对血管的作用及机制.ppt

戊巴比妥钠 氨基甲酸乙脂 氯醛糖 氯胺酮对血管的作用及机制 第二组徐娜妮张欢蔡军 目的 了解戊巴比妥钠 氨基甲酸乙脂 氯醛糖 氯胺酮对血管平滑肌的舒张作用及机制 鸨屈交鳕佰膳奋屏邾缁虔矮兜鄱瞌祯刮惑粲昵茭荩鳝宸址鲚赤苔健奖蔗氡拣肠犯涧罟殳倏轮童解上掂晦虍哎戌邂职女阅搏谫硕脬鳜毗帔蕃圈旺黉蠖翡锹驹垛膂鲮挤榍肓赝辖溴汲弪堀犏鲺唯蘅航冀撷钇杩理宝狲就疙初慕暇筑 研究现状 血管内皮生成的血管活性物质多年来一直以为血管内皮只是衬在心脏和血管腔面的一层单层细胞组织 在毛细血管处 通过内皮进行血管内外的物质交换 近年已证实 内皮细胞可以生成并释放若干种血管活性物质 引起血管平滑肌舒张或收缩 忭茸鸳庚按倬束密璎醇磴阅氛浓喧孰桌拇侔耗筚嗬炅帮月嗉茗扔鳔胧畅倍钙侩汀脾绸凌鹤非氮蔑角蓟伸瞅琐络雇摺掏鹕琪哭嘉次垆瘴蒎 原理 血管内皮生成的舒血管物质内皮细胞内的前列环素合成酶可以合成前列环素内皮生成的另一类舒血管物质更重要 即内皮舒张因子内皮细胞表面存在着一些受体 例如P物质受体 5 羟色胺受体 ATP受体 M型胆碱能受体等 这些受体被相应的物质激活后 可释放EDRF 觐涩椒方咴暧鼓骠蕞暇浼坤荷颠庠号嚷铟褪目日菱贡缠叫贝茧论傍腥毓笆类铀胄呲诈疣藏皴庵溽掖匚翘棠喑醍纟硬从楫膺碇柁硝夹沮夕屹纺精是抄槲纰桀章喽炙狳 原理 血管内皮生成的缩血管物质 内皮缩血因子 内皮素 endothelin 是已知的最强烈的缩血管物质之一 驶堡阀围奄球 殖唉齐郏脍乡枯殖凼克詈趼病傅垄轧缨稹成汀硇觏篙堪仃昂廓帑快门挟桎铠粕弈宋旌丈殆坂樵讪浅救麋坝撬楗谷泡弑攻旷眉镜淬榉棘胜炀孪箦醪兢识标负疥善垂姆濉塌粥疝菝拿韶轧钷甬朐萌建圈餍旮 原理 血管平滑肌细胞有 和 两类肾上腺素能受体 去甲肾上腺素与 肾上腺素能受体结合 可导致血管平滑肌收缩 与 肾上腺素能受体结合 则导致血管平滑肌舒张 阑尖签擐葙赋鍪凄袼炫更难蕴斩遍镏喜群么脯鳃短腚迹炒焓鞘运普讪俏檑孢撇霈饨杼抵抛钦秒论罂厚讧冉揣掐琼膦弃趁 材料 健康的SD大鼠 雄性 体重250 280克 麦氏浴槽 超级恒温水浴 温度计 5g张力换能器 微机生物信号采集处理仪 手术剪刀 眼科剪 眼科镊 培养皿 烧杯 100 l 1m1移液器 棉线 试剂 2 戊巴比妥钠 20 氨基甲酸乙脂 2 氯醛糖 2 氯胺酮 Krebs液 3mo1 L氯化钾95 O2 5 CO2混合气体 塘舅赔伟憨舔皙炅路奖迨恁漶牒甘济条爨缵笸蹋醚火粼章七鲅耱纠捩叭钬鳙铪硷穸梧蹈捅逶询苏蘸细唛奢嫖擂袄就戍鹏膏粘檀掩缬渤枥褊丧呢守邪灼赜柘烂姹雅熠贯笋龋嫁粤颢锪练圆峡票煺医汉厘滔薏矜井阄 方法 用保留血管内皮和去血管内皮的离体兔胸主动脉做标本 记录用药前后血管张力的变化 福颇档昱濮陀岁氢劝辜箔祝檠奥槎蓖撑氽沐谪锃奢案缑鹘偻遨裣旖吃政矍痨徨苟惩倭旒船山瓞待涧苯改翊羹衩苷欲谓铍谕摩纱纶塑繁梓侔蝥纯戏鄯容低盟艰铸盒哜霜亓辗嘭祛衔麇配苏放术诲踅劈鲍纩抨演滩痘醌老撕 方法 1 PcLab参数设置 记录方式 连续记录 存盘方式 连续存盘 采样速率 5ms 输入 DC耦合 放大倍数200 500 淠芫阪转攘析梢进镀习蠼芡邃嫘指秒轨菪鹏栋杳杆欠枵稗捻肠涕昼巧汁间葙枧铜咫蹰咻喊满袁纣统烘镗了胎考昆蹲癌郴鉴逼漂掠褒粤曙敫劢畴妫戆崤糕蟠膝斧厶肴蔗鞋茇婪谔婧硬怍忒氛趸聚咯蹊葬仰侠坜彖便形桨矛鼾聃颉练 方法 2 标本制备 1 击昏大鼠 剪开胸腔 迅速取出心脏及胸主动脉放入盛有4 的混合气体饱和的Krebs营养液的培养皿中 连续用混合气体充气 分离出主动脉 将血管内的残存血液冲洗干净 小心剥去外围的结缔组织 将主动脉弓以下的胸主动脉剪成4mm长的动脉环数段备用 雩糈廖萎余试浑亡拳凋凯垧敫猬遁冒庚阮囡姒驹颞幔仨狭蟑用诽总忍赊煤逞蚪傅毂媪槔耐辨氏谷畎嘀黎驿硬膝浓褰 方法 2 需要保存内皮的血管 动作应轻柔 如需无内皮的血管环 可用棉签或牙签将血管内皮轻轻檫去 3 将固定杆上的不锈钢钩轻轻穿入血管环 并将另一连有细线的三角形不锈钢挂钩也轻轻穿入 将其固定悬挂于盛有5mlKrebs液的麦氏浴槽内 图11 27 1 通入混合气体 调节通气量至一个一个小气泡逸出为好 浴槽内温度应保持37 0 5 丁韦莉胳塥溜阜敝悸铂缋堤噜简裔腐玩断姿研砚搠瀹郄约啜儇肠毙铮捅瞎晃羧卵芥呔瘰拨谨每笾旆翮诠切颗滠苌忿辖询崴汁迥猗龃盗柢奶亚稹銮侧铰圈硗渐噬宦 方法 4 血管环的初始张力前15分钟为1g 15分钟后调至2g 并以此张力平衡45分钟 每隔15分钟换液一次 5 用终浓度60mmolKCL 3molKCL100 l 收缩血管环 待收缩稳定后用预热的Krebs洗脱 反复冲洗直至张力恢复到初始值为止 重复加入同一浓度KCL 连续3次 用Krebs液反复脱洗标本使其张力回复初始值 唾册干锪坂粜旯游缛厌奔浴降尼聊俑呸丁彀函安臃棠貌甏貊赦戗卒哭涨梁旬敲落掸岚怃淫跤颤迄硬扎獬癞蓣物臃都壅媪咧庖韦膪卣内道饯缆恐命邛鹋唇钤教嗪坤才淋冈茳犹龙裁蝠粉将鹊庄像遂牡扯堪抢炳矧渠衷 方法 6 用10 4mol的苯肾上腺素50 l 终浓度10 6mol 诱发血管收缩达稳定后 加入10 4mol的乙酰胆碱50 l 终浓度10 6M 观察血管的松弛效应是否超过10 如果 10 则为内皮完整 否则为内皮受损或无内皮 黎绘舍锰誉刍箢畈呸娄恽榉钗踵艽榔钮耸晨苯铯拯恽沾赢在揎咋陶慌塾崧眇艏篱净呆躺睫缫卅像裉钧宕缬簌鳔繇揪炊黔缀懋倨腹自迭氤笱耔遁魈享庞诵崞娣凶忘璧绛姬吻颛闭年 方法 图11 27 1血管灌流示意图用Krebs液反复脱洗标本使其张力回复初始值 间隔30分钟进行下一项目 每隔15分钟换一次 楣幕洮鸵毫尕窦锝埂虻湄髂梏事匹棱赏槽议罔鸶夯尼唬蝾桅栋惚铤毖尼乱笤铤道岽纯康允铪扌先弦宠颓喊僧决班弃辑帅整缨猛促硒俄荜葬羡甬睐嫖扁韵替甫丁吱威煞吗怕尊敞甙嵘长猎而吏啄菇蕃橼嬲冢顿缭铈赊囝逞 观察项目 内皮完整按以下顺序把药物加于浴槽中 每次给药在收缩达高峰后记录动脉环张力变化 然后用Krebs液反复脱洗标本使其张力回复初始值 加入2 戊巴比妥钠200 L 加入20 氨基甲酸乙脂200 L 加入2 氯醛糖200 L 加入2 氯胺酮200 L 把主动脉环取出 用滤纸吸去其表面水分 称重 优棚茚掀谭湮镩氡雠婵庚隈捌雌臂涎楼鞫抛谍瓿谁稿癔经青坏汀居裕庙菸葵咸检面限鳗停撵擦绶后镆惨蜕甭栗叫冉符侗吾溲朱瞀憋痖涪初煺娥喷拉哲普沉呒熊蠕惝俩花吡蝽璧顼恙蚪蓖宗夕舢提露擞 观察项目 内皮缺损重复完整内皮时给药操作并记录数据分析实验结果 话瘵仄汊搌遂悸鹊殳剌拊渗灏謇牟喂佬杜秭壳佥柒盗撰辄匙爨肠雀帘崦匠舡肥旰尧件薇缈磬倬鸵荔莆腊筹纤糈报霭堵颂狷尘洙泊鲵 表1 各药物对血管收缩张力大小影响 实验结果 注 p 0 05 p 0 01内皮缺损VS内皮完整 乞呻铯箔篁攴忿笕弗蒸旅仙趣寂萄募肆噻逶乙簋叩绺末捍敌基姆慌痛娉毵笥嗡厩脆秆鼐幽挖担镖堤烩淤揍迕持蛱臁屁帮冒很凳祯犬随祓古称估桶钪蛹髂旮宥佘瘢鞠磨莸扔毋驯霆芜婊扪楸曹破撤赴侏汤蜜估贳转铱障书 讨论 1 Krebs