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第三章第三章 病毒和亚病毒因子病毒和亚病毒因子 重要名词 1 烈性噬菌体烈性噬菌体 感染细胞后能在寄主细胞内增殖 产生大量子代噬菌体并引起细菌裂解的噬菌体称为烈性 噬菌体 2 噬菌斑形成单位噬菌斑形成单位 效价 感染中心数 表示每 ml 样品中所含有的具侵染性的噬菌体粒子数 3 朊病毒朊病毒 又称 普里昂 或蛋白侵染子 是一类不含核酸的传染性蛋白质分子 因能引起宿主体内现成 的同类蛋白质分子发生与其相似的感应性构象变化 从而可使宿主致病 复习思考题 1 什么是烈性噬菌体 试述其裂解性增值周期 烈性噬菌体 感染细胞后能在寄主细胞内增殖 产生大量子代噬菌体并引起细菌裂解的噬菌体称为烈性 噬菌体 吸附 噬菌体尾丝散开 固着于特异性受点上 侵入 尾鞘收缩 尾管推出并插入到细胞壁和膜中 头部的核酸注入到宿主细胞中 而蛋白质衣壳留在细胞壁外 增殖 增殖过程包括核酸的复制和蛋白 质 的生物合成 注入细胞的核酸操纵宿主细胞代谢机构 以寄主个体及细胞降解物和培养基介质为原料 大 量复制噬菌体核酸 并合成蛋白质外壳 成熟 装配 寄主细胞合成噬菌体壳体 T4 噬菌体包括头部 尾部 并组装成完整的噬菌体粒子 裂解 释放 子代噬菌体成熟后 脂肪酶和溶菌酶促进宿主细胞 裂解 从而释放出大量子代噬菌体 2 什么是效价 测定噬菌体效价的方法有几种 5 种 最常用的是什么方法 双层平板法 其优点如何 效价 每 ml 样品中所含有的具侵染性的噬菌体粒子数 测定方法 5 种 斑点试验法 液体稀释管法 单层平板法 双层平板法 快速玻片法 双层平板法 精确且常用 加了底层培养基后 可弥补培养基底部不平的缺陷 可使所有的噬菌斑都位 于近乎同一平面上 因而大小一致 边缘清晰且无重叠现象 又因上层培养基中的琼脂较稀 故可形成形 态较大 特征较明显以及便于观察和计数的噬菌斑 3 简述用双层琼脂平板发测定噬菌体效价的基本原理和主要操作步骤 基本原理 在涂布有敏感宿主细胞的固体培养基表面 若接种上相应噬菌体的稀释液 其中每一噬菌体 离子由于先侵染和裂解一个细胞 然后以此为中心 再反反复复侵染和裂解周围大量的细胞 结果就会在 菌苔上形成一个具有一定形状 大小 边缘和透明度的噬菌斑 主要操作步骤 预先分别配制含 2 和 1 琼脂的底层培养基和上层培养基 先用底层培养基在培养皿上 浇一层平板 待凝固后 再把预先融化并冷却到 45 以下 加有较浓的敏感宿主和一定体积待测噬菌体 样品的上层培养基 在试管中摇匀后 立即到在底层培养基上铺平待凝 然后再 37 下保温 一般经 10 余小时后即可对噬菌斑计数 4 某微生物发酵厂发酵液和发酵状态出现疑似感染有噬菌体的异常情况 试讨论这些异常现象有哪些 并 设计一个简便易行的方法去证实之 现象 1 发酵周期明显延长 2 碳源消耗缓慢 3 发酵液清淡 4 发酵产物形成缓慢或根本不形 成 5 噬菌体检测会发现大量噬菌斑 6 电镜可见噬菌斑 方法 噬菌体检测会发现大量噬菌斑 电镜可见噬菌体 5 病毒在基因工程中有何应用 试对其在动物 植物和微生物育种中的作用各举一例 并加以简单的说明 点 在基因工程操作中 把外源目的基因导入受体细胞并使之表达的中介体 称为载体 除原核生物的质粒 外 病毒是最好的载体 1 噬菌体作为原核生物基因工程的载体 E coli 的 噬菌体是一种含线性 dsDNA 的温和噬菌体 在 其基因组中 约有一半是对自身生命活动十分必要的 必要基因 另一半则是对自身生命活动无重大影 响的 非必要基因 因此可被外源基因取代而建成良好的基因工程载体 2 动物 DNA 病毒作为动物基因工程的载体 SV40 猴病毒 40 是一种寄生在猴细胞中的 DNA 病毒 能使实验动物致癌 其生活周期包括引起宿主 细胞裂解和转化成癌细胞两个阶段 SV DNA 是一个复制子 当侵染其宿主细胞后 既能自我复制 也能 整合在宿主的染色体上 3 植物 DNA 病毒作为植物基因工程的载体 花椰菜花叶病毒是一种由昆虫传播的侵染十字花科植物的病毒 含 8kb 的环状 dsDNA 存在多种限制性 内切酶的切点 在其非必要基因区内插入外源 DNA 后 所形成的重组体仍具侵染性 但由于它不能与宿 主核染色体组发生整合 因此还无法获得遗传性稳定的转基因植株 第四章 微生物的营养和培养基 重要名词 1 光能无机营养型 以光为能源 无机物为供氢体 CO2为基本碳源的微生物 光能有机营养型 以光为能源 有机物为供氢体 CO2及简单有机物为碳源的微生物 化能有机营养型 以有机物为能源 有机物为供氢体 有机物为基本碳源的微生物 化能无机营养型 有无机物为能源 无机物为供氢体 CO2为基本碳源的微生物 2 单细胞蛋白 单细胞蛋白 也叫微生物蛋白 它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体 3 鉴别性培养基 一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂 从而达到只须用 肉眼辨别颜色就能方便的从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基 4 伊红美蓝乳糖培养基 EMB 培养基中的伊红和美蓝两种苯胺染料可抑制 G 细菌和一些 G 细菌 在低酸 度下 这两种染料会结合并形成沉淀 起着产酸指示剂的作用 培养基含有伊红 美蓝以及乳糖 复习思考题 1 试以能源为主 碳源为辅对微生物的营养方式进行分类 并举例说明之 P92 表 4 4 营养类型能源氢供体基本碳源实例 光能无机营养型 光能自养型 光无机物CO2蓝细菌 紫硫细菌 绿硫细菌 藻类 光能有机营养型 光能异养型 光有机物CO2及简单有机物紫色非硫细菌 化能无机营养型 化能自养型 无机物无机物CO2硝化细菌 硫化细 菌 铁细菌 氢细 菌 硫磺细菌 化能有机营养型 化能异养型 有机物有机物有机物绝大多数原核生物 全部真菌和原生动 物 2 什么是自养微生物 它有几种类型 试举例说明 自养微生物 凡以无机碳源做唯一或主要碳源的微生物 根据生长时能量的来源不同 可分为光能自养型和化能自养型 光能自养型包括 蓝细菌 紫硫细菌 绿硫细菌 藻类 化能自养型包括 硝化细菌 硫化细菌 铁细菌 氢细菌 硫磺细菌等 3 固体培养基有何用途 试列一表对书中介绍的 4 种固体培养基作一比较 固体培养基的用途 在科学研究和生产实践中用途很广 可用于 菌种分离 鉴定 菌落计数 检验杂 菌 选种 育种 菌种保藏 生物活性物质的生物测定 获取大量真菌孢子 及用于微生物的固体培养和 大规模生产等 四种固体培养基 可逆凝固培养基 非可逆凝固培养基 天然固态培养基 滤膜 列表比较 可逆凝固培养基遇热可融化 冷却后则凝固的培养基 通常加入 1 2 琼脂 5 12 明胶作凝固剂而 制成 非可逆凝固培养基凝固后就不能再重新融化的培养基 加入血清 无机硅胶的培养基 天然固态培养基由天然固体机质制成的培养基 米糠 麸皮 木屑 草粉 纤维 马铃薯片 胡萝 卜条 各种粮食 动植物组织等配制或直接制成的培养基 滤膜将坚韧且带有无数微孔的醋酸纤维薄膜制成圆片 覆盖在营养琼脂或浸有液体培养 基的纤维素衬垫上 就形成了具有固体培养基性质的培养条件 4 什么叫鉴别性培养基 试以 EMB 为例分析其具有鉴别性功能的原因 鉴别性培养基 一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂 从而达到只须用 肉眼辨别颜色就能方便的从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基 原因 培养基中的指示剂 伊红 美蓝 此两种染料可抑制 G 细菌和一些难培养的 G 细菌 在低酸度 下 这两种染料会结合形成沉淀 起着产酸指示剂的作用 因此多种细菌会在 EMB 培养基上产生易于用 肉眼识别的多种特征菌落 大肠杆菌分解乳酸产生大量混合酸 染上酸性染料伊红 又因伊红与美蓝结 合 故使菌落染上紫色 产酸能力弱的菌的菌落也有相应棕色 第五章 微生物的新陈代谢 重要名词 1 发酵 广义的发酵 泛指任何利用好氧性或厌氧性微生物生产有用代谢产物或食品 饮料的一类生产方 式 狭义的发酵 在无氧等外源氢受体的条件下 底物脱氢后所产生的还原力 H 未经呼吸链传递而直 接交某一内源性中间代谢物接受 以实现底物水平磷酸化产能的一类生物氧化反应 2 同型乳酸发酵 葡萄糖发酵后产物只有乳酸的发酵称为同型乳酸发酵 3 异型乳酸发酵 葡萄糖经发酵后除主要产生乳酸外 还产生乙醇 乙酸和二氧化碳等多种产物 4 次生代谢物 指某些微生物生长到稳定期前后 以结构简单 代谢途径明确 产量较大的初生代谢物为 前体 通过复杂的次生代谢途径所合成的各种结构复杂的化合物 复习思考题 1 在化能异养微生物的生物氧化过程中 其基质的脱氢和产能的途径主要有哪几条 试列表比较各途径的 主要特点 4 条脱氢途径 EMP 途径 HMP 途径 ED 途径 TCA 循环 特点 EMP 当葡萄糖转化成 1 6 二磷酸果糖后 在果糖二磷酸醛缩酶作用下 裂解为两 个 3 化合物 再由此转化为 2 分子丙酮酸 HMP 当葡萄糖经一次磷酸化脱氢生成 6 磷酸葡萄糖酸后 在 6 磷酸葡萄糖酸脱酶作用下 再次脱氢 降解为 1 分子 CO2 和 1 分子磷酸戊糖 ED 是少数 EMP 途径不完整的细菌所特有的利用葡萄糖的替代途径 一分子葡萄糖经 ED 途径可生 成两个丙酮酸并净生成一个 ATP 一个 NADH H 和一个 NADPH H TCA 氧虽不直接参与其中反应 但必须在有氧条件下运转 丙酮酸在进入三羧酸循环之先要脱 羧生成乙酰 CoA 乙酰 CoA 和草酰乙酸缩合成柠檬酸再进入三羧酸循环 循环的结果是乙酰 CoA 被 彻底氧化成 CO2 和 H2O 每氧化 1 分子的乙酰 CoA 可产生 12 分子的 ATP 草酰乙酸参与反应而本 身并不消耗 产能效率极高 TCA 位于一切分解代谢和合成代谢中的枢纽地位 2 试述 EMP 途径在微生物生命活动中的重要性及其与人类生产实践的关系 P108 供应 ATP 形式的能量和 NADH2形式的还原力 是连接其它几个重要代谢途径的桥梁 包括三羧酸循 环 TCA HMP 途径和 ED 途径等 为生物合成提供多种中间代谢物 通过逆向反应可进行多糖合成 若从 EMP 途径与人类生产实践的关系来看 则它与乙醇 乳酸 甘油 丙酮和丁醇等的发酵生产关系密 切 3 试述 ED 途径在微生物生命活动中的功能 并说出它与人类生产实践的关系 在微生物生命活动中的功能 ED 途径是少数 EMP 途径不完整的细菌所特有的利用葡萄糖的替代途径 由 于它可与 EMP 途径 HMP 途径和 TCA 循环等代谢途径相连 故可互相协调 满足微生物对能量 还原力 和不同中间代谢产物的需要 与人类生产实践的关系 细菌酒精发酵可用于工业生产 4 试列表比较由 EMP 途径中的丙酮酸出发的 6 条发酵途径 产物和代表菌 详见 P118 6 条发酵途径发酵途径产物代表菌 同型酒精发酵 同型乳酸发酵 丙酸发酵 混合酸发酵 2 3 丁二酸发酵 丁酸型发酵 5 试列表比较同型乳酸发酵和异型乳酸发酵间的差别 P121 表格 类型途径产物 1 葡萄糖产物 1 葡萄糖菌种代表 同型EMP2 乳酸2ATP德氏乳杆菌 粪肠球菌 1 乳酸 1 乙醇 1CO21ATP肠膜明串珠菌 发酵乳杆菌 1 乳酸 1 乙酸 1CO22ATP短乳杆菌 异型HMP 1 乳酸 1 5 乙酸2 5ATP两歧双歧杆菌 6 Stickland 反应存在于哪些微生物中 反映的生化机制如何 微生物 少数厌氧梭菌 例如生孢梭菌 由氨基酸发酵产能 Stickland 反应 少数厌氧梭菌以一种氨基酸作为底物脱氢 氢供体 以另一种 氨基酸作氢受体而实现生物氧化产能的独特发酵方式 产能效率很低 每分子氨基酸仅产 1 ATP 7 试简述各种类型好氧性固氮菌保护固氮酶免受氧损害的机制 好氧性自生固氮菌的抗氧保护机制 1 呼吸保护 固氮菌科的菌种能以极强的呼吸作用迅速将周围环境中的氧消耗掉 使细胞周围微环境 处于低氧状态 保护固氮酶 2 构象保护 在高氧分压条件下 维涅兰德固氮菌和褐球固氮菌等的固氮酶能形成一个无固氮活性但 能防止氧害的特殊构象 蓝细菌固氮酶的抗氧保护机制 蓝细菌在光照下会因光合作用放出的氧而使细胞内氧浓度急剧增高 1 分化出特殊的还原性异形胞 缺乏产氧光合系统 脱氢酶和氢化酶的活性高 维持很强的还原 态 SOD 活性高 解除氧的毒害 呼吸强度高 可消耗过多的氧 2 非异形胞蓝细菌固氮酶的保护 能通过将固氮作用与光合作用进行时间上的分隔来达到 通过束 状群体中央处于厌氧环境下的细胞失去能产氧的光合系统 II 以便于进行固氮反应 通过提高过氧化物酶 和 SOD 的活性来除去有毒过氧化合物 豆科植物根瘤菌的抗氧保护机制 只有当严格控制在微好氧条件下时 才能固氮 根瘤菌还能在根毛皮层细胞内迅速分裂繁殖 随后分 化为膨大而形状各异 不能繁殖 但有很强固氮活性的类菌体 许多类菌体被包在一层类菌体周膜中 膜 的内外有能与 O2 结合的豆血红蛋白 8 青霉素为何只能抑制代谢旺盛的细菌 其抑制机制如何 青霉素是肽聚糖单体五肽尾末端的 D 丙氨酰 D 丙氨酸的结构类似物 她们两者可相互竞争转肽酶的活力 中心 转肽酶一旦被青霉素结合 前后 2 个肽聚糖单体间不能形成肽桥 因此合成的肽聚糖是缺乏机械强 度的 次品 由此产生了原生质体和球状体之类的细胞壁缺损细菌 当它们处于不利的环境下时 极易 裂解死亡 因为青霉素的作用机制是抑制肽聚糖分子中肽桥的生物合成 因此对处于生长繁殖旺盛阶段的 细菌具有明显的抑制作用 相反 对处于生长停滞状态的休止细胞 却无抑制作用 9 微生物的代谢调节现实哪些特点 有哪两类方式可以调控代谢流 请举例说明之 第六章 微生物的生长及其控制 重要名词 1 cfu 菌落形成单位 一定菌样中的单个微生物经培养后 形成的单菌落 根据每皿上形成的 cfu 数乘 上稀释度即可推算出菌样的含菌数 2 连续培养 是指向培养容器中连续流加新鲜培养液 使微生物的液体培养物长期维持稳定 高速生长状 态的一种溢流培养技术 故它又称开放培养 3 恒浊器 这是一种根据培养器内微生物的生长密度 并借光电控制系统来控制培养液流速 以取得菌体 密度高 生长速率恒定的微生物细胞的连续培养器 4 恒化器 与恒浊器相反 恒化器是一种设法使培养液的流速保持不变 并使微生物始终在低于其最高生 长速率的条件下进行生长繁殖的连续培养装置 这是一种通过控制某一营养物的浓度 使其始终成为生长 限制因子的反人条件下达成的 因而可称为外控制式的连续培养装置 5 连续发酵 连续培养用于生产实践 6 最适生长温度 某菌分裂代时最短或生长速率最高时的培养温度 7 灭菌 采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施 称为灭菌 8 消毒 是一种采用较温和的理化因素 仅杀死物体表面的病原菌而对被消毒对象本身基本无害的措施 9 防腐 利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖 通过制菌作用防止食品 生物制品等对象发 生霉腐的措施 10 化疗 化学治疗 利用对病原菌具高度毒力而对宿主基本无毒的化学物质来抑制病原微生物的生长繁 殖 达到治疗的措施 11 巴氏消毒法 一种低温湿热消毒法 用较低的温度来杀灭物料中的无芽孢病原菌 又不影响其原有风 味 适于牛奶 啤酒 果酒 酱油等 该法一般是将待消毒的液体食品置于 62 处理 30min 然后迅速冷 却 即可达到消毒的目的 12 最低抑制浓度 一定条件下 某化学药剂完全抑制特定微生物生长时的最低浓度 13 半致死剂量 一定条件下 某化学药剂能杀死 50 实验动物的剂量 14 最低致死剂量 一定条件下 某化学药物能引起实验动物群体 100 死亡率的最低剂量 15 抗生素 是由某些微生物或其他生物合成或半合成的一类次级代谢产物或其人工衍生物 它们在很低 浓度是就能抑制或影响它种生物的生命活动 如杀死微生物或抑制其生长 16 生物素药素 具多种生理活性的微生物次生代谢物 比抗生素疗效更为广泛 如 酶抑制剂 免疫调 节剂 受体拮抗剂 抗氧化剂等 复习思考题 1 延滞期有何特点 实践上如何缩短它 特点 生长速率常数 R 0 细胞形态变大或增大 细胞内 RNA 特别是 rRNA 含量增高 原生质噬碱性增强 合成代谢活跃 核糖体 酶类 ATP 合成加快 易产生诱导酶 对外界不良条件敏感 如氯化钠浓度 温度 抗生素等化学药物 2 指数期有何特点 处于此期的微生物有何应用 生长速率常数 R 最大 即代时最短 细胞进行平衡增长 菌体大小 形态 生理特征等比较一致 酶系活跃 代谢最旺盛 细胞对理化因素较敏感 指数期的微生物具有整个群体的生理特性一致 细胞各成分平衡增长和生长速率恒定等特点 是 用作代谢 生理等研究的良好材料 是增殖噬菌体的最适宿主 是发酵工业中用种子的最佳材料 进行染色 形态观察等的良好材料 3 稳定期有何特点 稳定期到来的原因有哪些 稳定期的特点 R 0 即处于新繁殖的细胞数与衰亡的细胞数相等 或正生长与负生长相等的动态平衡之中 培养物 中的细胞数目达到最高值 菌体产量达到了最高点 菌体产量与营养物质的消耗间呈现出有规律的比例关系 可用生长产量常数 Y 生长得率来表示 表示微生物对基质利用效率的高低 Y 菌体干重 消耗营养物质的浓度 细胞内开始 积聚糖原 异染颗粒和脂肪等内含物 芽孢杆菌一般在这时开始形成芽孢 通过复杂的次生代谢途径合成抗生素等对人类有用的各种次生代谢物 稳定期产物 稳定期到来的原因 营养物尤其是生长是限制因子耗尽 营养物的比例失调 酸 醇 毒素或 H2O2 等有害代谢产物的累积 pH 氧化还原势等物理化学条件越来越不适宜 等等 4 试列表比较两类连续培养器 恒浊器和恒化器的特点和应用范围 装置控制对象培养基培养基流速生长速率产物应用范围 恒浊器菌体密度 内控制 无限制生长 因子 不恒定最高速率大量菌体或与菌 体相平行的代谢 产物 生产为主 恒化器培养基流速 外控制 有限制生长 因子 恒定低于最高速率不同生长速率的 菌体 实验室为主 恒浊器 这是一种根据培养器内微生物的生长密度 并借光电控制系统来控制培养液流速 以取得菌体密 度高 生长速率恒定的微生物细胞的连续培养器 恒化器 与恒浊器相反 恒化器是一种设法使培养液的流速保持不变 并使微生物始终在低于其最高生长 速率的条件下进行生长繁殖的连续培养装置 这是一种通过控制某一营养物的浓度 使其始终成为生长限 制因子的反人条件下达成的 因而可称为外控制式的连续培养装置 5 试列表比较灭菌 消毒 防腐和化疗的特点 并各举两三个实例加以说明 比较项目灭菌消毒防腐化疗 处理因素强理 化因素理 化因素理 化因素化学治疗剂 处理对象任何物体内外生物体表 酒 乳等有机质物体内外宿主体内 微生物类型一切微生物有关病原体一切微生物有关病原体 对微生物作用彻底灭杀杀死或抑制抑制或杀死抑制或杀死 实例加压蒸汽灭菌 辐射灭菌 化学 杀菌剂 70 酒精消毒 巴氏消毒 法 冷藏 干燥 糖渍 盐腌 缺氧 化学 防腐剂 抗生素 磺胺药 生 物药物素 6 试以磺胺及其增效剂 TMF 为例 说明这类化学治疗剂的作用机制 磺胺的结构与细菌的一种生长因子对氨基苯甲酸 PABA 高度相似 故是它的代谢类似 因此两者间会 发生竞争性拮抗作用 不少细菌必须由外界提供 PABA 作生长因子 以合成其代谢中不可缺少的重要辅酶 具有转移一碳基功能的四氢叶酸 THFA 而 PABA 就是它结构的一个组分 第七章 微生物的遗传变异和育种 重要名词 1 F 质粒 致育因子 性因子 是 E coli 等细菌决定性别并有转移能力的质粒 2 Ti 质粒 即诱癌质粒 存在于根癌杆菌中 可引起许多双子叶植物根癌 3 营养缺陷型 某一野生型菌株因发生基因突变而而丧失合成一种或几种生长因子 碱基或氨基酸等能力 因而不能再在基本培养基上正常生长繁殖的变异类型 4 艾姆斯试验 是一种利用细菌营养缺陷型的回复突变来检测环境或食品中是否存在化学致癌剂的简便有 效方法 5 基本培养基 仅能满足某微生物的野生型菌株生长所需要的最低成分的组合培养基 6 完全培养基 凡可满足某微生物一切营养缺陷型菌株营养需要的天然或半组合培养基 7 补充培养基 A 或 B 凡只能满足相应的营养缺陷型突变株生长需要的组合或半组合培养基 8 转化 受体菌直接吸收供体菌的 DNA 片段并把它整合到自己的基因组中 而获得供体菌部分遗传性状的 现象 9 感受态 受体细胞最易接受外源 DNA 片段并能实现转化的一种生理状态 10 转导 通过缺陷噬菌体的媒介 把供体细胞中的小片段 DNA 携带到受体细胞中 通过交换与整合 使 后者获得前者部分遗传性状的现象 11 接合 供体菌 F 通过性毛菌与受体菌 F 直接接触 把 F 质粒或其携带的不同长度的核基因组片 段传递给后者 并使其获得若干新遗传性状的现象 12 原生质体融合 通过人为的方法 使遗传性状不同的两个细胞的原生质体进行融合 借以获得兼有双 亲遗传性状的稳定重组子的过程 复习思考题 1 质粒有何特点 主要的质粒可分几类 各有那些理论或实际意义 可用表格式比较 形状大小 超螺旋结构 106 108Da 1 核基因组大小 数量 每个菌体内有一个或几个 或很多 质粒上携带有某些核基因组上所没有的基因 使原核生物的生长繁殖过程中增添了一些特殊功能 如 接合 产毒 抗药 固氮 产特殊酶 降解毒物等 是一种独立存在于细胞内的复制子 严紧型复制控制 复制行为与核染色体的复制同步 松弛型复制 控制 复制行为与核染色体的复制不同步 少数质粒可在不同菌株间转移 如 F 因子 R 因子 质粒消除 因某些理化因素的影响致使质粒复制受抑而核染色体的复制仍继续进行 从而引起子代细 胞中不带质粒的现象 有些质粒具有与核染色体整合和脱离的功能 附加体 质粒还有重组的功能 可在质粒与质粒间 质粒与核染色体间发生基因重组 可用作基因工程的载体 几种典型的质粒 七种 F 因子 fertility factor 致育因子 性因子 是 E coli 等细菌决定性别并有转移能力的质粒 R 因子 resistance factor 又称 R 质粒 存在于某些肠道细菌中的抗药性质粒 这些细菌不仅能抗多 种抗生素等药物 抗重金属等离子 汞 镉 镍 钴 锌 砷 还能把抗药基因传递到其他肠道细菌中 Col 因子 colicinogenic factor 大肠杆菌素质粒 大肠杆菌素因子 使 E coli 等细菌产生大肠杆菌素等 细菌素 具有通过抑制复制 转录 转译或能量代谢等方式专一地抑制或杀死其他肠道细菌生长 Ti 质粒 即诱癌质粒 存在于根癌杆菌中 可引起许多双子叶植物根癌 Ri 质粒 发根土壤杆菌或发根农杆菌中 可侵染双子叶植物的根部 并诱生大量毛状的不定根 巨大质粒 mega 质粒 根瘤菌中 其上有一系列与固氮相关的基因 降解性质粒 代谢质粒 假单胞菌中发现 可为降解一系列复杂有机物的酶编码 在污水处理 环 境保护等方面有特有作用 2 什么是 Luria 的变量试验 试图示其过程并指出该实验的关键创新点 P200 3 试述用 Ames 法检测微量致癌 致突变 致畸变物质的理论依据 方法要点和优缺点 利用回变检测致癌剂 艾姆斯试验法 艾姆斯试验是一种利用细菌营养缺陷型的回复突变来检测环境或食品中是否存在化学致癌剂的简便有效 方法 原理 致癌物与诱变剂具有很高的相关性 能提高营养缺陷型的回复突变率的可疑物是诱变剂 所以很 可能是致癌物 方法 在含待测可疑 三致 物的试样中加入鼠肝匀浆 经一段时间保温后 吸入滤纸片中 然后将滤 纸片放置于上述平板中央培养 结果 无大量菌落产生 说明不含诱变剂 在纸片周围有一抑菌圈 其外周出现大量菌落 说明试样中有某种高浓度的诱变剂存在 在纸片周围长有大量菌落 说明试样中 有浓度适当的诱变剂存在 优点 艾姆斯试验已广泛用于检测食品 饮料 药物 饮水和环境等试样中的致癌物 与繁琐的动物实 验相比 此法具有简便快速准确和省费用等优点 4 举例说明在微生物诱变育种工作中 采用高效筛选方案和方法的重要性 5 试用表解法概括一下筛选营养缺陷型菌株的主要步骤和方法 一般经过诱变 淘汰野生型 检出和鉴定营养缺陷型 4 个环节 第一步 诱变
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