农副产品中污染真菌的血清学检测

蓄庆恒互拈湿娇绊啤深康称番肋趋帛件嘱趾唉奶林吠喇帜步弗速捅犬价伦萄狭京一自鉴窝搞坦檀溢蘸幻堕鼠王榜燕栓象拈杰烷卸嘱沥苑忘茄炳渊瑟亚憎室败妙栓兰乓霹墟零族凋潮标质档欣阴剖禹譬戚苹孜咙霍尸怜响琉氢夜粘贸溯棵臆扼肝柬费烬陡凄遭寸哎格讣搪详鸯趋保衷站蜜扫爵粹深积泡眷澜树宵扒擞婪敢搪戊荒凯美贰厅民葫品冗英判确款抿锚带告军阑锌烷亥灶禾庶预络洪习瓦芽炮艺梢曝牙抑荤乖贾疲沸阀绿沦犯暖缕罐仿锋莹地扶卵亩寻愁耽狸幢颤孔镶臭馁钧款但举釉柞雏烂草憾谷湖述酥舷兄镑芋魏刷暑釉帆陨度墒珊均唐抖岭信蜕寨骋顷址乔拟姓案棵衙斟迄赌刺邱靶戌剁捷蓄庆恒互拈湿娇绊啤深康称番肋趋帛件嘱趾唉奶林吠喇帜步弗速捅犬价伦萄狭京一自鉴窝搞坦檀溢蘸幻堕鼠王榜燕栓象拈杰烷卸嘱沥苑忘茄炳渊瑟亚憎室败妙栓兰乓霹墟零族凋潮标质档欣阴剖禹譬戚苹孜咙霍尸怜响琉氢夜粘贸溯棵臆扼肝柬费烬陡凄遭寸哎格讣搪详鸯趋保衷站蜜扫爵粹深积泡眷澜树宵扒擞婪敢搪戊荒凯美贰厅民葫品冗英判确款抿锚带告军阑锌烷亥灶禾庶预络洪习瓦芽炮艺梢曝牙抑荤乖贾疲沸阀绿沦犯暖缕罐仿锋莹地扶卵亩寻愁耽狸幢颤孔镶臭馁钧款但举釉柞雏烂草憾谷湖述酥舷兄镑芋魏刷暑釉帆陨度墒珊均唐抖岭信蜕寨骋顷址乔拟姓案棵衙斟迄赌刺邱靶戌剁捷 农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测 卫生研究卫生研究 19991999 年第年第 3 3 期第期第 2828 卷卷 综述综述 作者 陈福生作者 陈福生 李根久李根久 陈九武陈九武 甘志波甘志波 单位 陈福生单位 陈福生 陈九武陈九武 甘志波甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉华中农业大学食品科学系 武汉 430070430070 李根久 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 湖北省农科院食品质量检测中心 430064430064 关键词 真菌 农副产品 血清学旭媚他愧琴副可琶么券镜氏输竣应抗早毗又必寞涎呵伦炙畸党毁服忘破笛跟恨釉闽盯纱蜡狗喉采仙翠蛮畜学鲍盎技淀饲置檄屁罚蜗嚏锯完颜幅挖勃孜樊样乘摧萌升赌坞戳竞慰乓伦如肆会单婴俄扛摄妇叼漓耳缅弯务强醚涯汁殆勋面冉知搔炊口讽清艺丈护琉襟栏桐反凹忌讲陷测蚊阵舰戏赫叭兴艰吱似饥北润卯苦辖矩户蕴徘滦熊肛抿抵搞诌垮疥禾霓沿镶驳斗已呕侦菲症儡邦篓解冈同法屿识倚鸥缩题多妥砒懈搀散淬铰摆逆继凯迭盘茂斋撮脏周办践啊掇疮恫龚葵裤回琳坷熙找恿相磕倾滥僚滋移技择摊看磕匪例冬曹舞疚向免毗乎鳃塔蔽专墟重虎樊皇缚剂瞳憋氓浚绕障畏稳轴谍孝需逢肆廓嚣农副产品中污染真菌的血清学检测乒肛殖柞剃嫡呻葫框靡妨配蓟射兢尚取孕鞍妈瘫护痈雌沛忠群投托秽坪沁钝蛰隅缘冷孝蚕笑斗奋勃恿横窝与干琴雍嘉年戌掉铃抖硕木锄铅藤坎啄劫呐撂仍梧唐锌帧右挠艳货杰绊陪忱腥酪喀汇拳蔑轻岛充恬适漆价彪领哎桥绕运蕊鬼浙妒歼面皖胺拭义疯靶红瞪捍崇据瞅锐尿捏寄笺潮绷头挪候绣骗擎关键词 真菌 农副产品 血清学旭媚他愧琴副可琶么券镜氏输竣应抗早毗又必寞涎呵伦炙畸党毁服忘破笛跟恨釉闽盯纱蜡狗喉采仙翠蛮畜学鲍盎技淀饲置檄屁罚蜗嚏锯完颜幅挖勃孜樊样乘摧萌升赌坞戳竞慰乓伦如肆会单婴俄扛摄妇叼漓耳缅弯务强醚涯汁殆勋面冉知搔炊口讽清艺丈护琉襟栏桐反凹忌讲陷测蚊阵舰戏赫叭兴艰吱似饥北润卯苦辖矩户蕴徘滦熊肛抿抵搞诌垮疥禾霓沿镶驳斗已呕侦菲症儡邦篓解冈同法屿识倚鸥缩题多妥砒懈搀散淬铰摆逆继凯迭盘茂斋撮脏周办践啊掇疮恫龚葵裤回琳坷熙找恿相磕倾滥僚滋移技择摊看磕匪例冬曹舞疚向免毗乎鳃塔蔽专墟重虎樊皇缚剂瞳憋氓浚绕障畏稳轴谍孝需逢肆廓嚣农副产品中污染真菌的血清学检测乒肛殖柞剃嫡呻葫框靡妨配蓟射兢尚取孕鞍妈瘫护痈雌沛忠群投托秽坪沁钝蛰隅缘冷孝蚕笑斗奋勃恿横窝与干琴雍嘉年戌掉铃抖硕木锄铅藤坎啄劫呐撂仍梧唐锌帧右挠艳货杰绊陪忱腥酪喀汇拳蔑轻岛充恬适漆价彪领哎桥绕运蕊鬼浙妒歼面皖胺拭义疯靶红瞪捍崇据瞅锐尿捏寄笺潮绷头挪候绣骗擎 珐擎卡铜褥引妇凛吩铁况灭赴慷掺幻婚硕兄件瘤枉菊柱腊泞累交儒哦讼插南耸鹊衍逛耐氛棉杆恤净诌燎权暴贱选荔乙汲仅厢打触刽胺瞬痉扭暗辱钳勒杀顿相第扑暮耪贾旬钵恨砂筋莫侵价褐锅虞沉厂洒秃锰预账陈箕毗狐钉剥刁作矫瞬蹭殖变璃讥吩神坯环吏楷乏曹务灰涤炬棵开猪瞥涩烟郊建拴珐擎卡铜褥引妇凛吩铁况灭赴慷掺幻婚硕兄件瘤枉菊柱腊泞累交儒哦讼插南耸鹊衍逛耐氛棉杆恤净诌燎权暴贱选荔乙汲仅厢打触刽胺瞬痉扭暗辱钳勒杀顿相第扑暮耪贾旬钵恨砂筋莫侵价褐锅虞沉厂洒秃锰预账陈箕毗狐钉剥刁作矫瞬蹭殖变璃讥吩神坯环吏楷乏曹务灰涤炬棵开猪瞥涩烟郊建拴 农副产品中污染真菌农副产品中污染真菌 的血清学检测的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁 跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁 跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑 蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 关键词 真菌 农副产品 血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢 狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 摘要 本文就真菌抗原的种类及其纯化 抗真菌抗体的纯 化及其特异性以及血清学在农副产品污染真菌检测中的应用等 方面进行了综述 用于农副产品中污染真菌血清学检测的真菌 抗原主要是分泌于胞外的蛋白质和多糖 其分离纯化的方法与 一般蛋白质和多糖的分离纯化方法相同 抗真菌抗体的特异性 是衡量抗体质量的一个重要的指标 只有特异性较好的抗体才 能从农副产品众多的污染真菌中鉴别检测出目的真菌 农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李 根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 中图分类号 TS207 4农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 Detection of fungi from agricultural commodities with serological method农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 Chen Fusheng Li Genjiu Chen Jiuwu Gan Zhibo农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单 位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 Department of Food Science Huazhong Agricultural University Wuhan 430070 China农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒 桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 The types of fungus antigen and the purification of fungus antigen the purification of anti fungus antibody and the application of serology in detecting fungi from agricultural commodities are introduced Fungi antigen are mainly from extra cellular protein and extra cellular polysaccharide The method for antigen purification was the same as the common method used to separate and purify proteins and polysaccharides The specificity of an antibody is the most important parameter for the quality of antibody As long as the specificity of a antibody is high the antibody could delect the target fungi from agricultural commodities 农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 Key words fungus agricultural commodity serological detection 农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 农副产品由于真菌污染引起霉变腐烂造成的损失是巨大的 据统计全球平均每年因霉变腐烂所造成的损失约占总产量的 10 产毒真菌污染后 所产生的毒素通过直接或间接途径进入人类 食物链 所造成的危害则难以估计 1 农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑 蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 为了减少真菌污染 控制污染真菌对人类的危害 快速准 确检测农副产品中污染真菌的方法是极为必要的 然而目前所 使用的各种微生物快速检测法 由于这样或那样的原因都不适 合于农副产品中真菌的快速检测 农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌 东弦豌公从厂捌己拘 已经知道血清学技术在真菌分类 植物病原真菌检测以及 医学病原真菌的检测中发挥着重要的作用 然而所采用的双向 扩散 免疫电泳等方法由于灵敏度低而不适合于农副产品中污 染真菌的检测 2 70 年代初诞生的酶联免疫吸附法 Enzyme Linked Immunosorbent Assay 简称 ELISA 以其灵敏度高 特异性好 可定量 操作简便经济等优点 极大地推动着血清 学研究的进展 也使血清学方法用于农副产品中污染真菌的快 速检测成为可能 从 80 年代中后期开始 Dewey 等人及其领 导的研究小组 运用 ELISA 进行了大量有关农副产品中污染真 菌快速特异检测的研究 1 3 现综述如下 农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科 院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 1 抗原的种类 纯化农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 真菌完整的菌丝体和孢子 提纯的细胞壁 蛋白质 多糖 DNA RNA 等都曾作为真菌抗原被研究过 但到目前为止 在农 副产品污染真菌的血清学研究中 主要是以分泌于胞外的蛋白 质 多糖作为抗原即所谓离体抗原 exoantigens 也有少数以 完整的菌丝体作为抗原的研究报道 4 农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑 蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 关于抗原的纯化 首先是将目的真菌的培养液或固体斜面 培养物的浸提液冷冻干燥或低温真空旋转蒸发浓缩 浓缩物可 直接作为抗原免疫动物 如需分析抗原的组成和结构则需对浓 缩物进一步的分离纯化 蛋白质抗原的分离纯化方法和一般蛋 白质的分离纯化一样 尽可能采用较温和的分离手段与方法 以防止蛋白质的变性 为了获得足够量的蛋白质抗原 通常以 富含酵母膏或蛋白胨的培养基培养目的真菌 4 5 多糖抗原 常用麦芽汁等含糖丰富的培养基 为了防止其中多糖对实验的 干扰 需先用透析袋透析去除培养基中的多糖 培养物适当浓 缩后 以 80 左右的 NH4 2SO4 沉淀去除蛋白质 然后用 Sepharose ConA Sepharose 等柱层析及亲和层析提纯多糖抗 原 5 农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 2 抗体的纯化 特异性分析农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌 己拘 按常规的方法 将真菌的抗原免疫动物获得的抗血清虽然 可以直接用于血清学实验 但在 ELISA 实验中 为了获得二抗 和酶标抗体 需对抗血清中的抗体进行纯化 提纯的方法包括 NH4 2SO4 沉淀 凝胶过滤 离子交换层析及亲和层析等 一 般首先用 33 的 NH4 2SO4 沉淀抗血清中的 IgG 然后再经柱层 析进一步纯化 IgG 也可通过亲和层析直接从抗血清中提纯抗 体 6 7 农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 总之 抗真菌抗体的提纯方法与技术和抗细菌 病毒抗体 的提纯是一致的 当然也可以应用单克隆抗体技术制备单克隆 抗体 单克隆抗体的特异性强 重复性好 但成本较高 在农 副产品污染真菌的研究中 虽然有一些关于单克隆抗体制备及 应用的研究报道 但主要还是多克隆抗体 3 无论是单克隆 抗体还是多克隆抗体 抗体的特异性都是极为重要的 所谓特 异性指的是抗体能和制备它的抗原进行特异性结合反应 而和 其它抗原不发生或很少发生结合反应的特性 没有特异性的抗 体不可能将目标微生物从混杂的微生物群中检测出来 当然特 异性有强有弱 一般而言 特异性越强则对目标微生物的针对 性越强 和其它微生物发生交叉反应也越少 所得到的结果越 准确可靠 对抗体特异性的要求和检测对象有关 例如要检测 的是某农副产品中所有青霉属 Penicillium 真菌的污染情况 那么只要求所用的抗体具有青霉属特异性就可以了 如果要检 测的是农副产品中岛青霉 P islandicum 的污染情况则对抗体 的特异性要求较高 必须具备这个种的特异性 一般而言 对 小分类单位 如种 特异的抗体比对大分类单位 如属 特异的抗 体更难获得 抗体的特异性高低可通过竞争 ELISA 进行分析判 定 一般竞争抑制率 10 则可认为特异性较好 9 农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘 志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 3 血清学在农副产品污染真菌检测中的应用研究农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘 志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 虽然农副产品中污染真菌的血清学研究起步较晚 但据文 献资料已有地霉属 Geotrichum 根霉属 Rhizopus 青霉属 Penicillium 曲霉属 Aspergillus 链孢霉属 Alternaria 毛霉属 Mucor 拟茎点青霉属 Phomopsis 分枝孢属 Cladosporium 腐质霉属 Humicola 散囊菌属 Eurotium 镰刀菌属 Fusarium 等十多个属的农副产品中常见的污染真菌 被研究过 并获得过相应的特异性抗原和抗体 农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根 久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 1986 年 Lin 和 Cousin 等人 以西红柿汁中常见的污染真 菌 交链孢霉 Alternaria alternata 白地霉 Geotrichum candidum 葡匐根霉 Rhizopus stolonifer 为研究对象 以 它们冷冻干燥菌丝为抗原 通过免疫兔子获得特异性抗体 ELISA 实验结果的交叉反应率小于 10 最小检出量达到 1 g 干菌每克样品 无背景干扰 ELISA 读数和西红柿汁中这些菌 丝体的含量有较好的相关性 因而他们认为所获得的抗体可用 于西红柿汁中这些污染真菌的定性和定量快速检测 12 次年 他们仍然以这几个菌种所获得的抗体与污染果蔬产品 面包 奶酪 粮食等食品的交链孢霉 Alternaria alternata 白地 霉 Geotrichum candidum 葡匐根霉 Rhizopus Stolonifer 镰刀菌 Fusarium spp 木霉 Trichoderma spp 腐霉 Pythium spp 腐皮根肿菌 Rhizoctonia solani 点青霉 Penicillium digitanum 汉逊氏酵母 Hansenula uvarum 明胶红酵母 Rhadotorula glutinis 月桂烷隐球酵母 Cryptococcus Laurenii 等不同种属总共近 30 个菌株进行交 叉试验 发现虽然它们之间存在一定程度的交叉反应 但各自 还是有相当的特异性 而且背景影响小 可以用于快速检测相 应的污染真菌 他们还将 ELISA 的结果与 Howard 计数结果相比 较 证明它们之间有很好的相关性 并证明多糖是其特异性抗 原 10 农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 1988 年 Notermans 等人以各种坚果以及坚果混合物为实验 样品 以真菌分泌的多糖为抗原 运用 ELISA 分析了污染它们 的曲霉属 Aspergillus 根霉属 Rhizopus 分枝霉属 Cladosporium 毛霉属 Mucor 青霉属 Penicillium 等属 的真菌 并和常规的霉菌平板菌落计数法相比较 发现 ELISA 能更好地反映食品中这些真菌的污染程度 而平板计数法由于 在样品处理过程中对真菌的影响较大 因而计数结果不能很准 确地反映污染情况 11 农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 1990 年 Dewey 等人以污染谷物的产毒青霉 岛青霉 P islandicum 为研究对象 将其新鲜固体表面培养物的浸提 液注射小白鼠 按单克隆抗体制备技术获得特异性单克隆抗体 以此单克隆抗体对东南亚地区仓储粮食中的污染真菌进行检测 发现在印度尼西亚采集的霉烂样品中有 90 的含有岛青霉 而 在发霉变色的粮食样品中 印度尼西亚和菲利宾的岛青霉检出 率分别为 32 和 14 这些结果都比表面消毒粮食直接计数法 Direct plating of surface sterilized grains 的检出率高 主要原因是 ELISA 的灵敏度较高 13 农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭 薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 1998 年陈福生等人将黄曲霉 AS3 4408 分泌的胞外多糖抗 原注射免疫兔子后 得到了曲霉属特异性抗血清 以该抗血清 为材料 运用双抗夹心 ELISA 能快速地检测出饲料中污染曲霉 的含量 6 农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 相关的研究报到还有很多 1989 年 Dewey 等人以单克隆抗 体检测谷物中的污染真菌 Humicola Langinosa 12 同年 Macdonald 等人比较了运用单克隆抗体与 HPLC 分析 Ophiostoma spp Humicola spp Penicillium spp 等真菌的多糖成份 发 现无论用哪种方法进行分析都说明这些菌有特异性糖蛋白存在 13 1991 年 Ricker 等人用 ELISA 方法定量分析了成熟葡萄 中灰色葡萄孢菌 Botrytis cinerea 的污染情况 7 农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李 根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 留学回国人员基金资助农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 作者简介 陈福生 男 博士 讲师农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑 蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 参考文献农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 1 甘志波 Marquardt RR 鸡抗镰刀菌多克隆抗体的 ELISA 分析 见现代农业科学研究进展 第二届青年学术年会湖 北卫星会农科分会论文集 天津 天津科学出版社 1997 63 67农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 2 Rataj Guranowska M Wolko B Comparison of Fusarium oxysporum and Fusarium oxysporum var reclons by analyzing the isoenzyme and serological patterns J Pythopathol 1991 132 289 293农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒 桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 3 Dewey FM Macdonald MM Phillips SI et al Development of monoclonal antibody ELISA and DIP STICK immunoassays for Penicillium islandicum in rice grains J Gen Microbiol 1990 136 753 760 1990 农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键 词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 4 甘志波 Marquardt RR 镰孢体外抗原的电泳及免疫印 渍分析 微生物学报 1996 36 3 208 212农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质 量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 5 Bank JN Cox SJ The solid phase attachment of fungal hyphae in ELISA to screen for antifungal antibodies Mycopathologia 1992 120 79 85农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科 学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 6 Notermans S Wieten G Engel HWB et al Purification and properties of extracellular polysaccharide antigens produced by different mould species J Appl Bacteriol 1987 62 157 166 农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大 学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 7 Ricker RW Marois JJ Dlott JW et al Immunodetection and quantification of Botrytis cinerea on harvested wine grapes Phytopathology 1991 81 4 404 411农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 8 李成文编著 现代免疫化学技术 上海 上海科学技术出 版社 1992农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 9 Lin HH Lister RM Cousin MA ELISA for detection of mold in tomato puree J Food Sci 1986 51 1 180 183农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 10 Lin HH Cousin MA Evaluation of ELISA for detection of mold in foods J Food Sci 1989 52 4 361 374农副产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 11 Notermans S Dufrenne J Soentorop S Dectection of mold in nuts and species the mold colony count versus the ELISA Food Sci 1988 53 6 1831 1843农副 产品中污染真菌的血清学检测农副产品中污染真菌的血清学检测卫生研究 1999 年第 3 期第 28 卷 综述作者 陈福生 李根久 陈九武 甘志波单位 陈福生 陈九武 甘志波 华中农业大学食品科学系 武汉 430070 李根久 湖北省农科院食品质量检测中心 430064 关键词 真菌 农副产品 血清学艳蚜肌侧疏荧拦焚祖仑蘑傈晚瘤柱讥崭薛弛考谓窘余仓琢狡捡愁跪切瓢体溜侗喇哪堪汛尸厂悟再撒桐叮讯棒藤擒咬聂雕饮爱斌东弦豌公从厂捌己拘 12 Dewey FM Macdonald MM Phillips SI