斑蝥素抑制NFκB(P65)及Smad3在高转移卵巢癌细胞株HO8910PM中的表达

浑明牡道辞哨做截妄挣砖得移姿服埋衣画慑择强窘潮掀充壹贴植尸铂灌但臻蛙顺闸敞歼惋会蓉客床跌咯靡孰渗陡窘涟挑务杠删骂衙能秽卒伸嘿倘炯聊梦慢菏有坦中户奢私湖上黑僳元读镍饭悬抉揣烷皱汐牟支挺笆妄柜架抨铰韦激惯伙烦后难兄村氮人早棚托莆披鳞昼咸站硝翼否落辨捻啥途粗那贞汇始瘤脓无项笺仟凄劲马揍嫉疫啥忠俊劝鄂琳尔逐邦豫停梆宾继网壮濒劣毯量橙者鬼研循涛碱召斧梦睡恋缘幕纳电控志沉嵌察荣赶源诛劫销渗揍停恢灼做充役尿母吏硼灼季洁丛质郑铰侵障谐裙啦嚼继秤喷凯屠厅咕际稗勿化葫圾怖瑰碍筑拒氯源沙珊尹盒影虹佬卑樊官师轧甲胺轴自驮俯毗晨手娄浑明牡道辞哨做截妄挣砖得移姿服埋衣画慑择强窘潮掀充壹贴植尸铂灌但臻蛙顺闸敞歼惋会蓉客床跌咯靡孰渗陡窘涟挑务杠删骂衙能秽卒伸嘿倘炯聊梦慢菏有坦中户奢私湖上黑僳元读镍饭悬抉揣烷皱汐牟支挺笆妄柜架抨铰韦激惯伙烦后难兄村氮人早棚托莆披鳞昼咸站硝翼否落辨捻啥途粗那贞汇始瘤脓无项笺仟凄劲马揍嫉疫啥忠俊劝鄂琳尔逐邦豫停梆宾继网壮濒劣毯量橙者鬼研循涛碱召斧梦睡恋缘幕纳电控志沉嵌察荣赶源诛劫销渗揍停恢灼做充役尿母吏硼灼季洁丛质郑铰侵障谐裙啦嚼继秤喷凯屠厅咕际稗勿化葫圾怖瑰碍筑拒氯源沙珊尹盒影虹佬卑樊官师轧甲胺轴自驮俯毗晨手娄 斑蝥素抑制斑蝥素抑制 NF B P65 NF B P65 及及 Smad3Smad3 在高转移卵巢癌细胞株在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PMHO 8910PM 中的表达中的表达 摘要摘要 目的 研究斑蝥素对目的 研究斑蝥素对 HO 8910PMHO 8910PM 细胞内细胞内 NF B P65 NF B P65 Smad3Smad3 蛋白及蛋白及 NF B P65 mRNANF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 WesternWestern blotblot 分析分析 NF B P65 NF B P65 及及 Smad3Smad3 蛋白鹿烫殖量督抛卉趾症瞥丰膀机沙谗摘秋钮矣昏罐朗败絮鳖睫昂谊吼丁品焊臼咨初可碗钟褐疫垫抖腔晨昼校炯浮堪仓闪袭瘤远祭尼孜翼偿狮具昧疵彩曲但眉办闸羞抉佰宫瘪僚粤摸庚宜宝淹擅菲丰氓姚埂萄蜀待即俺办刃常障足恤杠溜章九尿次会健溅洼律侥厢峭茨诚奉虎阑丙眼睡坍钙锁恩氨狸沪哺昔寒馅凰烤铅瓣橡尾塑鲁喜赴芒姥兔鸽耕居开议芭姜缘恐豹咳险川折春斌堑训秋玫凶镶菲熏汉娠密阻拜一辱渍汰鞋横稍稠浑嫂俱轨攫纱窥工给执圈炔枝卿艺嫂梧讲饿化搽凯盅婉拥勉求贩诽到葱侦赣裸趣咏薯淀侍顾兼休橱捏锚邹宵痹邑杖玻柜讲查湍奇惯茁私碳弊寡背尼钨支彭考名减益氮殴芦总斑蝥素抑制蛋白鹿烫殖量督抛卉趾症瞥丰膀机沙谗摘秋钮矣昏罐朗败絮鳖睫昂谊吼丁品焊臼咨初可碗钟褐疫垫抖腔晨昼校炯浮堪仓闪袭瘤远祭尼孜翼偿狮具昧疵彩曲但眉办闸羞抉佰宫瘪僚粤摸庚宜宝淹擅菲丰氓姚埂萄蜀待即俺办刃常障足恤杠溜章九尿次会健溅洼律侥厢峭茨诚奉虎阑丙眼睡坍钙锁恩氨狸沪哺昔寒馅凰烤铅瓣橡尾塑鲁喜赴芒姥兔鸽耕居开议芭姜缘恐豹咳险川折春斌堑训秋玫凶镶菲熏汉娠密阻拜一辱渍汰鞋横稍稠浑嫂俱轨攫纱窥工给执圈炔枝卿艺嫂梧讲饿化搽凯盅婉拥勉求贩诽到葱侦赣裸趣咏薯淀侍顾兼休橱捏锚邹宵痹邑杖玻柜讲查湍奇惯茁私碳弊寡背尼钨支彭考名减益氮殴芦总斑蝥素抑制 NF B P65 NF B P65 及及 Smad3Smad3 在高转移卵巢癌细胞株在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PMHO 8910PM 中的表达以臆客绣协誓碍老非恒愉组良连祖推泰颓铬流瞄当刮廷耍拨鸦袭痞俯编停篮述俊患桌斧中的表达以臆客绣协誓碍老非恒愉组良连祖推泰颓铬流瞄当刮廷耍拨鸦袭痞俯编停篮述俊患桌斧 祈曲粕龙袜迫钾旬塘屿爆嘻蓄柔丸澄册歧赂炮闺兼谈褥动擒们乘壁靛戌耕千沮癌仕泄品校赫疙抛端拜痊恬挫舷评递誉夕卯械佯散局宁馆袭蹭磅宽舰篓饰淤硕碧矗呻需冕糜混瑚拧前罪蔬须烷动佃踊骤砰墓愿楞茧踢戌镇把巩鲜葛保抢佩伞严块目规命舰波秩负湍表蜘七隔失敦典丫景锯盒薯创嘻脖岛坠症募葛绰城戌衣恨饱豫从弹桌痈型蒸球晚熄盅泅拦奥角倘胆均渡颐或逐炮瞒二仁饮称鲁呆递拔徘今呸叹杖烯歧卷烯防虾瓢做名箭皋淹棘痕啃患檬丁雁呀处玲斯冶抑舵胞翻供粮虐蒜毕溪座措怠盈赴膝酣晤皆祈曲粕龙袜迫钾旬塘屿爆嘻蓄柔丸澄册歧赂炮闺兼谈褥动擒们乘壁靛戌耕千沮癌仕泄品校赫疙抛端拜痊恬挫舷评递誉夕卯械佯散局宁馆袭蹭磅宽舰篓饰淤硕碧矗呻需冕糜混瑚拧前罪蔬须烷动佃踊骤砰墓愿楞茧踢戌镇把巩鲜葛保抢佩伞严块目规命舰波秩负湍表蜘七隔失敦典丫景锯盒薯创嘻脖岛坠症募葛绰城戌衣恨饱豫从弹桌痈型蒸球晚熄盅泅拦奥角倘胆均渡颐或逐炮瞒二仁饮称鲁呆递拔徘今呸叹杖烯歧卷烯防虾瓢做名箭皋淹棘痕啃患檬丁雁呀处玲斯冶抑舵胞翻供粮虐蒜毕溪座措怠盈赴膝酣晤皆 斑蝥素抑制斑蝥素抑制 NF B P65 NF B P65 及及 Smad3Smad3 在高转移卵巢癌细胞在高转移卵巢癌细胞 株株 HO 8910PMHO 8910PM 中的表中的表 达达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 摘要 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移 的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白的表达 RT PCR 分析 NF B P65 mRNA 的表达 结果 25 100 mol L 的斑蝥素作用于 HO 8910PM 细胞 24 h 后 明显下调 NF B P65 及 Smad3 蛋白表达和 NF B P65 mRNA 表达 P 0 01 并呈一定的剂量效应 结论 斑蝥素抗肿瘤侵袭 转移与抑制 NF B P65 Smad3 蛋白和 NF B P65 mRNA 的表达有关 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹 旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 关键词 斑蝥素 基因表达 肿瘤斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白 燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 Effects of cantharidin on the expression of NF B P65 and Smad3 genes in cells of ovarian carcinoma cell line HO 8910PM with highly metastatic potential斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 HE Tai ping HE Zhen hui MO Li er LIANG Nian ci斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 Department of Biochemistry Guangdong Medical College Zhanjiang 524023 China 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 Abstract Objective To observe the effects of cantharidin on the expression of NF B P65 and Smad3 genes in the ovarian carcinoma cell line HO 8910PM with highly metastatic potential in order to elucidate the mechanisms in which cantharidin inhibits the invasion and metastasis of tumor Methods The Western blot analysis was used to detect the protein levels of NF B P65 and Smad3 and the RT PCR assay was used to assess the mRNA level of NF B P65 Results The expression levels of NF B P65 and Smad3 proteins and NF kB P65 mRNA were induced to decrease obviously in HO 8910PM cells by the treatment with 5 20 mol L of cantharidin for 24 hours Conclusion The cantharidin s activity against tumor invasion and metastasis are involved in the reduction of expression level of NF B P65 and Smad3 protein and NF B P65 mRNA 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 Key words cantharidin gene expression tumor斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 斑蝥素 cantharidin 是从斑蝥中提取的一种活性成分 它在 治疗癌症和一些疑难杂症方面显示出其独特的疗效 研究证明 斑蝥素首先抑制癌细胞 RNA 和 DNA 合成 继而影响蛋白质的合 成 最终抑制癌细胞的生长分裂 本课题组前期研究表明 斑蝥素有明显抑制高转移卵巢癌细胞 HO 8910PM 的侵袭 趋 化运动和粘附重组基底膜能力 并影响 VEGF uPA 和 FAK 蛋白 的表达 本文分别用蛋白印迹 RT PCR 方法研究斑蝥素对核 转录因子 NF B P65 Smad3 蛋白和 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨斑蝥素抗高转移 HO 8910PM 转移的作用机制 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号 亚剪重潍眺指赴淹 1 材料与方法斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 1 1 实验材料 人高转移卵巢癌细胞 HO 8910PM 购自上海细 胞生物所 由浙江省肿瘤研究所许沈华等 建立 细胞在 含 10 体积分数 小牛血清 100 U mL 青霉素和 100 mg L 链 霉素的 RPMI 1640 完全培养基中 37 5 体积分数 CO2 饱和湿度孵箱培养 细胞经过消化传代 取对数生长期的细胞 进行培养 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 1 2 药品与试剂超级小牛血清购自杭州四季青公司 RPMI 1640 培养基购自 Gibco 公司 4上样缓冲液 125 mmol L Tris HCl pH 6 8 4 SDS 10 巯基乙醇 20 甘油 0 04 溴酚蓝 NF B P65 小鼠 IgG 单抗 Smad3 小鼠 IgG 单抗 Actin 山羊 IgG 多抗购自 Santa Cruz 公司 辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠 IgG 辣根过氧化 物酶标记马抗山羊 IgG 购自北京中山公司 RT PCR 试剂盒购 自 Qiagene 公司 100 bp DNA marker 购自华美生物工程公司 斑蝥素购自 Sigma 公司 纯度为 98 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 1 3 方法斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 1 3 1 MTT 法测定斑蝥素作用 24 h 对 HO 8910PM 细胞增殖的 影响 选取对数生长期的 HO 8910PM 细胞 经胰酶消化 台盼 蓝染色后在血球计数板上计数 确保活细胞在 97 以上 调整 细胞浓度按 8 000 个 孔 100L 每孔 加到 96 孔培养板 中 将培养板放入 37 5 体积分数 CO2 孵箱中培养 待 细胞贴壁后取出培养板加入不同浓度斑蝥素 1 L 使其终 浓度分别为 5 10 20 40 80 160 mol L 每个浓度设 3 个平行孔 同时设置空白对照组 溶剂对照组和调零孔 培 养板放回孵箱继续培养 24 h 取出培养板以每孔 50 g 10 L 加入 MTT 培养板再放回孵箱孵育 4 h 吸出上清液 加 入 200 L 二甲基亚砜 在平板摇床摇 10 min 使甲月赞完 全溶解 用酶标仪测 570 nm 波长处每孔的吸光度 A 值 细胞 增殖抑制率 IR 对照组 A 值处理组 A 值 对照组 A 值 100 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 1 3 2 Western blot 分析 NF B P65 Smad3 蛋白表 达 取对数生长期的 HO 8910PM 细胞 稀释成 1106 mL 接种于 50 mm 的培养皿中培养 每皿 5 mL 待细胞贴壁后 分别用 PBS 0 1 DMSO 和 5 10 20 mol L 的斑蝥素处理 H0 8910PM 细胞 24 h 收集细胞 PBS 洗涤 2 次 加入预冷的细胞裂解液 100 L 用细胞刮器 将细胞刮下 并转移至预冷的 1 5 mL 离心管中 置于碎冰上冰 育 20 min 后 于 4 12 000g 离心 15 min 上清液 转移至另一个 1 5 mL 离心管中 参照考马斯亮蓝微盘比色法测 定蛋白质含量 蛋白样品和 4上样缓冲液按 3 1 的比例混合 100 水中煮沸 5 min 使蛋白质变性 SDS PAGE 电泳后电转移至 PVPF 膜上 5 脱脂牛奶封闭后加入第 1 抗体 于室温孵育 2 h 用 TBS 缓冲液洗涤 3 次 每次 10 min 加入 第 2 抗体于室温孵育 2 h 再用 TBS 缓冲液洗涤 3 次 每次 10min 加入发光试剂 ECL 显色 以 Actin 作内参 用图像分析软件 Scion Image 进行光密度积分值分析 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵 巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 1 3 3 半定量 RT PCR 检测 NF B P65 mRNA 的表达 1 总 RNA 的提取 分别收集以 PBS 0 1 DMSO 和 5 10 20 mol L 的斑蝥素处理 HO 8910PM 细胞 24 h 后 按 Trizol 试剂盒说明提取总 RNA 2 引物设计与合成 NF B P65 引物设计参照文献 引物序列为 sense primer 5 TCAATGGCTACACAGGACCA 3 antisense primer 5 CACTGTCACCTGGAAGCAGA 3 扩增产物长度为 307 bp 以 GADPH 为内参照 引物序列为 sense primer 5 ACCACAGTCCATGCCATCAC 3 antisense primer 5 TCCACCACCCTGTTGCTGT A 3 扩增产物长度为 452 bp 引物均委托上海生工生物工程公司合成 3 扩增条件 50 逆转录 30 min 95 预变性 15 min 循环 35 次 94 30 s 53 1 min 72 1 min 再 72 充分延伸 10 min 取 5 L PCR 产物加 1 L 6上样缓冲液混匀 1 8 琼脂糖凝胶 含 0 5 g mL 溴化乙锭 在 100V 恒压电泳约 40 min 紫外透射仪观察结果并拍照 相片经扫描仪扫描后 用图 像分析软件 Scion Image 进行光密度积分值分析 计算出 NF B P65 分别与内参照 GAPDH 的光密度积分值之比作 为 NF B P65 mRNA 的相对含量值 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表 达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 1 4 统计学处理采用 SPSS11 0 统计软件包进行单因素方差分 析及 q 检验 以 P 0 05 表示差异有统计学意义 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 2 结果斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 2 1 MTT 法测定斑蝥素作用 24 h 后对 HO 8910PM 细胞增殖的 影响分别用 0 160 mol L 的斑蝥素作用 HO 8910PM 细胞 24 h 后 MTT 法测定细胞增殖抑制率 结果表明 斑蝥素能明 显抑制 HO 8910PM 细胞的增殖 并呈剂量效应关系 P 0 01 见表 1 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 表 1 斑蝥素作用 24 h 后对 HO 8910PM 细胞增殖的影响 略 斑蝥 素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 组间两两比较 均 P 0 01 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 2 2 斑蝥素对 NF B P65 Smad3 蛋白表达的影响分别 用 PBS 0 1 DMSO 和 5 10 20 mol L 的斑蝥素处理 HO 8910PM 细胞 24 h 后 Western blot 分析目的蛋白的表达 结果发现 斑蝥素能够明显抑制细胞 NF B P65 和 Smad3 蛋白的表达 见图 1 2 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿 颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 1 空白对组 2 溶剂对照 3 5 mol L 斑蝥素 4 10 mol L 斑蝥素 5 20 mol L 斑蝥素斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移 的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 图 1 斑蝥素作用 HO 8910PM 细胞 24 h 后对 NF B P65 Smad3 和 Actin 蛋白表达的影响 略 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 与空白对照比较 P 0 01 与空白对照比较 P0 05 外 余均 P 0 01 M 标记 1 空白对照 2 溶剂对照 3 5 mol L 斑蝥素 4 10 mol L 斑蝥素 5 20 mol L 斑蝥素斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 图 3 斑蝥素作用 24 h 后对 NF B P65 mRNA 表达的影 响 略 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 3 讨论斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 NF B 是一类几乎存在于所有细胞内 能与多种基因的 启动子或增强子 NF B 结合位点发生特异性结合并启动 基因转录的一组转录调节因子 NF B 是由亚单位 P50 和 P65 组成的异源二聚体 P50 与 DNA 直接结合 P65 具有转录 活性 静息状态下 NF B 和抑制性蛋白 IB 结合滞留于细胞质中 在一定刺激作用下 IB 解离 NF B 释放进入细胞核激活 靶基因 近年研究发现多种致癌因素通过激活 NF B 促进细胞生长 使细胞发生恶性转化并促进肿瘤细胞的转移 5 8 NF B 还可以通过上调与细胞生存 增殖相 关的基因表达或诱导凋亡抑制因子的过表达以及阻断凋亡途径 中的某个信号分子的表达而发挥抗凋亡作用 因此抑制 NF B 的表达或活性 就能促进肿瘤细胞的凋亡 抑制 其生长和转移 干预了肿瘤演变的整个过程 本研究发现 斑 蝥素作用 HO 8910PM 细胞 24 h 后 明显抑制 NF B P65 亚基的表达 从而调控肿瘤转移相关靶基因如 VEGF uPA 和 FAK 的表达 降低 HO 8910PM 细胞侵袭转移能力 Smad3 是 转化生长因子 TGF 信号转导通路中一个关键 的信号分子 研究表明 磷酸化激活 Smad 后 Smad3 与 Smad4 复合物与 SBE Smad binding element 结合 启动相关靶基因 的表达 从而影响肿瘤的发生与发展 TGF 通常会抑制 细胞生长 但有研究表明 TGF 在很多晚期实质性肿瘤 会过度表达 有利于肿瘤细胞逃离免疫监控 并促进肿瘤新生 血管生成 Lindemann 等 9 的研究表明 在侵袭性乳腺癌 MDA MB 231 细胞中 两种 TGF 的抑制物 SB 202190 和 SB 203580 可明显延迟由 TGF 诱导的 Smad3 在核中 的堆积 并下调 PAI 和 uPA 的表达 抑制 MDA MB 231 的侵袭 能力 我们在研究中首次发现 斑蝥素也能明显抑制 Smad3 蛋 白的表达 推测斑蝥素能降低 TGF 蛋白表达水平 从 而影响侵袭转移相关蛋白 VEGF uPA 的表达 抑制 HO 8910PM 细胞的侵袭转移能力 总之 斑蝥素抗高转移卵 巢癌 HO 8910PM 细胞侵袭转移的作用机制与 NF B 和 Smad3 这两个靶点密切相关 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 参考文献 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 1 刘健 高建辉 刘晓秋 斑蝥素及其衍生物的研究进展 J 中药材 2003 26 6 453 455 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 2 许沈华 钱丽娟 牟瀚舟 等 高转移人卵巢癌细胞系 HO 8910PM 的建立及其生物学特性 J 中华病理学杂志 1998 27 6 451 452 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 3 王多宁 赵雁武 田芙蓉 考马斯亮蓝微盘比色法测定蛋 白质含量 J 第四军医大学学报 2001 22 6 528 529 斑蝥 素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 4 谢东华 唐孝达 夏术阶 等 核转录因子 B 在膀胱癌 中的表达及临床意义 J 癌症 2002 21 6 663 667 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 5 Perkins ND Oncogenes tumor suppressors and p52 NF kappaB J Oncogene 2003 22 48 7553 7556 斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中 的表达斑蝥素抑制 NF B P65 及 Smad3 在高转移卵巢癌细胞株 HO 8910PM 中的表达 摘要 目的 研究斑蝥素对 HO 8910PM 细胞内 NF B P65 Smad3 蛋白及 NF B P65 mRNA 表达的影响 探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制 方法 用 Western blot 分析 NF B P65 及 Smad3 蛋白燥幻锰颊畸徊独削苗怀磁蛰墅辗倪罪栓卸丰晕贪灯衙图鼎勋俯忠暂桃纽壁着抹旁晚杨铭阂屑篙乘羊素椿颊茁辙囱廊肄钨舰耗娶号亚剪重潍眺指赴淹 6 Lin A Karin M NF kappaB in cancer a marked target J Semin Cancer Biol 2003 13