《香菇多糖制作技术》PPT课件.ppt

香菇多糖提取 徐扬2012274141精化1221 一 认识产品二 追根求源三 生产工艺 一 认识产品 一 认识香菇多糖 1 香菇多糖分子式 2 分子结构 3 香菇多糖性质1 物理性质 溶于碱溶液或甲酸 微溶于热水或二甲亚砜 不溶于冷水 醇 乙醚 氯仿 吡啶或六甲基磷酰胺 对硫酸和盐酸稳定 D20 13 5 14 5 2 氢氧化钠 D20 19 5 21 5 10 氢氧化钠 2 化学性质 3 生物学性质 1 香菇多糖的抗肿瘤活性 香菇多糖具有抗肿瘤作用 它没有化疗药物的毒副作用 香菇多糖进入抗体后诱导产生一种具有免疫活性的细胞因子 在这些细胞因子的综合作用下 机体免疫系统增强 对肿瘤细胞起防御与杀伤作用 香菇多糖通过激活巨噬细胞 增强抗体依赖性细胞诱导的细胞毒 ADDC 发挥抗肿瘤活性 此外 香菇多糖还能使肿瘤部位的血管扩张和出血 导致肿瘤出血坏死和完全退化 2 香菇多糖的免疫调节 香菇多糖的免疫调节作用是其生物活性的重要基础 香菇多糖是典型的T细胞激活剂 促进白细胞介素的产生 还能促进单核巨噬细胞的功能 被认为是一种特殊免疫增强剂 其免疫作用特点在于它能促进淋巴细胞活化因子 LAE 的产生 释放各种辅助性T细胞因子 增强宿主腹腔巨噬细胞吞噬率 恢复或刺激辅助性T细胞的功能 另外 香菇多糖还能促进抗体生成 抑制巨噬细胞释放 3 香菇多糖的抗病毒活性 香菇含有一种双链核糖核酸 能刺激人体网状细胞及白血球释放干扰素 而干扰素具有抗病毒作用 香菇菌丝体提取物可抑制细胞的吸附疱疹病毒 从而防治单纯疱疹病毒 巨细胞病毒引起的各类疾病 4 香菇多糖的功能 1 香菇多糖具有免疫调节和抗肿瘤的作用 香菇多糖对调节人体免疫功能的T细胞有促进作用 刺激抗体的形成和活化巨噬细胞 降低甲基胆蒽诱发肿瘤的能力 故对癌细胞有强烈的抑制作用 香菇多糖被称为免疫学中的外周疗法 Schemeefferent 而应用于抗肿瘤的临床上 在人体中 香菇多糖能增加DNA的合成和外周单核细胞免疫蛋白的产生 2 香菇多糖的护肝解毒作用 香菇多糖可显著降低 l4 硫代乙酰胺和强的松龙引起的 升高 并可拮抗 l4肝损伤肝糖元含量降低 具有保肝解毒作用 3 香菇还含有双链核糖核酸 能诱导产生干扰素 具有抗病毒能力 香菇提取物具有抗血小板凝集作用 5 香菇多糖的质量标准 二追根求源 1诞生 1968年日本千原吴郎首先利用热水从香菇子实体中浸提出6种胞外LNT51970年Chihard和Sasaki用热水浸提结合有机溶剂沉淀从香菇中提取到另外4种多糖 1986年获日本厚生省批准生产并外销 1988年我国卫生部批准进口 现今我国已有几家国产LNT上市 如南京振中和福州梅峰等 香菇多糖由于是单一组分 质量易于控制 且具有疗效高 剂量低 毒副作用小等优点 受到医生的青睐 近年来 LNT的广泛药理作用研究取得了很大进展 2 产品及技术的发展过程 香菇是我国传统的食用菌品种 近年来产区由南到北分布较广 产量占全世界香菇总量的78 跃居榜首 产品远销欧美和东南亚等117个国家和地区 在全球香菇外销市场上占92 随着生活水平提高 世界卫生组织提出的 一荤 一素 一菌 的科学膳食导向 已被越来越多的人接受 国人对绿色无公害食品的追求越来越高 历时800多年的原木砍花法 以其独到的砍花和 惊蕈 术及悠久的历史文化促进了中国与亚洲地区香菇业的发展 尤其是近半个世纪以来 随着我国香菇产业 南菇北移 战略的实施 香菇产区由南向北不断延伸 种植面积不断扩大 形成了产业化 专业化 标准化的生产格局 各地在香菇省力 低耗 高产 优质栽培技术上形成了许多突破 3 产品的生产方法比较 1 热水浸提发2 稀酸浸提发3 酶解法4 微波法5 超声波6 深层发酵法7 复合法8 超临界CO2萃取 3 产品的生产方法比较 通过对香菇多糖的热水浸提法 酸浸提法 复合酶浸提法 复合酶解 酸处理结合热水浸提法等几种提取方法进行了研究比较 实验结果表明 提取率高且浸提效果理想的方法是复合酶解 酸处理结合热水浸提法 此法能显著提高可溶于热水的多糖及还原性寡糖的浸提率 香菇多糖的浸提率达8 96 同时 在单因素实验条件的基础上 针对复合酶解时溶液的pH值 复合酶解时间 热水浸提温度 热水浸提时间进行了四因素三水平的正交实验 并通过极差分析 确定了利用复合酶解 酸处理结合热水浸提法提取香菇多糖的最佳提取条件 复合酶解时溶液的pH值为5 0 复合酶解时间为80min 热水浸提温度为90 热水浸提时间为90min 4 现在常用的生产方法 发酵法 利用纤维素酶 蛋白酶把细胞壁里面的香菇多糖流出 三 生产工艺 1 原谅及要求 以自然界的香菇为原料 氯仿 无水乙醇 丙酮 乙醚 苯酚 硫酸试剂 苯酚3g浓硫酸5ml 溶于95ml无水乙醇中 2 生产原理 利用深层液体发酵培养香菇菌丝体后 从发酵液中提取菌丝体 从而得到胞内香菇菌丝体 再从菌丝体中 利用它在酒精和水 及酶液的不同溶解度来提取胞内多糖 将菌丝体抽提 浓缩 离心 取上清液脱色透析 透析液再浓缩 离心 最后用溶液沉淀 洗涤干燥而成 3 工艺流程图 下图 3工艺流程 4 工艺流程说明及主要工艺参数香菇菌丝生长的培养基分别为培养基A 8 马铃薯20 葡萄糖2 麸皮2 玉米粉2 蛋白胨0 2 MgSO 47H 2O0 05 KH 2PO 40 1 维生素B 10 001 琼脂2 和培养基A 10 马铃薯20 葡萄糖2 麸皮5 酵母膏0 25 蛋白胨0 1 MgSO 47H 2O0 05 KH 2PO 40 1 琼脂2 香菇生长的液体种子培养基为 玉米粉4 蔗糖2 5 酵母膏0 3 KH 2PO 40 1 MgSO 47H 2O0 05 维生素B 10 005 pH5 25 选取2 葡萄糖和2 5 N溶性淀粉为最佳碳源 0 1 酵母膏为最适宜氮源 KH 2PO 40 1 MgSO 47H 2O0 05 和维生素B 10 001 最有利于液体发酵爪哇香菇菌丝体产胞内多糖 最终优化出的适于爪哇香菇菌丝体液体发酵产胞内多糖的培养基为 2 葡萄糖 2 5 可溶性淀粉 0 1 酵母膏 KH 2PO 40 1 MgSO 47H 2O0 05 和维生素B 10 001 5 主要设备 100ml容量瓶 6个50ml容量瓶 玻璃棒 蒸馏装置 温度计 沸石 三口烧瓶 冷凝管 烧杯若干 锥形瓶若干 棕色瓶一个 抽滤瓶 1 2 5 10ml吸液管 电子天平 真空干燥管 恒温水浴锅 紫外分光光度计 粉碎机 超高压等静压机 真空泵 台式恒温振荡器 台式离心机 6 生产的关键过程及关键技术 通过一系列单因素试验考察了培养基起始pH 摇瓶装液量 摇床振荡频率以及培养天数对香菇液体发酵产胞内多糖的影响 试验结果表明 起始pH4 5 250ml三角瓶装液量50ml 100ml 摇床振荡频率130r min 培养9天