MSC检定规程模板2015版药典

1 6 委托检验委托检验 检验项目和规程检验项目和规程 检品名称 委托单位名称 公章 委托单位地址 联系人和联系电话 日期 2 6 第第5代细胞代细胞 1 鉴别试验鉴别试验 1 1 细胞形态 检定标准 在倒置显微镜下观察 细胞应贴壁生长 呈长梭形 1 2 STR图谱鉴别 检定标准 应表达人的16个等位基因 为单一细胞来源 1 3流式细胞仪检测细胞表面标记物 按照BD公司的人间充质干细胞分析试剂盒 BD货号562245 说明进行 检定标准 CD73 CD90 CD105 95 CD11b CD19 CD34 CD45 HLA DR 2 1 4种属间细胞污染检查 PCR法 检定标准 应为人源细胞 无种属间交叉污染 1 5染色体核型分析 检定标准 参考正常中国人体细胞的G显带带型标准 染色体数量应为46 XX或者46 XY 染色体结构应无缺失 重复 倒位 易位 2 细菌 真菌检查细菌 真菌检查 取细胞培养上清液样品 参照 中华人民共和国药典 2015年版无菌检查法 通则1101 进行检查 应为阴性 3 分支杆菌检查分支杆菌检查 取至少107个活细胞样品用培养上清制备细胞裂解物 参照 中华人民共和国药典 2015年版无菌检查法 通则1101 进行检查 应为阴性 4 支原体检查支原体检查 4 1培养法 取细胞培养上清液样品 参照 中华人民共和国药典 2015年版 通则3301 进行检查 应为阴性 3 6 4 2 DNA荧光染色 取细胞培养上清液样品 参照 中华人民共和国药典 2015年版 通则3301 进行检查 应为阴性 5细胞内 外病毒因子检查细胞内 外病毒因子检查 5 1细胞形态观察及血吸附试验 细胞接种于细胞培养瓶中 参照 中华人民共和国药典 2015年版第三部生物制品生 产检定用动物细胞基质制备及检定规程进行 细胞持续培养2周逐日镜检 细胞形态正常 无病变 血吸附试验阴性 5 2体外不同指示细胞接种培养法检测病毒因子 细胞接种于细胞培养瓶中 按照体外不同指示细胞接种培养法 中国药典2015版三部 生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程 进行 细胞形态正常 血吸附试验阴 性 血凝试验阴性 5 3动物体内接种法 5 3 1乳鼠脑内及腹腔接种 取细胞悬液注射于出生24小时内的乳鼠腹腔和脑内 按照中国药典2015版三部生物制 品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求 21天后乳鼠应至少有80 健存 5 3 2小鼠脑内及腹腔接种 取细胞悬液注射于小鼠腹腔和脑内 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动 物细胞基质制备及检定规程中要求 21天后小鼠应至少有80 健存 5 3 3豚鼠腹腔接种 取细胞悬液注射于豚鼠腹腔 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞 基质制备及检定规程中要求 42天后豚鼠应健存 解剖无结核病变 5 4鸡胚接种检查 取细胞悬液注射于5 7日鸡胚卵黄囊 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用 动物细胞基质制备及检定规程中要求 应至少80 存活 取细胞悬液注射于9 11日龄鸡胚尿囊腔 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定 用动物细胞基质制备及检定规程中要求 应至少80 存活 尿囊液血凝试验应为阴性 5 5 特殊人源病毒检查 5 5 1 HIV检查 4 6 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求 应为阴性 5 5 2 HBV检查 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求 应为阴性 5 5 3 HCV检查 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求 应为阴性 5 5 4 HCMV检查 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求 应为阴性 5 5 5 EBV检查 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求 应为阴性 5 5 6 HPV检查 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求 应为阴性 5 5 7 HHV检查 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求 应为阴性 5 6牛源病毒检查 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求 应为阴性 5 7 猪细小病毒检查 按照中国药典2015版三部生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程中要求 应为阴性 5 8逆转录病毒检查 参照中国药典2015版三部附录 逆转录酶活性检查法 应为阴性 6 免疫学反应检测免疫学反应检测 5 6 6 1淋巴细胞增殖抑制试验 按照淋巴细胞增殖抑制试验法检测 应具有抑制淋巴细胞增殖的能力 6 2 特定淋巴细胞亚群检测 按照特定淋巴细胞亚群检测法检测淋巴细胞Th1 Th17增殖抑制率和Treg增殖促进率 6 3淋巴细胞分泌TNF 抑制试验 按照淋巴细胞分泌TNF 抑制试验法检测 应具有抑制淋巴细胞分泌TNF 能力 7 诱导分化能力检查诱导分化能力检查 7 1 成骨分化 细胞在体外成骨诱导培养后 茜素红S染色分析成骨细胞分化能力 7 2 成脂分化 细胞在体外成脂诱导培养后 油红O染色检测细胞内红色脂肪滴 8细胞活性检测细胞活性检测 8 1 细胞数和细胞存活率 血细胞计数板对细胞计数 台盼蓝染色法检测细胞平均存活率应不低于90 8 2细胞生长曲线 用细胞计数方法绘制细胞生长曲线来判断细胞活力 8 3细胞周期测定 用流式细胞术进行细胞周期测定 9成瘤性检测成瘤性检测 9 1裸鼠体内接种试验 按照中国药典201