生物科学毕业论文

学号 071140231 河南科技学院本科毕业论文 超声辅助提取桑枝总黄酮工艺研究 院 系 生命科技学院 专 业 生物科学 班 级 生科 142 学 号 20140154214 姓 名 李强 指导教师 单长卷 二二 一五年十二月一五年十二月 目录目录 摘要 1 目录 3 1 前言 5 1 1 桑枝介绍 5 1 1 1 概述 5 1 1 2 桑枝的药理作用 5 1 2 黄酮类化合物介绍 6 1 2 1 概述 6 1 2 2 定义 6 1 2 3 分类 6 1 2 4 理化性质 7 1 2 5 药理作用 7 1 2 6 黄酮类化合物的应用 8 1 3 黄酮类化合物提取原理和方法 8 1 3 1 碱提取酸沉淀法 8 1 3 2 溶剂萃取法 8 1 3 3 酶解法 9 1 3 4 超声波提取法 9 1 3 5 微波萃取法 9 1 4 立题依据和研究意义 9 2 实验材料与方法 10 2 1 1 实验材料 10 2 1 2 材料 10 2 1 3 实验试剂 10 2 1 4 常用溶液配制 10 2 1 5 实验设备 11 2 2 实验方法 11 2 2 1 芦丁标准曲线制作 11 2 2 2 提取液总黄酮含量的测定及提取率的计算 11 2 2 3 单因素试验 12 2 2 4 正交试验 12 2 2 5 优化工艺的验证 13 2 2 6 数据处理 13 3 结果 13 3 1 芦丁标准曲线 13 3 2 单因素试验结果 14 3 2 1 乙醇浓度对桑枝总黄酮提取率的影响 14 3 2 2 料液比对桑枝总黄酮提取率的影响 15 3 2 3 超声功率对桑枝总黄酮提取率的影响 16 3 2 4 超声时间对桑枝总黄酮提取率的影响 16 3 3 正交试验结果 17 3 4 验证实验结果 18 4 讨论 19 5 结论 19 参考文献 20 致谢 23 BACHELOR S THESIS OF HUBEI UNIVERSITY FOR NATIONALITIES Ultrasonic assisted extraction of Flavonoids from Ramulus Mori Department Biology Department Major Biological Engineering Name Haojie Wu Guiding Teacher Ning Jiang Enshi China 2015 5 郑重声明郑重声明 本人郑重声明所呈交的学位论文 超声辅助提取桑枝总黄酮工艺研 究 是我在导师 姜宁 的指导下独立进行研究工作所取得的研究成果 除文中已经注明引用的内容外 论文中不包含其他个人已经发表或撰写 过的研究成果 也不包含为获得湖北民族学院或其它教育机构的学位或 证书而使用过的材料 对本文的研究做出重要贡献的个人和集体 均已 在文中以明确的方式进行了说明 本声明的法律结果由本人独自承担 作者签名 年 月 日 超声辅助提取桑枝总黄酮工艺研究 吴浩杰 湖北民族学院生物科学与技术学院 湖北恩施 445000 摘要 目的 目的 研究超声波提取桑枝中黄酮类化合物的工艺 并确定最佳提取条件 方法 方法 用单因素试验探究不同乙醇浓度 料液比 超声功率及超声时间对总黄酮提取率 的影响 然后用正交试验确定最佳提取工艺并用 3 次重复对优化的工艺进行验证 结果 结果 超声提取桑枝总黄酮在室温下的最佳工艺为 乙醇浓度 70 料液比为 1 30 g mL 超声功率 250 W 超声时间 8 min 在此条件下超声辅助提取桑 枝总黄酮的得率达 1 24 各因素主次关系为 料液比 超声时间 乙醇浓度 超声功率 结论 结论 该研究优化的工艺稳定可靠 为工业化生产桑枝总黄酮打下基 础 关键词 超声波 桑枝 黄酮 Ultrasonic assisted extraction of Flavonoids from Ramulus Mori Haojie Wu College of Biological Scientific and technical Hubei University for Nationalties Hubei Enshi 445000 Abstract To research the process of total flavonoids extraction from Ramulus Mori by ultrasonication extraction and determine the optimum extraction conditions Complete randomalized design was implemented to investigate the effects on the extraction rate of the Flavonoids in Ramulus Mori which produced by ethanol concentration solid liquid ratio ultrasonic working time ultrasonic power respectively and orthogonal experimental design was used to optimize the process The results showed that the optimal experiment conditions was that the concentration of ethanol is 70 the solid liquid ratio is 1 30 g mL ultrasonic working time is 8 min ultrasonic power is 250 W Keywords Ultrasonic Ramulus Mori Flavonoids 1 前言 1 1 桑枝介绍 1 1 1 概述 桑枝 Ramulus Mori 是桑树 Morus alba L 的嫩枝 采收于夏初春末 中药 桑枝有祛风通络功效 1 桑树为桑科落叶乔木 原产于我过中北部 在亚洲 欧 洲和南美洲也有广泛分布 我国大部分地区均产 主产于江苏 浙江 安徽 湖 南 河北 四川等地 桑枝可分为木质部 韧皮部和髓芯 各占 72 27 和 1 木质部含木质素较多而韧皮部含更多果胶 2 桑枝中含有多种化学成分 包括黄 酮 生物碱 酚性物质 糖类和植物甾醇等 1 1 2桑枝的药理作用 1 降血糖作用 桑枝降血糖作用早在 本草图经 中便有记载 周林 3 论文中提到桑枝提取 物能显著降低小鼠血糖水平 2 降血脂作用 血清中 TG TC 和 LCL C 水平过高是高血脂主要症状 可能造成动脉粥样 硬化 有研究 4 表明桑枝提取物能显著降低 TG TC 及 LDL C 的水平 桑枝的降 血脂作用良好 一定程度上对动脉粥样硬化起到了预防作用 3 抗炎镇痛作用 由损伤因子引起的组织防御反应即为炎症 其病理表现明显 陈福军 5 等发 现桑枝能抑制小鼠腹腔液渗出 表现较强的抗炎效果 王国建 6 在临床实践上用 白芥子配合桑枝 对肩周炎有较好的疗效 4 提高机体免疫力 免疫力是人体抵抗各种疾病的能力 免疫力下降或免疫功能失调可导致败血 症 中耳炎 皮肤感染等各种疾病 有研究 7 报道 桑枝能增强小鼠网状内皮细 胞吞噬功能 提高小鼠吞噬指数和迟发型变态反应能力 对小鼠机体免疫力有一 定的增强作用 此外 桑枝还具有降压 抗癌 抗病毒 治疗冠心病等作用 1 2 黄酮类化合物介绍 1 2 1 概述 黄酮类化合物 flavonoids 几乎在所有植物中都含有 常以游离态或糖苷形 式存在 对植物的生长 发育开花 结果以及抵御异物侵入有着重要作用 由于 其分布广 含量高 易于获得 所以成为人类较早发现的一类天然产物 据估计 约 2 被植物光合作用固定的碳转变为黄酮类化合物或与之紧密相关的化合物 黄酮类化合物实际在植物的所有部位都存在 以花 果实和叶中较多 且大多存 在于有色植物中 如松树 绿茶 银杏 红花等 8 1 2 2 定义 黄酮类化合物泛指由中央三碳将 2 个苯环联结起来的一系列化合物 C6 C3 C6 基本结构如图 1 1 所示 因这类化合物多呈黄色或淡黄色而称黄酮 图 1 1 黄酮类化合物的基本化学结构 Fig1 1 Chemical constitution of caulis clematidis armandi 1 2 3 分类 黄酮类化合物根据不同的三碳链氧化程度以及 B 环取代位置等特点 可被分为 黄酮类 黄酮醇类 二氢黄酮类等类型 1 2 4 理化性质 黄酮类化合物多为固态结晶 部分呈无定型粉末 多数呈黄色或淡黄色 可 以测定熔点 其溶解度受结构和存在状态的影响 存在很大差别 一般有以下规 律 游离苷元易溶于稀碱和乙醇 乙醚 乙酸乙酯等有机溶剂 难溶或不溶于水 水 甲醇 乙醇等强极性的溶剂易于溶解黄酮苷类化合物 而苯 氯仿 石醚等 有机溶剂难溶解之 此外 在一定条件下黄酮类化合物还能与部分试剂发生独特 的显色反应 在早期 化学显色反应常在研究工作中被用来判断黄酮类化合物是 否存在以及以何种类型存在 1 2 5 药理作用 1 抗氧化与清除自由基作用 自由基在人体正常代谢过程中产生 其性质活泼 氧化能力强 对人体健康 有极大的潜在危害 张琳等 9 发现多数黄酮中的部分双键 羰基及羟基能清除自 由基和抗氧化 2 抗肿瘤和抗癌作用 黄酮类化合物的抗癌作用主要与其雌激素样作用 抑制酶的活性 诱导细胞 凋亡等作用有关 程海林等 10 研究表明 黄酮可预防和治疗乳腺癌 皮肤癌等 3 抗菌 抗病毒作用 黄酮类化合物有很强的抗菌作用 甘草黄酮类化合物对很多细菌均有抑制作 用 王志杰等 11 研究结果显示黄酮具有较好的抗病毒作用 芦丁黄酮类化合物能 抗流感病毒 脊髓灰质炎病毒感染 12 4 抗炎免疫作用 黄酮类化合物主要通过影响细胞的有丝分裂和细胞间的相互作用来实现抗炎 免疫作用 王晓梅等 13 研究表明 黄酮类化合物可以抑制 NO 丙二醛和 PGE2 等的合成 同时他们还发现 黄酮对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀有抑制作用 对大 鼠腹腔巨噬细胞 IL 1 的生成有抑制作用 5 保护心脑血管作用 黄酮能修复血管内皮细胞的损伤 能溶解血栓 也能促进脑组织纤溶系 统改善功能 黄酮类化合物有协同保护脑组织的作用 曹珊等 14 研究表明黄酮对 脑缺血炎症及内皮血管损伤有很好的疗效 1 2 6 黄酮类化合物的应用 黄酮类化合物中既有水溶性的又有脂溶性的 溶解特性很宽 可按需要选择 合适的黄酮类化合物作着色剂 15 黄酮类化合物中的二氢黄酮类化合物在适当条 件下转化成显甜味的二氢查尔酮糖苷 被用作天然甜味剂 此外 工业染料和抗氧 化剂也曾使用过黄酮类化合物 1 3 黄酮类化合物提取原理和方法 随着近十几年黄酮类化合物药用价值的不断提升 它的提取显得尤为重要 下面简单介绍一下目前报道的黄酮类化合物的提取方法与原理 1 3 1 碱提取酸沉淀法 由于黄酮类化合物大多具有酚羟基 具有酸性 易溶于碱水中 用碱性水溶 液或稀醇提取 提取液经酸化后可析出黄酮类化合物沉淀 9 1 3 2 溶剂萃取法 在仅限于提取黄酮苷类化合物时 可用热水进行提取 例如 自槐花米中提 取芦丁 由于多糖黄酮苷有较大极性 沸水可直接用来提取它 但是由于热水浸 提时会产生较多易溶于水的杂质 提取效率低下 以及较为复杂的后续处理 使其不常使用 而极性较小的游离黄酮苷元可用甲醇 水 1 1 连续萃取 9 1 3 3 酶解法 当一些原料的细胞壁包围着黄酮类物质 使其不易被提取时 可以采用酶法 提取 如山楂 由于黄酮类物质被细胞壁所包围 且胞壁间有果胶粘结 用酶提 比一般方法提取率要高 16 破坏果胶 纤维素等连接细胞壁的物质成小分子 使 黄酮类物质得到充分释放是酶法提取的基本原理 1 3 4 超声波提取法 用超声波法提取黄酮类物质 是目前比较新的方法 它的原理是借助超声 波产生高强度的振动 极大的加速度 剧烈的空化作用以及搅拌作用破坏细胞膜 促使细胞释放与溶出黄酮类化合物 提取液在超声波作用下不断震荡 有利于溶 质扩散 超声波的热效应 使水温在 57 左右 让原料在水中溶解度有所增加 15 超声提取对被提取物的结构 活性没有影响 17 因此 超声波法极大缩短了提取 时间 提高了有效成分的提取率和原料的利用率 并且避免了高温对提取成分的 影响 是一种快速 高效 节能的新型提取工艺 1 4 立题依据和研究意义 目前 国内外少有对桑枝的研究报道 对桑枝总黄酮提取工艺的研究更少 大量桑枝以废弃物处理 造成了资源的极大浪费 为减缓这一现象 本文采用超 声波辅助提取法研究了提取桑枝总黄酮的工艺条件 得到了一些可供参考的实验 数据 可以为更好地开发和利用桑枝中黄酮类化合物提供一定理论依据 2 实验材料与方法 2 1 实验材料 2 1 1 材料 桑枝购自来凤县地产中药材综合开发有限责任公司 烘干至恒重后磨粉 过 60 目筛 置于阴凉处备用 2 1 2 试剂 试剂厂家 无水乙醇 AR 天津市光复科技发展有限公司 芦丁标准品 AR 国药集团 亚硝酸钠 AR 天津市光复科技发展有限公司 硝酸铝 AR 天津市福晨化学试剂厂 氢氧化钠 AR 天津市光复科技发展有限公司 蒸馏水实验室自制 2 1 3 设备 实验设备生产厂家 GZX 9140 数显鼓风干燥箱上海博讯实业有限公司 RT 02A 粉碎机弘荃机械企业有限公司 FA1004B 电子天平上海精密科学仪器公司 JY96 超声波细胞粉碎机 宁波新芒生物科技股份有限公司 ITDL80 2B 台式离心机上海安亭科学仪器制造厂 TU 1810 紫外分光光度计北京普析通用仪器有限责任公司 2 1 4 常用溶液配制 30 乙醇溶液 准确量取 16 mL 95 乙醇于 50 mL 容量瓶中 蒸馏水定容至刻度 线 贴上标签 备用 同样的方法配制 40 50 60 70 80 90 乙醇溶液 贴上标签 5 亚硝酸钠溶液 准确称取亚硝酸钠 5 g 放置于洗净烘干的烧杯中溶解 移至 100 mL 容量瓶中 移至 100 mL 容量瓶中定容 贴上标签 备用 10 硝酸铝溶液 准确称取 10 g 硝酸铝放置于烧杯中溶解 移至 100 mL 容量瓶 中定容 贴上标签 备用 1 mol L 氢氧化钠溶液 准确称取氢氧化钠 4 g 于烧杯中 用冷却后的沸水溶解 转移至 100 mL 容量瓶中 定容至刻度线 贴上标签 现 配现用 2 2 实验方法 2 2 1 芦丁标准曲线制作 称取 0 038 g 芦丁标准品溶于 30 乙醇溶液中 定容至 250 mL 制得初 始浓度为 0 152 mg mL 的芦丁标准溶液 取 50 mL 容量瓶 6 只 编号 0 1 2 3 4 5 分别准确吸取芦丁标准溶液 2 0 4 0 8 0 12 0 16 0 mL 于 1 5 号容量瓶中 各加 30 乙醇至 25 mL 0 号容量瓶中加入 25 mL 30 乙醇 作对照 向各容量瓶中加入 1 4 mL 亚硝酸钠溶液 浓度为 5 摇晃均匀后 静置 6 min 再各加硝酸铝溶液 浓度为 5 1 4 mL 摇晃均匀后静置 6 min 然后加入 5 mL 浓度为 1 mol L 的 NaOH 溶液 用 30 乙醇稀释 定容至 50 mL 静置 15 20 min 用 0 号瓶中溶液调零 在 510 nm 条件下分别测定 1 5 号瓶中溶 液吸光值 OD 以吸光度为纵坐标 芦丁浓度 mg mL 为横坐标 绘制芦丁 标准曲线 2 2 2 提取液总黄酮含量的测定及提取率的计算 准确吸取 4 mL 提取液于 25 mL 容量瓶中 按 2 2 1 中方法测定其吸光度 提 取率计算公式如下 桑枝总黄酮提取率 100 1000 0 1 WV VVC 式中 C 为提取液吸光度对应的总黄酮浓度 mg mL V1为样品定容后的体积 mL V 为提取液总体积 mL V0为测定吸光度所用样品液体积 mL W 为称取桑枝粉末质量 g 2 2 3 单因素试验 1 乙醇浓度对桑枝总黄酮提取效果的影响 称取 7 份桑枝粉末 每份 0 5 g 分别放在编好号的烧杯中 按料液比 1 30 g mL 分别加入 30 40 50 60 70 80 90 乙醇溶液 放入 超声波细胞粉碎机中处理 4 min 超声功率 200 W 提取液在 3000 r min 条件下离 心 30 min 取上清测定提取液中总黄酮浓度 并计算提取率 以考察桑枝总黄酮 提取率受乙醇浓度的影响程度 每个水平重复 3 次 2 料液比对桑枝总黄酮提取效果的影响 共称取 0 5 g 桑枝粉末 6 份 分别放在编好号的烧杯中 分别按料液比 1 10 1 20 1 30 1 40 1 50 1 60 g mL 加入 70 乙醇超声波处理 4 min 超 声功率 200 W 提取液经 3000 r min 离心 30 min 取上清 检测上清液中总黄酮 含量 计算提取率 以考察料液比对桑枝黄酮提取率的影响 每个水平重复 3 次 3 超声功率对桑枝总黄酮提取率的影响 称取 0 5 g 桑枝粉末共 6 份 分别放在编好号的烧杯中 按料液比 1 30 g mL 加入 70 乙醇溶液 在超声波细胞粉碎机中处理 4 min 超声功率分别 设为 50 100 150 200 250 300 W 提取液经 3000 r min 离心 30 min 取上 清 检测上清液中总黄酮含量 计算提取率 以考察超声功率对桑枝黄酮提取率 的影响 每个水平重复 3 次 4 超声时间对桑枝总黄酮提取率的影响 称取 0 5 g 桑枝粉末共 5 份 按料液比 1 30 g mL 加入 30 mL 70 的 乙醇 放入超声波细胞粉碎机中 分别处理 2 4 6 8 10 min 超声功率 200 W 提取液 3000 r min 离心 30 min 取上清 测定上清中总黄酮的浓度 计算提 取率 以考察超声波工作时间对桑枝黄酮提取率的影响 每个水平重复 3 次 2 2 4 正交试验 根据单因素试验的结果确定四个因素的水平 制作乙醇浓度 A 料液比 B 超声波工作时间 C 超声波功率 D 四个因素的 L9 34 正交表 表 2 1 2 2 5优化工艺的验证 按照正交试验优化得到的最佳工艺提取桑枝总黄酮 计算提取率 试验重复 3 次 表 2 1 正交试验因素与水平 Table 2 1 Factors and levels of orthogonal test 水 平 A 乙醇浓度 B 料液比 g mL C 超声功率 W D 超声时间 min 179 1 102006 280 1 202508 390 1 3030010 2 2 6数据处理 实验数据均用 3 组重复的平均数 用 Excel 软件进行统计分析 3 结果 3 1 芦丁标准曲线 图 3 1 芦丁标准曲线 Fig3 1 Standard curve of sophorin 根据芦丁的浓度与吸光值的关系 建立了如下线性回归方程 图 3 1 Y 9 8873X 0 0043 R2 0 9995 3 2单因素试验结果 3 2 1 乙醇浓度对桑枝总黄酮提取率的影响 图 3 2 乙醇浓度对桑枝总黄酮提取率的影响 Fig3 2 Effect on the yield of total flavonoids from Ramulus mori of ethanol concentration 由图 3 2 可知在 桑枝总黄酮的提取率随着乙醇浓度升高而先升后降 80 附近的乙醇浓度对桑枝总黄酮提取率影响最大 乙醇浓度达到 80 时 提取率达 到最高 乙醇浓度大于 80 后 桑枝总黄酮提取率随着乙醇浓度的增加 开始下 降 所以在正交试验时 选取乙醇浓度 70 80 和 90 为后续考察指标 3 2 2 料液比对桑枝总黄酮提取率的影响 从图 3 3 可以看出桑枝总黄酮提取率随着料液比的降低先升后降 当料液比 为 1 20 g mL 时提取率最大 且在该比值附近时料液比对提取率影响较大 故选 择料液比 1 10 1 20 1 30 g mL 为后续考察的指标 图 3 3 料液比对桑枝总黄酮提取率的影响 Fig3 3 Effect on the yield of total flavonoids from Ramulus mori of solid liquid ratio 3 2 3 超声功率对桑枝总黄酮提取率的影响 图 3 4 超声功率对黄酮提取率的影响 Fig3 4 Effect on the yield of total flavonoids from Ramulus mori of ultrasonic power 由图 3 4 可知超声功率达到 250 W 之前 黄酮的提取率随着超声功率的增大 而增大 当功率超过 250 W 后 桑枝总黄酮的提取率开始下降 因此正交试验选 取超声功率 200 W 250 W 和 300 W 为后续考察的指标 0 0 1 0 2 0 3 0 4 0 5 0 6 0 7 0 8 050100150200250300350 超声功率 W 提取率 3 2 4 超声时间对桑枝总黄酮提取率的影响 图 3 5 不同超声时间对黄酮提取率的影响 Fig3 5 Effect on the yield of total flavonoids from Ramulus mori of ultrasonic working time 由图 3 5 可知 随着超声提取时间的增加 提取率也相应的增加了 在 8 min 时达到最大提取率 超过 8 分钟时又开始下降 所以正交试验选取超声时间为 6 min 8 min 10 min 为后续考察的指标 3 3 正交试验结果 正交试验结果如表 3 1 所示 根据极差 R 值 可以得知各因素对超声提取桑 枝总黄酮提取率影响的主次顺序为 料液比 超声时间 乙醇浓度 超声波时 间 即料液比是影响总黄酮提取率的最重要因素 从平均提取得率 K 值来看 以提取条件 A1B3C2D2为最佳提取工艺 即以 70 乙醇为提取溶剂 在 1 30 g mL 的料液比和 250 W 的超声功率条件下提取 8 min 0 0 1 0 2 0 3 0 4 0 5 0 6 0 7 0 8 0 9 024681012 超声时间 min 提取率 表 3 1 正交试验结果表 Table3 1 Results of orthogonal test 因素 试验号A 乙醇浓度 B 料液比 C 超声功率 D 超声时间 黄酮提取率 111110 89 212221 08 313331 08 421230 9 522310 61 623121 08 731320 97 832130 84 933211 11 K13 052 762 812 61 K22 592 533 093 13 K32 923 272 662 82 极差0 160 250 140 17 主次顺序B D A C 优水平A1B3C2D2 优组合A1B3C2D2 3 4 验证试验结果 称取桑枝粉末 0 5 g 按料液比 1 30 g mL 加入 70 乙醇溶液 在超声功 率 250W 下超声提取 8 min 提取液在 3000 r min 下离心 30 min 准确吸取 4 mL 上清液转移至 25 mL 容量瓶中 按 2 1 1 中的方法进行实验 重复三次 按照 2 2 2 方法计算黄酮的提取率 连续三次的提取率为 平均提取率为 1 24 高于 正交试验中任一组合的提取率 说明该条件稳定可靠 4 讨论 黄酮类化合物具有多种生理活性功能使其在食品 药业等领域应用非常广泛 黄酮类化合物作用主要与抗氧化有关 18 随着黄酮类化合物研究的深入 提取黄 酮的方法开始多样化 传统的方法有热水提法 碱性水或碱性稀醇提取 回流法 渗漉法等 新型提取技术有超声波提取法 微波提取法 酶解法 超临界流体萃 取法等 19 随着超声波技术的逐步研究进步 超声波协同处理黄酮的方法也会越 来越多 20 超声波提取法相对于其他方法而言 超声波法明显优于传统的提取法 它所用的提取时间大大缩短 产率较高 在较低温度下 超声可以强化水浸提效 率 达到省时 高效 节能的目的 是提取黄酮类物质的一种高效方法 21 但目 前超声波提取技术基本还停留在实验室研究阶段 超声提取技术的工业应用还存 在很多待解决的问题 22 随着超声波技术的不断成熟 设备的不断改进 超声提 取技术在医药 化工等领域的应用前景将更广阔 5 结论 从单因素实验可知 超声辅助提取桑枝总黄酮的最优乙醇浓度是 80 最优 料液比是 1 20 g mL 最优超声波功率是 250 W 最优超声时间是 8 min 正交试验确定的超声辅助提取桑枝总黄酮的最佳工艺为 乙醇浓度 70 料 液比 1 30 g mL 超声功率 250 W 超声时间 8 min 提取率达到了 1 24 本研究为桑枝黄酮类化合物的提取利用提供了实验基础 参考文献 1 章丹丹 高月红 Jessica Tao Li 等 桑枝总黄酮的抗氧化活性研究 J 中成药 2011 06 1 943 946 2 中国药材公司编著 中国中药资源志要 一 M 北京 科学出版社 1994 86 95 3 周林 桑枝黄酮提取分离及抗氧化活性研究 D 重庆 西南大学研究生院 2011 4 何雪梅 廖森泰 邹宇晓等 桑植提取物对实验高血脂症大鼠的降血脂作用及抗氧 化作用研究 J 天然产物研究与开发 2007 19 1 462 464 5 陈福军 林一星 徐春泉等 桑的药理研究 桑叶桑枝桑白皮抗炎药理作用的初步 比较研究 J 沈阳药科大学学报 1995 64 3 222 223 6 王国建 白芥子配桑枝治疗肩周炎 中医研究 1998 11 4 48 49 7 卢笑丛 王有为 桑枝多糖分离纯化及其免疫作用的初步研究 J 武汉植物学研 究 2005 23 1 81 84 8 刘湘 汪秋安 天然产物化学 M 第二版 北京 化学工业出版社 2009 70 77 9 张琳 陆维敏 黄酮类化合物抗氧化性能与其结构的关系 J 浙江大学学报 理学 版 2006 33 2 177 191 10 程海林 陶春蕾 陈卫东等 红车轴草异黄酮药理作用研究进展 J 安徽中医学 院学报 2011 04 1 76 80 11 王志杰 黄铁牛 黄芪多种成分对豚鼠皮肤型人疱疹病毒感染的治疗作用 J 中 国现代应用药学杂志 2003 20 6 452 455 12 裴凌鹏 惠佰隶 金宗濂等 黄酮类化合物的生理活性及其制备技术研究进展 J 食品科学 2004 25 2 203 207 13 王晓梅 曹稳根 黄酮类化合物药理作用的研究进展 J 宿州学院学报 2007 01 1 105 107 41 14 曹珊 张小莉 白明等 柿叶总黄酮药理作用研究及其临床应用探讨 J 中医学 报 2012 08 1 987 989 15 杨青 郭彩清 油继辉等 黄酮类物质的生理功能及应用发展动态 J 贵州农业科 学 2007 35 2 143 146 16 陈丛瑾 黄克瀛 李德良 等 植物中黄酮类化合物的提取方法研究概况 J 生 物质化学工程 2007 03 42 46 17 LAI Fu rao WEN Qi