生药学实验讲义

1 生生 药药 学学 实实 验验 讲讲 义义 漯河医学高等专科学校漯河医学高等专科学校 2 目目 录录 实验室守则实验室守则3 实验一 生药中常见的化学成分的理化鉴定 一 4 实验二 生药中常见的化学成分的理化鉴定 二 5 实验三 根类生药6 实验四 根茎类生药7 实验五 皮类生药8 实验六 茎木类生药9 实验七 植物细胞基本结构10 实验八 植物的组织11 实验九 根的组织构造12 实验十 双子叶植物茎的初生构造和次生构造单子叶植物 裸子植物茎的构造13 实验十一 叶的构造14 实验十二 花的组织构造15 实验十三 果实的内部组织构造16 实验十四 种子的内部组织构造17 实验十五 菌类 裸子植物的性状显微鉴定18 实验十六 双子叶植物根及根茎类生药的显微及显微理化鉴定19 实验十七 单子叶植物根及根茎类生药的显微及显微理化鉴定20 实验十八 皮类生药的显微及显微理化鉴定21 实验十九 花类生药的显微及显微理化鉴定22 实验二十 果实种子类生药的显微及显微理化鉴定23 实验二十一 全草及其他类类生药的显微及显微理化鉴定24 实验二十二 动物类和矿物类生药的性状鉴别25 实验二十三 户外见习26 实验二十四 附院药房见习27 附录一 常用试剂配置法28 附录二 层离法常用显色剂29 附录三 显微镜测量法30 附录五 显微镜的构造与使用31 附录六 生物绘图32 3 实验室守则实验室守则 一 实验注意事项 1 根据教学进程 温习与本次实验有关的课堂讲授内容 2 仔细阅读本次实验的内容 要求弄懂实验的原理与方法 3 准备好各种自备的实验用品 如铅笔 橡皮 直尺 报告纸等 二 实验过程中的几点要求 1 遵守实验室规则 保持实验室安静 2 实验认真 观察仔细 观察应当与思考结合起来 应当手 眼 脑三者并用 3 由于实验时间有限 实验时应当善于安排自己的工作 注意力应当集中在主要问题上 不要用过 多时间去钻研细小的次要问题 一时解决不了的次要问题 可留课外时间去解决 o 4 在实验过程中 应当随时注意观察到的现象 测量或称量的数据 计算结果等写在报告纸上 养 成能随时作出准确 清淅 整齐的记录而不需要重抄的良好习惯 5 实验进行过程中 必须注意听取教师的指导 6 实验桌前应随时保持整洁 非实验必要物品一律不许放在桌面或桌架上 7 纸屑 废物应放人污物缸内 不得乱丢地上 污物缸内不得倒入液体 4 三 实验完毕时的几点要求 1 按照教师指定时间完成实验报告 2 把实验用仪器 用品等收拾干净 放在指定位置 发放给个人保管的可放抽屉或柜内 3 临时借用物品应及时归还 4 值日生负责最后清扫实验室卫生 并及时清除污物缸内的废弃物 5 实验结束后 检查门 窗 水 电 保证无安全隐患后方可离开实验室 实验一 生药中常见化学成分的理化鉴定 一 一 实验目的要求 1 了解化学检出法在药材鉴定中的应用 2 熟悉药材鉴定中常用的理化鉴定方法 3 掌握生物碱 羟基蒽醌的理化性质和定性检识反应 二 实验主要材料 仪器及试剂 马钱子 黄柏 苦参 黄连 大黄 秦皮 黄连乙醇液 水浴锅 荧光灯 蒸发皿 锥形瓶 试管 微量升华装置 碘化铋钾试液 碘化汞钾试液 碘一 碘化钾试液 浓硝酸 浓硫酸 5 NaOH HCl 乙醚 氨水 三 实验内容 1 显微化学反应法 1 将药材的切片或粉未置载玻片上 滴加适当试液 加盖玻片在显微镜下观察产生的颜色或结晶等 作为鉴别特征 取干燥马钱子的胚乳部分作徒手切片 加 l 硫矾酸试剂 l 滴 镜检 观察结果 另取一切片 加浓硝酸 l 滴 镜检 观察结果 2 取药材粗粉加适当试剂浸出 将浸出液滴于载玻片上 滴加适当试剂 加盖玻片 镜检观察反应 结果 取黄连乙醇液 1 滴 加浓 HN03 1 滴 镜检 观察结果 3 取药材的切片或粉末滴加适当试剂 直接观察皇现的种种颜色作为鉴别特征 取大黄饮片 加 5 NaOH l 2 滴 出现什么颜色 再加稀 HCl 1 2 滴 又出现什么颜色 2 微量升华法 是利用药材中所含的某些成分 在一定温度下能升华的性质 获得升华物 在显微镜下观察其形状 颜色及化学反应 作为鉴别特征 具体方法 取金属片 安放在有圆孔 直径约 2cm 的石棉板上 金属片上放一小金属圈 高度约 0 8cm 5 对准石棉板上的圆孔 圈内加药材粉末一薄层 圈上放一载玻片 在石棉板下圆孔处用酒精灯徐徐加热 火焰距板约 4cm 数分钟 至粉末开始变焦 并有气化物发生 去火待冷 则有结晶状升华物附着于覆盖 的载片上 将载玻片取下反转 在显微镜下观察结晶形状 并可加化学试液 观察其变化 取大黄粉未 进行如上操作 观察反应结果 3 荧光分析法 将药材切片或粉末或提取液等 在荧光灯下观察荧光 有些药材不产生荧光 如以酸碱处理或其他 化学方法处理后 可使其中某些成分在荧光灯下产生荧光 以便鉴别 如取黄连饮片 浙贝母粉末或秦皮水浸液 在紫外灯下观察荧光颜色 4 层析法 分为纸层析 柱层析 薄层层析等 略 5 化学定性检查 药材中的化学成分可利用其能与某些试剂产生特殊的颜色 沉淀反应来进行鉴 别 1 生物碱的检出 沉淀反应 取黄连 马钱子 黄柏 苦参 粉未各 2g 分别盛入锥形瓶中 各加水 l 5ml 浓 HCl O 5ml 60 水浴上温浸 30 分钟 时时振摇 取滤液备用 各取 2ml 滤液于试管中 分别加下列试液 2 3 滴 观察有何现象 碘化铋钾试液碘化汞钾试液碘一碘化钾试液 黄连 马钱子 黄柏 苦参 2 羟基功醌的检出 Bomtr ger 反应 取大黄粉未 0 2g 置试管中加入 5 NaOH 试液 4ml 在小火 上煮沸 取滤液加 HCl 呈酸性后 再加乙醚 5ml 振摇 分取醚层 于醚层中加入等量氨试液 振摇 观察反应现象 四 作业 简要记录各反应的实验步骤和结果 五 思考题 1 显微化学反应法有几种操作方法 2 微量升华法用于生药鉴别有何特点 3 含何类成分的生药常会产生荧光 4 生物碱常甩的沉淀试剂有哪些 Borntr ger 反应过程的原理是什么 实验二 生药中常见化学成分的理化鉴定 二 一 实验目的要求 掌握香豆精类 强心苷类 皂苷类 鞣质类 氰苷类 黄酮类的理化性质和定性检识反应 二 实验主要材料 仪器及试剂 秦皮 桔梗 穿山龙 五倍子 儿茶 苦杏仁 洋地黄叶 黄芩 槐米 水浴锅 蒸发皿锥形瓶 盐酸羟胺甲醇液 l0 氢氧化钾甲醇液 乙醚 氯仿 盐酸 l 三氯化铁乙醇液 2 红血球悬浮液 1 盐酸奎宁试液 明胶液 铁铵矾试液 三氯化铁试液 冰醋酸 浓硫酸 镁粉 三 实验内容 1 化学定性检查 1 香豆精类的检出 异羟肟酸铁反应 取秦皮粗粉 0 2g 置具塞试管中 加乙醚 3ml 浸渍 5 10 分钟 时加振摇 放置 吸取上清液 或滤过 于试管中加新配制的盐酸羟胺甲醇溶液 2 3 滴 l 0 氢氧化钾甲醇溶液 2 3 滴 水浴 温热 1 2 分钟 冷后加 l 0 盐酸 使 pH 为 3 4 再加 l 三氯化铁乙醇溶液 1 2 滴 两液混合面或溶液 6 应显什么颜色 2 强心苷的检出 三氯化铁一冰醋酸反应 取洋地黄叶粉末 0 5g 加水 5ml 水浴加热 20 分钟 滤液加 3mlCHCl3 振 摇萃取后 再加乙醚 3ml 待分层 用吸管吸取取下层 将 CHCl3层转于蒸发皿中蒸干 放冷 加冰醋酸 lml 使残渣溶解 移人试管中 加三氯化铁溶液 1 滴 并沿管壁缓缓注入浓 H2S04 l5 20 滴 观察上层液 及界面的颜色变化 3 皂苷的检出 泡沫反应 取桔梗粉末 0 2g 加水 5ml 加热煮沸 过滤 滤液在试管中强烈振摇 注意是否产 生大量持久性泡沫 溶血试验 取穿山龙的 l 生理盐水溶液 lml 和 l 生理盐水 lml 分别置试管中 各加 2 红血球 悬浮液 0 3ml 摇匀后放置 注意观察哪支试管溶液变清而透明 示溶血现象 4 鞣质的检出 显色及沉淀反应 取五倍子 儿茶粉末各 0 5g 分别置于锥形瓶中 加 25ml 水 水浴加热 过滤 备用 各取滤液 2ml 分别加下列试剂 观察反应现象 1 盐酸奎宁试液明胶液铁铵矾试液 五倍子 儿茶 5 氰苷类的检出 苦味酸钠反应 取苦杏仁一粒捣碎 用水湿润置试管中 试管中悬挂用 NaHC03饱和溶液湿润的 苦味酸试纸一条 用软木塞塞紧 置 40 50 C 水浴中 观察试纸颜色变化 6 黄酮苷的检出 盐酸镁粉反应 取黄芩 槐米 粉末约 0 2g 加乙醇 5ml 水浴温热约 5 分钟 滤过 取滤液 2ml 加镁粉少量 混匀 滴加盐酸数滴 注意有气泡产生 同时观察呈现什么颜色 四 作业 简要记录各反应的实验步骤和结果 五 思考题 1 香豆精苷 强心苷 氰苷 黄酮苷及鞣质的反应机理是什么 2 黄酮类成分遇盐酸一镁粉是否都显红色 如不显红色是否可以否定黄酮成分的存在 实验三 根类生药 黄芪 Rabix Astragali 甘草 Radix Clycyrrbizae 一 实验目的 l 掌握黄芪 甘草生药性状 2 掌握黄芪 甘草粉末显微特征 二 实验主要仪器及试剂 显微镜 临时装片用具 蒸馏水 水合氯醛溶液 白瓷板 蒸发皿 蒸馏水 80 硫酸 三 实验材料 蒙古黄芪 Astragalis membranaceus Bgc Var mongholieus Bgc Hsiao 粉末 甘草 clycyrrbiza uralensis Fisch 粉末 四 实验内容及步骤 1 镜检黄芪粉末 分别以蒸馏水和水合氯醛试液装片 注意以下特征 纤维 众多 成束 细长 直径 9 36 壁厚 非木化 孔沟不明显 另取黄芪生药 刮取少 量纤维 粉末 透化后装片 注意纤维的先端常纵裂成扫帚状 7 导管 主为具缘纹孔导管 纹孔呈椭圆形 类方类或斜方形 木栓细胞表面观呈多角形或类方形 淀粉粒单粒类圆形 椭圆形或类肾形 直径 3 13 复粒由 2 4 分粒组成 2 镜检甘草粉末 分别以蒸馏水和水合氯醛试液装片 注意以下特征 纤维 众多 成束或散离 细长 直径 6 14 壁厚 木化或非木化 孔沟不明显 晶鞘纤 维易察见 草酸钙方晶类双锥形 长方形或类方形 含晶细胞的壁增厚 微木化或非木化 导管 主为具缘纹孔导管 多破碎 纹孔椭圆形或略呈斜方形 对列或互列 有的导管旁可见 小型具缘纹孔管胞 木栓细胞棕红色 壁薄 微木化 表面观呈多角形 淀粉粒众多 单粒椭圆形 卵形或类球形 直径 3 16 脐点点状或短缝状 复粒稀少 由 2 分粒组成 此外 尚有少数黄棕色或红棕色的色素块 五 作业 1 绘黄芪粉末特征图 示纤维 导管 木栓细胞与淀粉粒 2 绘甘草粉末显微特征图 示晶纤维 具缘纹孔导管 木栓细胞和淀粉粒 六 思考题 l 甘草的组织构造中 有哪些较显著的鉴别特征 2 什么是晶鞘纤维 3 如何能方便而有效地鉴别甘草和黄芪粉末 实验四 根茎类生药 黄连 大黄 一 实验目的 l 掌握黄连 大黄的生药性状特征 2 掌握黄连大黄的粉末显微待征 3 了解其它根及根茎类中药的性状特征 二 实验主要仪器及试剂 显微镜 临时装片用具 蒸馏水 水合氯醛试液 三 实验材料 黄连 Coptis chinensis Franch 原植物标本 生药 味连 组织切片及粉末 四 实验内容及步骤 1 取黄连粉末分别以蒸馏水及水合氯醛试液装片 镜检下列特征 石细胞鲜黄色 类圆形 类方形或类多角形 有时稍延长 长径 25 75 m 孔沟及纹孔明显 韧皮纤维鲜黄色 纺锤形或长梭形 直径 20 40 m 壁较厚 纹孔少 木纤维众多 常成束 鲜黄色 直径 l 5 35 m 壁具裂隙状纹孔 导管多为孔纹导管 也有具缘纹孔 网纹及螺纹导管 鳞叶表皮细胞类方形或长方形 壁薄曩垂厨壁微波状 淀粉粒单粒长圆形 肾形或类球形 直径 l l0 复粒少 由 2 4 分粒组成 2 取大黄粉末分别以蒸馏水及水合氯醛试液装片 镜检下列特征 草酸钙簇晶大而多 棱角大多短钝 导管主为网纹导管 并有具缘纹孔及细小螺纹导管 直径约至 140 m 非木化 淀粉粒单粒呈圆球形或长圆形 脐点大多呈星状 复粒由 2 7 个分粒组成 3 观察所示标本的性状特征 五 作业 l 绘黄连粉末显微特征图 示石细胞 韧皮纤维 木纤维 导管 鳞叶表皮细胞及淀粉粒 2 绘大黄粉末显微特征图 示草酸钙簇晶 导管 淀粉粒 8 六 思考题 l 如何从性状与组织上鉴别 味连 雅连 和 云连 实验五 皮类生药 肉桂 黄柏 一 实验目的 1 掌握肉桂 黄柏的生药性状与组织鉴别特征 2 掌握皮类生药的鉴别特征 二 实验主要仪器及试剂 显微镜 临时装片用具 蒸馏水 水合氯醛试液 稀甘油 间苯三酚溶液 浓 HCl 小试管 氯仿 10 盐酸苯肼试液 三 实验材料 肉桂 黄柏粉末 四 实验内容及步骤 1 取肉桂粉末分别用蒸馏水及水合氯醛试液装片后进行镜检 注意下列显微特征 纤维大多单个散在 长梭形 壁极厚 木化 纹孔及纹孔沟不明显 石细胞较多 类方形或类圆形 壁厚 有的一面菲薄 油细胞类圆形或长圆形 有时尚含黄色挥发油滴 草酸钙针晶众多 细小 散在或成束 常存在于射线细胞中 木栓细胞多角形 壁木化 内含红棕色物 淀粉粒单粒或 2 4 分粒组成的复粒 2 理化鉴定 1 取肉粉末约 0 1 g 置小试管中 加氯仿 l 2ml 浸数分钟 吸取氯仿浸出液 2 滴置载玻片上 再加 10 盐酸苯肼试液 l 滴 加盖玻片后镜检 可见桂皮醛苯肼杆状结晶 o 2 取肉桂粉末少许 进行微量升华 于升华物上加 l0 盐酸苯肼液 l 滴 加盖玻片镜检 可见桂皮 醛苯肼杆状结晶 3 取黄柏粉未分别用蒸馏水及水合氯醛试液装片进行镜检 注意下列显微特征 纤维及晶鞘纤维较多 鲜黄色 直径 18 32 m 多成束存在 o 石细胞鲜黄色 成群或单个散在 类圆形者直径 40 128 m 分枝状石细胞较多 长可至 240 m 壁厚 层纹细密 孔沟不明显或较短 草酸钙方晶较多 直径 8 24 m 粘液细胞多见 直径可至 80 m 淀粉粒细小 多单粒球形 直径 2 8 m 五 作业 l 绘肉桂粉末特征图 示木栓细胞 纤维 石细胞及草酸钙针晶 2 绘黄柏粉末特征图 示纤维及晶鞘纤维 石细胞 粘液细胞等 六 思考题 1 如何从性状及组织上鉴别川黄柏与关黄柏 2 黄柏的石细胞有何特征 3 肉桂横切组织有何特征 实验六 叶类 花类 果实 菌类生药 大青叶 金银花 小茴香 茯苓 一 实验目的 l 掌握大青叶 金银花 小茴香 茯苓的生药性状及粉末显微特征 2 熟悉其它叶类 花类生药的显微特征 二 实验主要仪器及试剂 9 显微镜 临时装片用具 水合氯醛试液 甘油醋酸液 5 KOH 溶液 三 实验材料 大青叶 金银花 小茴香生药 茯苓 四 实验内容入步骤 1 取大青叶粉末少量 水合氯醛试液透化装片 镜检下列特征 靛蓝结晶蓝色 存在于叶肉细胞和表皮细胞中 呈细小颗粒状或片状 常聚集成堆 上表皮细胞垂周壁近平直 下表皮细胞垂周壁稍弯曲 略呈连珠状增厚 气孔多存在于下表皮 不等式 副卫细胞 3 4 个 2 取金银花粉末 以水合氯醛装片后镜检 可见以下特征 1 腺毛多见 有两种 一种头部倒圆锥形 顶部平坦 约 10 30 个细胞 排成 2 4 层 柄 2 5 个细 胞 另一种头部类圆形或扁圆形 约 6 20 个细胞 柄 2 4 个细胞 2 非腺毛有两种 一种为厚壁性 多为单细胞 表面有微细疣状突起 有的具角质螺纹 另一种为 薄壁性 单细胞 甚长 弯曲或皱缩 3 花粉粒类球形 表面有细密短刺及颗粒状雕纹 具 3 孔沟 4 草酸钙簇晶多见 常存在于萼筒组织中 3 小茴香的鉴别 1