高考生物 近六年考点题型归纳分析 6PCR技术的基本操作和应用 新人教版

1 PCRPCR技术的基本操作和应用技术的基本操作和应用 2012江苏22 下列事实能体现细胞全能性的是 A 棉花根尖细胞经诱导形成幼苗 B 单细胞的 DNA 在体外大量扩增 C 动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体 D 小鼠体细胞经诱导培育成小鼠 答案 AD 解析 在多细胞生物中每个体细胞的细胞核具有个体发育的全部基因 只要条件许可 都可发育成完整的个体 要能产生完整的个体 才能体现全能性 试题点评 本题考查细胞全能性这一知识点 要求学生能根据细胞全能性的原理 对 一些现象进行分析 属于理解层次 2011 江苏 33 8 分 请回答基因工程方面的有关问题 1 利用 PCR 技术扩增目的基因 其原理与细胞内 DNA 复制类似 如下图所示 图中引物为单链 DNA 片段 它是子链合成延伸的基础 2 从理论上推测 第四轮循环产物 中含有引物 A 的 DNA 片段所占的比例为 在第 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的 DNA 片段 2 设计引物是 PCR 技术关键步骤之一 某同学设计的两组引物 只标注了部分碱基序 列 都不合理 如下图 请分别说明理由 第 1 组 第 2 组 3 PCR 反应体系中含有热稳定 DNA 聚合酶 下面的表达式不能正确反映 DNA 聚合酶的 功能 这是因为 2 4 用限制酶 EcoRV Mbol 单独或联合切割同一种质粒 得到的 DNA 片段长度如下图 1 kb 即 1000 个碱基对 请在答题卡的指定位置画出质粒上 EcoRV Mbol 的切割位点 33 8 分 1 15 16 三 2 引物 I 和引物 局部发生碱基互补配对而失效 引物 I 自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效 3 DNA 聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结 合到双链 DNA 片段的引物链上 4 见右图 2011 北京 31 16 分 T DNA 可随机插入植物基因组内 导致被插入基因发生突变 用此方法诱导拟南芥产生突变体的 过程如下 种植野生型拟南芥 待植株形成花蕾时 将地上部 分浸入农杆菌 其中的 T DNA 上带有抗除草剂基因 悬浮液中以实现转化 在适宜条件下培 养 收获种子 称为 代 1 为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾 需要去除 因为后者产生的 会抑制侧芽的生长 2 为筛选出已转化的个体 需将 T1代播种在含 的培养基上生长 成熟后自交 收获种子 称为 T2代 3 为筛选出具有抗盐性状的突变体 需将 T2代播种在含 的培养基上 获 得所需个体 4 经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体 为确定抗盐性状是否由单基因突变 3 引起 需将该突变体与 植株进行杂交 再自交 代后统计性状分离比 5 若上述 T DNA 的插入造成了基因功能丧失 从该突变体的表现型可以推测野生型 基因的存在导致植物的抗盐性 6 根据 T DNA 的已知序列 利用 PCR 技术可以扩增出被插入 的基因片段 其过程是 提取 植株的 DNA 用限制酶处理 后 再用 将获得的 DNA 片段连接成环 如右图 以此为 模板 从图中 A B C D 四种单链 DNA 片断中选取 作为引 物进行扩增 得到的片段将用于获取该基因的全序列信息 2011 安徽 31 21 分 9 分 家蚕细胞具有高效表达外源基因能力 将人干 扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养 可以提取干扰素用于制药 3 采用 PCR 技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细 胞 该 PCR 反应体系的主要成分应该包含 扩增缓冲液 含 Mg2 水 4 种脱氧核糖苷酸 模板 DNA 和 答案 3 TaqDNA 聚合酶 对干扰素基因特异性的 DNA 引物对 解析 考查的知识点为动物细胞培养和基因工程 3 PCR 反应体系的主要成分应扩增缓冲液 含 Mg2 水 4 种脱氧核糖苷酸 模 板 DNA TaqDNA 聚合酶 两种引物 2010 山东 34 生物 生物技术实践 生物柴油是一种可再生的清洁能源 其应用在一定 程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗 科学家发现 在微生物 M 产生的脂肪酶作用下 植 物油与甲醇反应能够合成生物柴油 如下图 用于生产生物柴油的植物油不易发挥 宜选用 方法从油料作物中提取 2 筛选产脂肪酶的微生物 M 时 选择培养基中的添加的植物油为微生物生长提供 培养基灭菌采用的最适方法是 法 3 测定培养液中微生物数量 可选用 法直接计数 从微生物 M 分离提取的脂肪酶通 4 常需要检测 以确定其应用价值 为降低生物柴油生产技术 可利用 技术使脂 肪酶能够重复使用 4 若需克隆脂肪酶基因 可利用耐热 DNA 聚合酶催化的 技术 答案 1 压榨 萃取 注 两空顺序无先后 2 碳源 高压蒸汽灭菌 3 显微镜直接计数 酶活性 或酶活力 固定化酶 或固定化细胞 4 PCR 或多聚链式反应 聚合酶链式反应 命题立意 本题综合考查多种生物技术 解题思路 1 因为植物油不挥发 所以不适合采用蒸馏法提取 应用压榨法或萃取法提 取 2 植物油中不含矿物质元素 只为微生物提供碳源 培养基适合用高压蒸汽灭菌发进 行灭菌 3 测定微生物的数量 可以用显微镜直接计数 分离出的脂肪酶要对其活性进行 检测 以确定其实用价值 可以利用酶固定技术重复使用脂肪酶 4 利用PCR技术可以扩 增基因 2010 广东 22 新技术的建立和应用对生物学发展至关重要 下列技术 或仪器 与应用匹 配正确的是 BD A PCR 技术 扩增蛋白质 B 杂交瘤技术 制备单克隆抗体 C 光学显微镜 观察叶绿体的基粒 D 花粉离体培养 培育单倍体植物 2008 江苏 32 8 分 将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗 饲喂转基因 马铃薯可使动物获得免疫力 以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表 5 请根据以上图表回答下列问题 1 在采用常规 PCR 方法扩增目的基因的过程中 使用的 DNA 聚合酶不同于一般生物 体内的 DNA 聚合酶 其最主要的特点是 2 PCR 过程中退火 复性 温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定 表 1 为根据 模板设计的两对引物序列 图 2 为引物对与模板结合示意图 请判断哪一对引物可采用较高 的退火温度 3 图 1 步骤 所用的 DNA 连接酶对所连接的 DNA 两端碱基序列是否有专一性要求 4 为将外源基因转入马铃薯 图 1 步骤 转基因所用的细菌 B 通常为 5 对符合设计要求的重组质粒 T 进行酶切 假设所用的酶均可将识别位点完全切开 请根据图 1 中标示的酶切位点和表 2 所列的识别序列 对以下酶切结果作出判断 采用 EcoR 和 Pst 酶切 得到 种 DNA 片断 采用 EcoR 和 Sma 酶切 得到 种 DNA 片断 答案 1 耐高温 2 引物对 B 3 否 4 农杆菌 5 2 1 2007 广东 40 生物技术实践 15 分 6 为了实现燃料供应来源多样化 发展长期替代化石燃料的产品如燃料酒精 生物柴油 沼气等已经列入我国未来 10 年的发展计划 广东省是我国甘蔗主产区之一 甘蔗是一种高光效的 C3植物 单位面积产量很高 种植 面积日益扩大 目前已成为南方地区燃料酒精生产的重要原料 利用甘蔗生产燃料酒精的 一般工艺流程为 甘蔗 榨汁 蔗糖 酵母发酵 蒸馏 成品 燃料酒精 请根据上述材料 回答下列问题 6 突变菌往往带有一些特殊的基因 在获得这些基因的过程中 PCR 技术相当重要 PCR 扩增反应中加入引物和 DNA 聚合酶的作用分别是什么 答案 15 分 6 引物的作用是结合在模板 DNA 上 提供 DNA 延伸起始位点 DNA