食品中二氧化硫的测定

食品中二氧化硫的测定 商云 10 级食品工程 摘要 本文简要介绍了二氧化硫的性质及其在食品添加剂领域的应用 阐释了利用盐酸副玫瑰苯胺 光度法 碘量法以及蒸馏滴定法测定二氧化硫含量的方法 对于认识二氧化硫及测定二氧化硫的含量具有 借鉴意义 关键词 二氧化硫 测定 盐酸副玫瑰苯胺光度法 碘量法 蒸馏滴定法 引言 二氧化硫已成为现在食品安全的大敌 大批二氧化硫超标的食品被曝光 而且几乎涉及 所有的食品种类 从近几年市场上食品检测结果看 超过 50 的不合格项目与二氧化硫有关 且一部分产品的超标率呈上升趋势 二氧化硫在食品加工或储存中扮演着重要的角色 影响 范围甚广 干腌制蔬菜时 二氧化硫等于防腐剂 在脱皮蔬菜中 二氧化硫可用作抗氧化剂 可以抑制氧化酶的活性 从而抑制酶性褐变 在米 面 年糕等制品中 二氧化硫相当于 美白粉 可起漂白作用 在香蕉 龙眼等水果中 二氧化硫可用作催熟剂 用以把生的 水果催熟 而二氧化硫本身并没有什么营养价值 也非食品中不可缺少的部分 而且还有一 定的腐蚀性 若用量超标 将对人体健康产生极大的危害 所以 加强对二氧化硫的监管和 检测具有重要现实意义 1 二氧化硫简介 二氧化硫 又称亚硫酸酐 其相对分子质量为 64 07 是由燃烧的硫磺或黄铁矿制得 在常温下 二氧化硫为一种无色的气体 但有强烈的刺激臭 有窒息性 熔点 76 1 沸 点 10 在 10 时冷凝成无色的液体 二氧化硫易溶于水或乙醇 对水的溶解度为 22 8 0 5 50 二氧化硫溶于水后 一部分水化合成亚硫酸 亚硫酸极不稳定 即使在常温下 特别是暴露在空气中时 很容易分解 当加热时更为迅速地分解而放出二氧 化硫 二氧化硫可能是目前已知的最有效的非酶褐变抑制剂 但其抑制非酶褐变的化学机制尚 未完全搞清 或许涉及酸式亚硫酸与活性羰基的作用 酸式亚硫酸能与还原糖和醛式中间体 可逆地结合 因此阻止了含羧基的化合物与氨基酸的缩合反应 进而防止了由糖氨反应所造 成的非酶褐变 这些酸式亚硫酸的加成产物和二氧化硫对类黑精色素的漂白作用共通有效地 抑制了褐变的过程 亚硫酸和果蔬中糖的结合能力很强 其结合强弱顺序为 阿拉伯糖 葡 萄糖 果糖 蔗糖 同样这种结合与 pH 值有着密切关系 pH 值越低其结合速度越慢 二氧化硫也能有效地抑制某些酶催化反应 特别是酶促褐变 植物组织中的酚类化合物 在酶的催化下氧化产生褐色素 从而使某些新鲜果蔬在搬运或前加工时产生一系列质量问题 然而 把添加了柠檬酸的亚硫酸盐或酸式亚硫酸盐喷洒或滴注在新鲜果蔬上 可有效地抑制 去皮马铃薯 胡萝卜和苹果的酶促褐变 这主要是因为亚硫酸是一种强还原剂自身对氧化酶 活性有很强的抑制作用 同时也正因为它的还原性 可以使酶促反应的某些中间体产生逆转 在很多食品体系中 二氧化硫还具有显著的抗氧化作用 由于亚硫酸是强的还原剂 他 能消耗组织中的氧 从而抑制了氧化酶的活性 对于防止果蔬中维生素 C 的破坏很有效 但 通常并不以此为主要使用目的 啤酒中添加二氧化硫能明显抑制啤酒在储藏时产生的氧化风 味 当二氧化硫存在时 鲜肉的红色能有效地得以保持 但食品法规并不许可使用这种方法 因为它可以掩蔽劣质肉制品 二氧化硫在食品中添加应加以限制 1994 年 FAO WHO 规定了亚硫酸盐的 ADI 值为 0 0 7mg kg 体重 并要求在控制食用量的同时还应严格控制二氧化硫的残留量 我们食品添 加剂法规明文规定 不得以掩盖食品的腐败变质而使用食品添加剂 二氧化硫使用后二氧化 硫最大残留量应符合 GB2760 的规定 2 食品中二氧化硫的测定方法 测定二氧化硫的主要方法有 盐酸副玫瑰苯胺比色法 蒸馏滴定法 碘量法等 2 1 盐酸副玫瑰苯胺光度法测定二氧化硫 2 1 1 原理 二氧化硫 或来自亚硫酸盐 被四氯汞钠吸收后 生成稳定的络合物 再与甲醛和盐酸副 玫瑰苯胺作用 并经分子重排后 生成紫红色的络合物 颜色的深浅与二氧化硫的浓度成正 比 可以比色测定 本方法使用于各类食品中游离型和结合型硫酸盐残留量的测定 方法操作 简单 快速 灵敏度高 再现性良好 2 1 2 试剂 1 5mol L 氢氧化钠溶液 0 5mol L 硫酸溶液 12g L 氨基磺酸铵溶液 2 四氯汞钠吸收液 称取 13 6g 氯化高汞及 6g 氯化钠 溶于水中并稀释至 1000m1 放置过夜 过滤后备用 3 甲醛溶液 吸取 0 55m1 无聚合沉淀的 36 甲醛 加水 99 45ml 稀释 混匀 4 淀粉指示液 称取 1g 可溶性淀粉 用少量水调成糊状 缓缓倾入 100m1 沸水中 随 加随搅拌 煮沸 放冷备用 此溶液临用时现配 5 亚铁氰化钾溶液 称取 10 6g 亚铁氰化钾 K Fe CN 3H 0 加水溶解并稀释 4 6 2 至 100m1 6 乙酸锌溶液 称取 22g Zn CH COO 2H20 溶于少量水中 加入 3m1 冰乙酸 加 3 2 水稀释至 100m1 7 盐酸副玫瑰苯胺溶液 称取 0 1gCHN Cl 4H20 于研钵中 加少量水研磨使溶解 19183 并稀释至 100ml 取出 20ml 置于 100ml 容量瓶中 加盐酸溶液 6mol L 充分摇匀后使溶 液由红变黄 如不变黄再滴加少量盐酸至出现黄色 再加水稀释至刻度 混匀备用 如无盐 酸副玫瑰苯胺可用盐酸晶红代替 盐酸副玫瑰苯胺的精制方法 称取 20g 盐酸副玫瑰苯胺于 400m1 水中 用 50ml 盐酸溶 液 2mol L 酸化 徐徐搅拌 加 4 5g 活性炭 加热煮沸 2min 将混合物倒入大漏斗抽滤 过滤 用保温漏斗趁热过滤 滤液放置过夜 出现结晶 然后再用布氏漏斗抽滤 将结晶再 悬浮于 1000ml 乙醚 乙醇 10 1 的混合物中 振摇 3 5min 以布氏漏斗抽滤 再用乙醚 反复洗涤至醚层不带色为止 于硫酸干燥器中干燥 研细后储存于棕色瓶中保存 8 0 1mol L 碘溶液 9 0 1mol L 硫代硫酸钠标准滴定溶 10 二氧化硫标准储备溶液 称取 0 5g 亚硫酸钠 溶于 200m1 四氯汞钠吸收液中 放 置过夜 上清液用定量滤纸过滤备用 吸取 10m1 亚硫酸氢钠 四氯汞钠溶液于 250ml 碘量瓶中 加 100m1 水 准确加水 20m1 碘溶液和 5m1 冰乙酸 摇匀 放置暗处 2min 后 迅速以硫代硫酸钠标准滴定溶液 0 1mol L 滴定至淡黄色 加 0 5ml 淀粉指示剂 继续滴至无色 另取 100m1 水 准确加入 20ml 碘溶液 加 5ml 冰乙酸 按同一方法做空白试验 计算 C V V C 32 03 10 2 11 式中 C 为二氧化硫标准溶液浓度 mg m1 C 为硫代硫酸钠标准滴定溶液的浓度1 mol L V 为测定用二氧化硫标准溶液消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液体积 m1 V 为试1 2 剂空白消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液体积 ml 32 03 为与 1ml 硫代硫酸钠标准滴定溶液 c Na SO 1 mol L 相当的二氧化硫的质量 mg 2 23 11 二氧化硫标准使用溶液 临用前将二氧化硫储备溶液以四氯汞钠吸收液稀释成每毫 升含 2ug 二氧化硫 2 1 3 仪器 分光光度计 2 1 4 操作方法 1 样品处理 水溶性固体样品如白糖等 可称取 10g 均匀样品 样 品量可视含量高低而定 以少量水溶解 置于 100m1 容量瓶中 加入 4m1 0 5mol L 氢氧 化钠溶液 5min 后加入 4 m1 0 5mol L 硫酸溶液 然后加入 20m1 四氯汞钠吸收液 以水 稀释至刻度 其他固体如饼干 粉丝等 称取 5 10g 研磨均匀的样品 以少量水湿润并移人 100m1 容量瓶中 然后加入 20ml 四氯汞钠吸收液 浸泡 4h 以上 若上层溶液不澄清 可加入亚铁 氰化钾及乙酸锌溶液各 2 5m1 最后用水稀释至刻度 过滤后备用 液体样品如葡萄酒等 直接吸取血样品 5 10ml 置于 100 ml 容量瓶中 以少量水稀 释 加 20ml 四氯汞钠吸收液 最后加水到刻度 摇匀 必要时过滤备用 2 测定 吸取 0 5 5m1 上述样品处理液于 25ml 具塞比色管中 另取 0 0 2 0 4 0 6 0 8 1 1 5 2m1 二氧化硫标准使用液 相当于 0 0 4 0 6 0 8 1 2 1 6 2 3 4ug 二氧化硫 分别置于 25m1 具塞比色管中 于样品及标准管中各加四氯汞钠吸收液至 10ml 然后加入 1ml 12g L 氨基磺酸铵溶液 1m1 甲醛溶液及 1m1 盐酸副玫瑰苯胺溶液 摇匀 放置 20min 用 1cm 比色杯以零管调节零 点 于波长 550nrn 处测吸光度 并绘制标准曲线 2 1 5 计算 X m 1000 W V 100 1000 1000 式中 X 为测试样中二氧化硫的含量 g kg m 为测定用样液中二氧化硫的质量 W 为试样质量 g V 为测定用样液的体积 ml 2 2 碘量法测定二氧化硫测定 2 2 1 原理 样品中的二氧化硫 包括游离型和结合型的 加入氢氧化钾破坏其结合状态 并使之稳 定 加入硫酸又使二氧化硫游离 然后用碘标准滴定溶液滴定 到达终点时 过量的碘即与 淀粉指示剂作用 生成蓝色碘 淀粉复合物 根据碘标准滴定溶液的消耗量计算出二氧化硫 的含量 反应式如下 SO 2KOH K SO H O 2232 K SO 十 H SO K SO H O SO 23242422 SO 十 2 H O I H SO 十 2HI 22224 本方法适用于食品中游离型和结合型二氧化硫含量的测定 2 2 2 试剂 1 1mol L 氢氧化钾溶液 称取 57g 氢氧化钾溶于蒸馏水中 加水至 1000ml 2 25 硫酸溶液 3 0 1mol L 碘标准滴定溶液 4 10g L 淀粉溶液 2 2 3 仪器 250 血碘量瓶 2 2 4 操作方法 称取样品 20g 固体样品研细 置于小烧杯中 用蒸馏水洗人 250m1 容量瓶中 加蒸馏 水至总容量的二分之一 加塞振荡 再加水至刻度 摇匀 待瓶内液体澄清后 用移液管吸 取澄清液 50ml 注入 250ml 碘量瓶中 加入 25m1 1mol L 氢氧化钾溶液 将瓶内混合液用力 振荡后放置 10min 然后一边振摇一边加入 10ml 25 硫酸溶液和淀粉溶液 1ml 以碘标准 滴定溶液滴至呈现蓝色并 30s 不褪色为止 同时以蒸馏水代替样品按上法做空白试验 2 2 5 计算 X V V C 0 032 1000 W V V 1243 式中 X 为样品中二氧化硫的含量 g k8 C 为碘标准滴定溶液的浓度 mol L V 为 1 滴定样品溶液消耗碘标准滴定溶液的体积 ml V 为滴定空白溶液消耗碘标准滴定溶液的 2 体积 m1 W 为样品质量 g V 为样品处理液总体积 ml V为测定用样品处理液体 34 积 ml 0 032 为与 1ml 1mol L 碘标准滴定溶液相当的二氧化硫的质量 g 2 3 蒸馏滴定法测定二氧化硫 2 3 1 原理 在密闭容器中对样品进行酸化并加热蒸馏 以释放出其中的二氧化硫 释放物用乙酸铅 溶液吸收 吸收后用浓盐酸酸化 再以碘标准溶液滴定 根据所消耗的碘标准溶液量计算出 样品中二氧化硫含量 2 3 2 测定方法 固体样品用刀切或剪刀剪成碎末后混匀 称取约 5 00g 均匀样品 样品量可视含量高低 而定 液体样品可直接吸取 5 10mL 样品 置于 500mL 圆底蒸馏烧瓶中 将称好的样品置 人圆底蒸馏烧瓶中 加入 250mL 水 装上冷凝装置 冷凝管下端应插入碘量瓶中的 25mL 乙 酸铅 20g L 吸收液中 然后在蒸馏瓶中加入 10mL 盐酸 1 1 立即盖塞 加热蒸馏 当蒸 馏液约 200mL 时 使冷凝管下端离开液面 再蒸馏 lmin 用少量蒸馏水冲洗插入乙酸铅溶 液的装置部分 向取下的碘量瓶中依次加入 10mL 浓盐酸 lmL 淀粉指示液 10g L 摇匀 之后用碘标准滴定溶液 0 01mol L 滴定至变蓝 且在 30s 内不退色为止 在检测样品的同 时要做空白试验 2 3 3 计算 计算公式如下 X V V 0 01 0 032 100 m 12 式中 X 为样品中二氧化硫总含量 g kg