药物稳定性加速实验

稳定性实验稳定性实验 一 目的和要求一 目的和要求 1 了解应用化学动力学方法预测注射液稳定性的原理 2 掌握应用恒温加速实验法测定维生素 C 注射液的贮存期的方法 二 仪器和材料二 仪器和材料 仪器 恒温水浴 酸式滴定管 25ml 锥形瓶 50 250ml 等 材料 维生素 C 注射液 2ml 0 25g 0 1mol L 碘液 丙酮 稀醋酸 淀粉指示液等 三 实验内容三 实验内容 一 试验方法 1 放样 将同一批号的 VC注射液样品 2ml 0 25g 分别置 4 个不同温 度 如 70 80 90 和 100 的恒温水浴中 间隔一定时间 如 70 为间隔 24h 80 为 12h 90 为 6h 100 为 3h 取样 每个温度的间隔取样次数均 为 5 次 样品取出后 立即冷却或置冰箱保存 供含量测定 2 VC含量测定方法 精密量取样品液 1ml 置 150ml 锥形瓶中 加蒸馏水 15ml 与丙酮 2ml 摇匀 放置 5 分钟 加稀醋酸 4ml 与淀粉指示液 1ml 用碘液 0 1mol l 滴定 至溶液显蓝色并持续 30 秒不褪 每 1ml 碘液 0 1mol l 相当于 8 806mg 的 VC C6H8O6 分别测定各样品中的 VC的含量 同时测定未经加热试验的原样品中 VC含量 记录消耗碘液的毫升数 二 实验数据处理 1 数据整理 由于含量测定所用的是同一种碘液 故不必考虑碘液的精确 浓度 只要比较消耗碘液的毫升数即可 将未经加热的样品 表 1 1 中时间项 为 0 所消耗碘液的毫升数 即初始浓度 作为 100 相对浓度 各加热时间内 的样品所消耗碘液的毫升数与其相比 得出各自的相对浓度百分数 C相 实验数据如表 1 表表 1 1 70 70 恒温加速试验各时间内样品的测定结果恒温加速试验各时间内样品的测定结果 消耗碘液 ml加热间隔 时间 h 123 平均 C相 lg C相 0 24 43 72 96 120 100 在其它温度下考察的实验数据 均按表 1 的格式记录并计算 2 求 4 种试验温度的 VC氧化降解速度常数 k70 k100 用回归方法求各温 度的 k 值时 先将各加热时间 x 与其对应的 lg C相 值 y 列表 表 2 表表 1616 2 2 加热时间及其相对浓度 对数值的回归计算表 加热时间及其相对浓度 对数值的回归计算表 70 70 x 加热 时间 0 2448 7296120 y lg C 相 用具有回归功能的计算器 将 x 和 y 值回归 直接得出截距 斜率和相关 系 由斜率 b 即可计算出降解速度常数 k 例如在 70 k70 b 2 303 5 同上 求出各温度的 k 值 3 根据 Arrhenius 公式求 VC氧化降解反应的活化能 Ea 和频率因子 A 将计算求得的降解速度常数 k 和对应温度 T 记录在表 3 表表 3 3 不同温度下不同温度下 V VC C注射液的降解速度常数注射液的降解速度常数 T343 273 70 353 273 80 363 273 90 373 273 100 x T 1 103 2 9152 8332 7552 681 A R E k a lg 298 1 303 2 lg 25 298 298 303 2 lg 25 T T R E k k a T 1 y lgk 以 x 为横坐标 y 为纵坐标 进行回归计算 计算出直线斜率 b 截距 a 和相关系数 r 故 VC氧化降解活化能为 Ea b 2 303 R 6 式中 R 为气体常数 频率因子即为直线截距的反对数 4 求室温 25 时的氧化降解速度常数 k25 根据式 4 有 7 或 8 代入 Ea A R 或已知温度 T 及对应的氧化降解速度常数 k 即可计算 k25 该值亦可将 lgk 图中的直线外推至室温求出 5 求室温贮存期 t0 9 损失 10 所需的时间 由下式计算 t0 9 0 1054 k25 9 四 操作要点和注意事项四 操作要点和注意事项 1 实验中所用 VC注射液的批号应全部相同 按规定间隔时间加热 取出 后 应立即测定 VC含量 否则应置冰箱保存 以免含量起变化 2 测量 VC含量时 所用碘液的浓度应前后一致 宜用同一瓶的碘液 否 则含量难以测准 因各次测定所用的是同一碘液 故碘液的浓度不必精确标定 注射液 VC含量亦可不必计算 只比较各次消耗的碘液毫升数即可 一般将零时 间样品 即未经加热的 VC注射液 消耗的碘液毫升数作为 100 相对浓度 其 它各时间消耗的碘液毫升数与它比较 从而得出各时间的 C相 见表 16 1 3 经典恒温法常采用 4 个温度进行加速实验 各温度的加热间隔时间点一 般应取 5 个 间隔时间的确定 应以各次消耗的碘液毫升数有明显差别为宜 4 测定 VC含量时 加丙酮的作用是 因 VC注射液中加有亚硫酸氢钠等抗 氧剂 其还原性比烯二醇基更强 因此要消耗碘 加丙酮后就可避免发生这一 作用 因为丙酮能与亚硫酸氢钠起发应 5 测定 VC含量时 加稀醋酸的作用