污染柱 因此 此方法只适用于不易污染柱的气体分析 当使用TCD时将TCD柱连接部件放在较短的柱末端 1 将较长的玻璃柱的末端插入安装口 样品入口 2 将玻璃柱每一端插入各自的安装口 入口 检测器口 用手拧紧螺母 3 用扳手固定入口 检测器口的盖螺母 注意 如果放置了硅O型环 较松的固定盖螺母 如果放置了石墨压环 拧紧一半又1 3圈 当使用TCD检测器时 柱安装位置与使用其它检测器的位置不同 柱安装位置 3 毛细管柱的安装 安装前准备 石墨压环 柱螺母 色谱柱切割工具 手套 扳手 进样口 检测器量具 压环夹具 安装毛细管柱所需工具 常用工具 特别强调 对于不同的进样口和不同的检测器 毛细管柱的插入长度是不同的 而且 要求插入的深度要准确 因此应配备不同类型的量具 夹具 以保证色谱柱插入深度准确无误 如 S型用于SPL进样口 F型用于FID FTD检测器 T型用于TCD检测器 气体管路的连接 无尾吹气管路的连接方法 注意 有尾吹气和无尾吹气的气体管路连接方法各有不同 气体管路的连接 有尾吹管气路的连接的连接方法 1 抽出石墨压环的换芯 将色谱柱穿过压环 2 将色谱柱穿过压环安装量具 夹具 并在关口伸出约10mm的长度 将螺母拧紧 使石墨环紧紧的卡在色谱柱上 石墨压环的安装 注意 用手拧紧后 再用扳手拧3 4圈 3 用毛细管柱切割刀将压环安装夹具中伸出部分毛细管切除 问题 为什么要将夹具中伸出部分截掉 答案 在色谱柱穿过石墨压环孔心时 柱口可能进入一些石墨粉 切口很好 切口要求 毛细管柱的切口应平滑 不能粗糙 切口不符合要求 毛细管切口合格的标准 只要把伸出部分毛细管切掉就行了 这样的说法对吗 错 毛细管柱的切口是有要求的 所用工具 镊子 操作时一定要小心 切勿损坏毛细管 特别强调 必须除去残留在色谱柱上的石墨 否则可能堵塞适配器 毛细管柱上多余石墨的处理 柱子上多余的石墨 取下柱子上多余的石墨后 进样口侧螺母 FID 2014型 检测器侧柱插入长度99mm FPD 2014型 检测器侧柱插入长度120mm 石墨压环的位置 注意 毛细管内经不同 应选不同内经的石墨环 比如 毛细管柱内经为0 32和0 53