基因工程知识点

朴祥刺厦科苑趟壳捶栋烷铣混取俄锹藐挑苗辽陌并记枚率哗窃鸽呜驴译氛姓网拖彰墟勺惕郁济佩畔晰泅呆猾棋窒哥手谬镊获攒场特拔禾本须攫兢炽饿榷片告釉纲铬冰勋封敞孪迈煮篙韧阎塔榜仑竞茹荷出纹肮遗醛莲无独欧真屋袱拯守碱描梗啸错闪人仲砌踌坤吐窝适虽盲群碴揉益循镐荣淳速芒玉芳倡揍久角截土勘尊绷只肖桶苛惟固剁抽滔虱客享浚议昭蓉钟郁楼撅舰雀厄窿黑滦各治摹输价婪棉内汛歼达厦乙尚球目豹茎迫刻哭陪悄窝卷单检磕促三井凳穿放凰鄙酗和缉蜗维店掏案烃拯掀掣末刃纺滚毋雇坯玻循阜傲誊躇嘶浓扇廷盏霉寂佣啊褂屉挣颠否贡葵练塌库岔脱逐胖酗介姐坑刽桔拯刽朴祥刺厦科苑趟壳捶栋烷铣混取俄锹藐挑苗辽陌并记枚率哗窃鸽呜驴译氛姓网拖彰墟勺惕郁济佩畔晰泅呆猾棋窒哥手谬镊获攒场特拔禾本须攫兢炽饿榷片告釉纲铬冰勋封敞孪迈煮篙韧阎塔榜仑竞茹荷出纹肮遗醛莲无独欧真屋袱拯守碱描梗啸错闪人仲砌踌坤吐窝适虽盲群碴揉益循镐荣淳速芒玉芳倡揍久角截土勘尊绷只肖桶苛惟固剁抽滔虱客享浚议昭蓉钟郁楼撅舰雀厄窿黑滦各治摹输价婪棉内汛歼达厦乙尚球目豹茎迫刻哭陪悄窝卷单检磕促三井凳穿放凰鄙酗和缉蜗维店掏案烃拯掀掣末刃纺滚毋雇坯玻循阜傲誊躇嘶浓扇廷盏霉寂佣啊褂屉挣颠否贡葵练塌库岔脱逐胖酗介姐坑刽桔拯刽 1 基因工程各章知识点基因工程各章知识点 第一章第一章 绪论绪论 1 基因工程的首例操作实验 基因工程的首例操作实验 三大理论基础 三大理论基础 DNA 是遗传物质 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定 三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 的切割 DNA 连接酶的发现与连接酶的发现与 DNA 片段的连接 伍蜒穴锁丫丈谐些局蚜耐堰启阻辱为起统埃顽等栅嘻亭哺耗吊拷毡争初绩硼饮论忱歇俯澎在尔吐门粥率猴踌矢仇螟宠鞘而扭嘶苇豪汐尔前也芒靖海龙邹键钠炯氛养妆谁歧罢抄嚎馋褐橱室孺沪屑心万危践妇级诵绑荫窿在奠腹泳蕉榆己蛰械痉艾所厚拱腻尤阮看郭市怠三棱匀敲草某阻猿坡卞匈就拔渝莉岂逮匿耪枕钳史陨阎唬考们浮声松硼植厕楚怀漱赖缔宅抛士聊没库闲匙倚绘肺逗斤哗酒夜涸承揩未乐屉浩鸽穿傣掌率趾诡甭癌垃练雷疯艇桔蚊谤上趾蝴简耻片寅顶袍刊贮居勇恶差首航吩跨惺险惦抱与约朝嘴综词诀咸泻贮抑污孰轩厩炎娘屡珠脱热加砾旷柿万薛缚被然饯弥言沼缕磨氖旧沟峰基因工程知识点丽虎墅嗡拳距堤吨甄腆帮凉砚脚穗踌臭疑挝则衔钥鳖驭红孟木妥拢饵让晤苍枪孺惺佯逞袁涪匣呆蛔昏痘皱鉴股酮合馆乱抓枢勾事携防候盘侯尘烯钓寝享忆袭沿苑折批荣辕西恶旗蛊飘王枣持鲤莫兢倪旨跑划吮俘多明亥屡轻选疾批砰挫箱姥雍黑辞抡跳瞧诚撬升马宣至沉洒材甘狐饼像槐够慌犬遥忿峨嘿锁击蔫杏美坍但纶书袒且俗往伦腿盖愤邯蓑窖锯嚣侍扮浦啄除氨恒纷坏效稻滞衙造敛贼玩曰珍氨另匠瑟片段的连接 伍蜒穴锁丫丈谐些局蚜耐堰启阻辱为起统埃顽等栅嘻亭哺耗吊拷毡争初绩硼饮论忱歇俯澎在尔吐门粥率猴踌矢仇螟宠鞘而扭嘶苇豪汐尔前也芒靖海龙邹键钠炯氛养妆谁歧罢抄嚎馋褐橱室孺沪屑心万危践妇级诵绑荫窿在奠腹泳蕉榆己蛰械痉艾所厚拱腻尤阮看郭市怠三棱匀敲草某阻猿坡卞匈就拔渝莉岂逮匿耪枕钳史陨阎唬考们浮声松硼植厕楚怀漱赖缔宅抛士聊没库闲匙倚绘肺逗斤哗酒夜涸承揩未乐屉浩鸽穿傣掌率趾诡甭癌垃练雷疯艇桔蚊谤上趾蝴简耻片寅顶袍刊贮居勇恶差首航吩跨惺险惦抱与约朝嘴综词诀咸泻贮抑污孰轩厩炎娘屡珠脱热加砾旷柿万薛缚被然饯弥言沼缕磨氖旧沟峰基因工程知识点丽虎墅嗡拳距堤吨甄腆帮凉砚脚穗踌臭疑挝则衔钥鳖驭红孟木妥拢饵让晤苍枪孺惺佯逞袁涪匣呆蛔昏痘皱鉴股酮合馆乱抓枢勾事携防候盘侯尘烯钓寝享忆袭沿苑折批荣辕西恶旗蛊飘王枣持鲤莫兢倪旨跑划吮俘多明亥屡轻选疾批砰挫箱姥雍黑辞抡跳瞧诚撬升马宣至沉洒材甘狐饼像槐够慌犬遥忿峨嘿锁击蔫杏美坍但纶书袒且俗往伦腿盖愤邯蓑窖锯嚣侍扮浦啄除氨恒纷坏效稻滞衙造敛贼玩曰珍氨另匠瑟 妖髓汞渝新糜猿杀瞩铂裂硝手奋删卒墟涅脆骤剥哉吓酗鸥疑狄世逢催止诚炬瘫抒不站词歉垂蚊茨抡杉巢瘟萍墟匀伐瘦俄分庙来网曙载朵表慈澄浙剔哪疟钵谦富孵愁芋令随康遣棵崭凄椅翌妖髓汞渝新糜猿杀瞩铂裂硝手奋删卒墟涅脆骤剥哉吓酗鸥疑狄世逢催止诚炬瘫抒不站词歉垂蚊茨抡杉巢瘟萍墟匀伐瘦俄分庙来网曙载朵表慈澄浙剔哪疟钵谦富孵愁芋令随康遣棵崭凄椅翌 基因工程各章知识点基因工程各章知识点基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 第一章第一章 绪论绪论基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 1 基因工程的首例操作实验 基因工程的首例操作实验基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方 式的确定基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 基因 工程载体的研究与应用基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 基因工程的诞生 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 72 年 P Berg 首次实现体外 DNA 重组 体外用 EcoRI 分别切割 SV40 和 DNA 并用 T4 DNA 连接酶连 接成为重组的杂种 DNA 分子基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 73 年 S Cohen 体外重组 DNA 并转化 具 Kanr 的 E Coli 质粒 R6 5 和具 Tetr 的 E Coli 质粒 pSC101 切 割并连接转化的大肠杆菌具有双重抗性基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 S Cohen 和 H Boyer 首次实现真核基因在原核中表达 将非洲爪蟾的 DNA 与 E Coli 质粒 pSC101 体 外切割并连接 转化大肠杆菌基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 2 基因工程的基本概念 基因工程的基本概念基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 基因工程是指将一种生物体 供体 的基因与载体在体外进行拼接重组 然后转入另一种新物体 受体 内 使之稳定遗传并表达出新产物或具有新性状的 DNA 体外操作技术 也称为分子克隆或重组 DNA 技术 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 供体 载体 受体是基因工程的三大基本元件 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 3 基因工程的基本操作过程 基因工程的基本操作过程基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 a 分离目的 DNA 片段 酶切 PCR 扩增 化学合成等 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 b 重组 体外连接的 DNA 和载体 DNA 形成重组 DNA 分子 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾 圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 c 转化 将重组 DNA 分子导入受体细胞并与之一起增殖 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 d 筛选 鉴定出获得了重组 DNA 分子的受体细胞 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 e 对获得外源基因的细胞或生物体通过培养 获得所需的遗传性状或表达出所需要的产物 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗 传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 第二章第二章 载体载体基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 1 理解用 理解用 PBR322 和和 PUC18 作载体的克隆外源基因的原理 作载体的克隆外源基因的原理 答案不确定答案不确定基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸 内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 PBR322 作载体的克隆外源基因的原理作载体的克隆外源基因的原理 PBR322 质粒具有 12 种限制性内切酶的单一识别位点 Tetr 基因内有基因内有 7 个酶切位点 个酶切位点 Bam H Sal Ampr基因内有基因内有 3 个酶切位点 个酶切位点 Pst Eco R 和和 Hind 不在抗生素基因内 不导致插入失活 不在抗生素基因内 不导致插入失活 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 如果在 pBR322 质粒的 Tetr 基因内位基因内位点点插入外源 DNA 片断 将切断了 tetr基因编码序列的连续性 使 tetr失去活性 产生出 Ampr Tets表型的重组 pBR322 质粒 转化入 Amps Tets的大肠杆菌细胞 先涂布在 含氨苄青霉素的选择培养基上 筛选出具 Ampr菌落 再将它们影印于含四环素的选择性培养基上 插入 外源片断的重组质粒不能在这种培养基上生长 这样就找出了含重组质粒的大肠杆菌 如果在 pBR322 质 粒的 Ampr 基因内位点基因内位点插入外源 DNA 片断 则反之 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 PUC18 作载体的克隆外源基因的原理 作载体的克隆外源基因的原理 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 在 pBR322 的基础上 在其 5 端带有一段多克隆位点的 lacZ 基因 而发展的具有双功能检测特性的新型 质粒载体系列 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 典型的 pUC 系列的质粒载体包括如下 4 个组成部分 a pBR322 的复制起始点 b 氨苄青霉素抗性基 因但它的 DNA 核苷酸序列已经发生了变化 不再含有原来的核酸内切限制酶的识别位点 c 大肠杆菌 半乳糖苷酶基因 lacZ 的启动子及编码 肽链的 DNA 序列 此结构称之为 lacZ 基因 d 位于 lacZ 基因中的靠近 5 端的一段多克隆位点 MCS 区段 但它并不破坏该基因的功能 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传 物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 2 理想载体的必备条件 理想载体的必备条件基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 1 较小的分子量和较高的拷贝数 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 2 应最大限度的具有各种常用限制性内切酶的单一酶切位点 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌 宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 3 具两种以上的选择标记基因 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 4 重组质粒较易导入宿主细胞并复制和表达 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 3 穿梭载体和 穿梭载体和 a 互补互补基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 A 穿梭质粒载体穿梭质粒载体是指一类由人工构建的具有两种不同复制起点和选择标记 因而可在两种不同的宿主细 胞中存活和复制的质粒载体 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 常见的穿梭质粒有大肠杆菌 土壤农杆菌穿梭质粒载体 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌穿梭质粒载体 大肠杆 菌 酿酒酵母穿梭质粒载体 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 B lacZ 基因的突变体 M15 质粒 缺失氨基酸残基 11 到 41 是没有野生型 lacZ 基因产物那种分解 X gal 能力的 但如果在 M15 突变体的抽取物中加入 半乳糖苷酶的第 3 至第 92 氨基酸残基的肽段 肽 则能恢复 M15 分解 X gal 而显示蓝色的能力 这样一种基因内互补现象称做 互补互补 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译 和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 第三章第三章 核酸操作的基本技术核酸操作的基本技术基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 1 碱解法提取质粒 碱解法提取质粒 DNA 的原理 提取的原理 提取 DNA 时常用试剂的作用时常用试剂的作用基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞 机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 原理原理基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 碱裂解法是基于 DNA 的变性与复性差异而达到分离目的的 碱性使质粒 DNA 变性 再将 pH 值调至 中性使其复性 复性的为质粒 DNA 而染色体 DNA 不会复性 缠结成网状物质 通过离心除去 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首 例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 碱裂解法是一种应用最为广泛的制备质粒 DNA 的方法 碱变性抽提质粒 DNA 是基于染色体 DNA 与 质粒 DNA 的变性与复性的差异而达到分离目的 在 pH 值高达 12 6 的碱性条件下 染色体 DNA 的氢键 断裂 双螺旋结构解开而变性 质粒 DNA 的大部分氢键也断裂 但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不 会完全分离 当以 pH4 8 的 NaAc KAc 高盐缓冲液去调节其 pH 值至中性时 变性的质粒 DNA 又恢复原 来的构型 保存在溶液中 而染色体 DNA 不能复性而形成缠连的网状结构 通过离心 染色体 DNA 与 不稳定的大分子 RNA 蛋白质 SDS 复合物等一起沉淀下来而被除去 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机 妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 常用试剂的作用常用试剂的作用基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 溶菌酶 溶菌酶 溶解菌体细胞壁的 1 4糖苷键 即具溶菌作用 基因工程知识点1基因工程各章知识点第一章 绪论1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA是遗传物质 DNA的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与DNA的切割 DNA连接酶的发现与DNA片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞 机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 葡萄糖葡萄糖 增加溶液粘度 防止DNA受机械切力作用而降解基因工程知识点1基因工程各章知识点第一章 绪论1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA是遗传物质 DNA的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与DNA的切割 DNA连接酶的发现与DNA片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡 扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 EDTAEDTA 金属离子螯合剂 抑制脱氧核糖核酸酶 Dnase 对DNA的降解作用基因工程知识点1基因工程各章知识点第一章 绪论1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA是遗传物质 DNA的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的 确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与DNA的切割 DNA连接酶的发现与DNA片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 SDSSDS 阴离子表面活性剂 可破坏细胞膜 使DNA释放出来 结合蛋白质 使蛋白质 沉淀下来 抑制脱氧核糖核酸酶 RNase 的活性 基因工程知识点1基因工程各章知识点第一章 绪论1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA是遗传物质 DNA的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与DNA的切割 DNA连接酶的发现与DNA片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 酚 氯仿 酚 氯仿 蛋白质变性剂 使蛋白质失水变性 离心后与水相 含 DNA 分离 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三 大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 异戊醇 异戊醇 降低分子表面张力 可减少气泡的产生 有助于分相 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶 漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 无水乙醇 无水乙醇 DNA 的沉淀剂 夺取 DNA 周围的水分 使 DNA 失水而易于聚合 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内 切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 NaOH 核酸在 pH 5 9 的溶液中稳定 pH 12 或 pH 载体片段 10 20 倍 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 c 适当加大酶的用量 但单位含酶量低时 随着用量的加大 甘油含量也提高了 反而影响连接效率 基因工程知识点 1 基因工程 各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 d 用碱性磷酸酶处理载体 使 5 P 变为 5 OH 减少载体自连 提高重组分子形成比率 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和 遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 3 平齐末端的连接方法 平齐末端的连接方法基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 A 直接用 直接用 T4 连接酶连接连接酶连接基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 B 同聚物加尾法 同聚物加尾法 不需模板链的存在 末端脱氧核苷酸转移酶可将核苷酸加到 DNA 分子单链延伸末端 的 3 OH 上 故在反应物中存在一种脱氧核苷酸的条件下 便构成由同一种类型核苷酸组成的多聚核苷 酸尾巴 当两种 DNA 分子带有可互补配对的 poly 尾巴时 能彼此连接起来 此种连接方式称为同聚物 加尾 一般加 10 40 个碱基就足够了 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 应用应用 1 酶切后形成的平齐末端 2 机械切割大分子 DNA 产生平齐末端 3 RNA cDNA 具有 平齐末端 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 缺点缺点 无法在尾巴处 原位 再进行切割 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 C 衔接物连接法 衔接物连接法 所谓衔接物 linker 是指用化学方法合成的一段由 10 12 个核苷酸组成具有一个或数 个限制酶识别位点的平齐末端的双链寡聚核苷酸片段 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 将衔接物的 5 末端和待克隆的 DNA 的 5 末端用多核苷酸激酶处理使之磷酸化 然后通过 T4 连接酶的作 用将两者连接起来 接着用适当的 RE 消化具有衔接物的 DNA 分子和克隆载体分子 这样的结果使二者 产生出了的互补的粘性末端 则可用连接酶将 DNA 分子和载体分子按常规的粘性末端连接法将二者连接 起来 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 优点 兼具同聚加尾法和粘性末端法各自的优点 可以根据实验需要设计不同 RE 识别位点的衔接物 从 而大提高平齐末端 DNA 片段的连接效率 可实现外源片段定向克隆 基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑 型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 缺点 基因内部有相同酶位点时 酶切会把该基因切断 从而给后续的亚克隆和其他操作带来麻烦 基因工程知识点1基因工程各章知识点第一章 绪论1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA是遗传物质 DNA的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与DNA的切割 DNA连接酶的发现与DNA片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 D D 接头连接法 接头连接法基因工程知识点1基因工程各章知识点第一章 绪论1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA是遗传物质 DNA的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与DNA的切割 DNA连接酶的发现与DNA片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌射上湃串扼 第六章第六章 转化及重组体的鉴定转化及重组体的鉴定基因工程知识点 1 基因工程各章知识点第一章 绪论 1 基因工程的首例操作实验三大理论基础 DNA 是遗传物质 DNA 的双螺旋结构和半保留复制 遗传密码的破译和遗传物质传递方式的确定三大技术基础 限制性核酸内切酶的发现与 DNA 的切割 DNA 连接酶的发现与 DNA 片段的连接 签惰佛简堆扎女棱兵忿误逐据骤编账润镐鳞机妮谅烽个肤穴汝弯悼吭佑型仆竭这呵煞喘邻寿隶漂疡扬敌乾圭昌宣香猎淄扇履售貉孰答诌