药物分析维生素类药物的分析PPT课件.ppt

第九章维生素类药物的分析TheAnalysisofVitamines 概述 维生素是维持人体正常生理机能所必需的生物活性物质 如果人体缺少某种维生素 就会引起维生素缺乏症 而影响人体的正常生理机能 例如 VA缺乏 夜盲症VB1缺乏 脚气病 脂溶性 VA VD VE VK等水溶性 B族 VB1 VB2等 VC 烟酸 叶酸 泛酸等 按溶解性分类 1 9 1维生素A的分析 一 结构与性质VA含有共轭多烯醇侧链的环已稀 有多种异构体 R HVA醇VA1R COCH3VA醋酸酯R COC15H31VA棕榈酸酯 VA为油状物 存在于鱼肝脏中 称鱼肝油 不溶于水 有人工合成的 2 国际单位IU 0 344微克维生素 醋酸酯 IU 0 300微克维生素 醇换算 1g维生素 醋酸酯相当于 1g维生素 醇相当于 3 VA1 VA2 去氢VA VA3 去水VA 4 二 鉴别试验1 三氯化锑反应VA在饱和无水三氯化锑的无醇三氯甲烷溶液中显蓝色 渐变成紫红色 P245 注意 在水中三氯化锑水解 必须在绝对无水中进行 2 紫外吸收光谱VA的无水乙醇溶液在326nm有最大吸收 VA 5个共轭双键 在盐酸中加热 生成6个共轭双键的去水VAVA在326nm有一个吸收峰去水VA在350 390nm有三个吸收峰 P247 5 3 TLC 确认醇或酯 是醋酸酯或其他酸酯 例 VA和其标准品用环己烷溶解展开剂 环己烷 乙醚 80 20 板 硅胶G显色 磷钼酸为显色剂Rf VA醇0 VA醋酸酯0 4 VA棕榈酸酯0 7 6 三 含量测定 维生素 中含有稀释用油和其它杂质 所测得的吸光度不是维生素 独有的吸收 对测定有影响 即在三个波长处测得吸光度 进行校正后再计算 称为三点校正法原理 吸光度是维生素A和杂质吸收之和 测得A值需校正 最大吸收为328nm 紫外分光光度法 三点校正法 7 8 方法 1 分别测300 316 328 340 360nm吸光度 求出各波长吸光度与328nm吸光度比值 各比值与P249表中数据对比 2 若比值不超过 0 02可直接用测得A值 3 若比值超出 0 02则A需校正 A 校正 3 52 2A328 A316 A340 4 计算 A 吸光度 C 浓度 g mL L 溶液厚度 cm 9 求效价 每g供试吕中所含维生素A的国际单位 求百分含量 A 吸光度 校正后的吸光度 D 稀释倍数 1900 以环已烷为溶剂时的换算因子 L 比色池厚度 W 取样量 10 9 2维生素B1的分析 一 化学结构与性质维生素B1 氨基嘧啶环和噻唑环通过亚甲基连接成的季铵类化合物 白色结晶 溶于水 显酸性 学名 氯化4 甲基 3 2 甲基 4 氨基 5 嘧啶基 甲基 5 2 羟乙基 噻唑的盐酸盐俗名 盐酸硫胺 11 二 鉴别试验 1 硫色素荧光反应 维生素B1在碱性溶液中 与铁氰化钾氧化成硫色素 在正丁醇中显蓝色荧光 VB1专属反应 用于鉴别和含量测定 12 2 沉淀反应 碘化汞钾 淡黄色沉淀碘 红色沉淀VB1硅钨酸 白色沉淀苦味酸 扇形白色结晶 13 三 含量测定1 非水溶液滴定法 Ch P收录 VB1分子中含有已成盐的伯胺和季铵基团 在非水溶液中 在醋酸汞存在下 均可被高氯酸滴定 溶剂 冰醋酸 醋酸汞指示剂 喹哪定红 亚甲蓝混合指示液滴定剂 高氯酸 0 1mol L 终点 天蓝色摩尔比 VB1 高氯酸 1 2VB1摩尔质量 337 27滴定度T 0 1 1 2 337 27 16 86mg ml 14 2 紫外UV 中国药典 VB1片 方法与片剂含量测定相同 246nm VB1注射液 与液剂相同 246nm 15 9 3维生素C的分析一 化学结构 1 具有内酯结构 碱性下可水解 2 具有烯二醇基 还原性 能够被氧化成去氢抗坏血酸 3 结构与糖类相似 具有糖性质 溶于水 酸性 旋光性 16 D 异抗坏血酸 L 异抗坏血酸 L 抗坏血酸 D 抗坏血酸 4 具有4种光学异构体 其中生理活性最强的是L 抗坏血酸 17 二 鉴别试验1 硝酸银反应 中国药典 烯二醇基具有还原性 可被硝酸银氧化成去氢抗血酸 同时生成黑色的银 2 与2 6 二氯靛酚 染料 反应VC被还原为无色的酚亚胺 18 3 糖的性质VC的结构很象糖结构 具有糖的性质VC 三氯化醋酸或盐酸 水解 脱羧 戊糖 失水 糠醛 加吡咯 加热 蓝色 4 紫外分光光度法 英国药典 VC在盐酸溶液中 243nm最大吸收 19 三 含量测定 1 碘量法 Ch P收录 VC在醋酸条件下 被碘定量氧化 加入淀粉指示剂 蓝色不褪为碘过量 30S内 由消耗碘量计算含量 20 操作 P265 终点颜色 无色 蓝色1ml0 1mol L碘液 1ml 8 806mgC6H8O6加入新沸放冷的水为了减少水中溶解氧的影响 酸性 使VC在空气中氧化速度减慢 VC注射液中常加有亚硫酸盐如NaHSO3作为抗氧剂 21 终点的颜色是溶液由无色变为红色 氧化型 红色 还原型 无色 2 2 6 二氯靛酚滴定法酸性下直接用2 6 二氯靛酚滴定 用滴定剂自身的颜色变化指示终点 不需要另外的指示剂 22 3 高效液相色谱法HPLCP276 23 9 4维生素DVD是一类抗佝偻病维生素的总称 有片剂 注射剂 胶囊等 一 结构 P268 开环麦角甾烯醇 又称麦角骨化酸 VD2 VD3无色针状结晶 旋光性 不溶于水 24 二 鉴别试验1 显色反应 2 维生素D2和D3的区分 25 三 含量测定高效液相色谱法 药典收录 26 名称 消旋 生育酚醋酸酯 异构体生理活性最强 母核 苯骈二氢吡喃衍生物 苯环上有一乙酰化的酚羟基侧链 脂肪烷烃性质 不溶于水 油状 微黄色液体 9 5维生素E 称为生育酚 一 结构 苯并二氢吡喃醇衍生物 27 二 鉴别试验1 硝酸反应 药典收录 VE在硝酸条件下 水解生成生育酚 生育酚被硝酸氧化为邻醌结构的生育红 VE HNO3 水解生成生育酚 生育红 橙红色 2 水解后氧化反应 VE在碱性条件下水解 得 生育酚 在联吡啶和三氯化铁试液的作用下 反应产生血红色配离子 VE KOH 生育酚 加入三氯化铁 生育醌 铁配合物 血红色 28 3 UV吸收 VE的0 01 无水乙醇液 max 284nm min 254nm4 红外光谱 中国药典 三 杂质检查检查游离生育酚 ChP2005铈量法 用Ce SO4 2 0 01mol L 滴定 指示剂 二苯胺终点 亮黄 灰紫消耗Ce SO4 2液不得超过1 0ml 29 1 铈量法 中国药典 原理 VE用硫酸加热回流 水解成生育酚 用硫酸铈定量地氧化为对一生育醌 过量的硫酸铈氧化二苯胺指示剂而指示滴定终点 终点 亮黄 灰紫 需作空白试验 四 含量测定 2 气相色谱法 Chp2005 3 高效液相色谱法日本药局方 JP13 30 练习题 维生素AD胶丸中维生素A的含量测定已知 平均胶丸重为0 0815g维生素A的标示量为10000IU 丸取样 测定数据如下表 求 维生素A的标示百分含量 31 首先要求样品的 32 计算吸收度比值和吸收度比值差 填于上表 由此可知 应该用测得的328nm处的吸收度计算 然后计算校正吸收度与未校正吸收度相差的百分数 由结果知 需计算校正吸收度 33 维生素A的标示含量 34 维生素A醋酸酯胶丸含量测定 取内容物39 1mg 加环己烷溶解并稀释成100ml 在下列五个波长处测得吸收度A值如下 已知 平均胶丸内容物重为0 08736g