番茄红素论文

海南大学材料与化工学院海南大学材料与化工学院 20092009 级应用化学系级应用化学系 应用化学系研究实验应用化学系研究实验 天然方向天然方向 论论 文文 题 目 番茄红素的提取 含量测定与性质检测 指导老师 系 别 2009 级应用化学 组 别 第二组 组 员 完成日期 2012 年 4 月 28 日 1 摘 要 番茄红素 Lycopene 是类胡萝卜素的一种 是一种很强的抗氧化剂 具 有极强的清除自由基的能力 对防治前列腺癌 肺癌 乳腺癌 子宫癌等有显 著效果 还有预防心脑血管疾病 提高免疫力 延缓衰老等功效 有植物黄金 之称 被誉为 21 世纪保健品的新宠 通过本实验的提取与含量测定以及性 质检测 我们可以了解番茄红素中的基本成分和结构 以及其各种已被发现的 功效 从而熟悉从天然植物中提取分离色素的直接方法和操作技能 掌握天然 色素的简单定性和定量测量方法 本实验中 我组分析比较不同萃取剂对色素 提取的影响 从而确定提取的最好条件 关键词 番茄红素 提取 含量测定 性质检测 2 Abstract Lycopene is a kind of carotenoid is a strong antioxidant has a very strong free radical scavenging ability have a significant effect on the prevention and treatment of prostate cancer lung cancer breast cancer uterine cancer there is the prevention of cardiovascular disease enhance immunity aging and other effects have known of plant gold known as the new darling of the 21st century health care products In this study the extraction and determination of the nature of detection we can understand the basic composition and structure of lycopene as well as its various efficacy have been found and thus familiar with the direct method of separation of pigments extracted from natural plant and operational skills master of simple qualitative and quantitative measurement of natural pigments This experiment the group analysis comparing different extractants for pigment extraction in order to determine the best conditions for extraction Keywords lycopene extract Determination of content nature of the detection 3 番茄红素的提取 含量测定与性质检测 1 番茄红素及本实验概述 1 1 番茄红素 番茄红素属于类胡萝卜素 是由异戊二烯残基为单元组成的长链共轭双键 结构的多烯色素 大多类胡萝卜素可以看作番茄红素的衍生物其分子为 C40H56 结构如下 1 2 实验概述 根据番茄红素不溶于水 难溶于甲醇 乙醇 可溶于石油醚 己烷 丙酮 易溶于氯仿 苯等有机溶剂的性质 可利用亲油性有机溶剂来提取番茄红素 实验采取直接打浆 直接打浆的方法提取量最大 提取速度快 提取次数少 提取效高 2 提取与分离方法 2 1 番茄红素的提取方法 溶剂浸提法 2 1 1 原料与试剂 三氯甲烷 石油醚 环己烷 二氯甲烷 乙醇 规格都为 AR 2 1 2 仪器 色谱仪 分光光度计 搅拌机 抽滤机 电子称 圆底烧瓶 三口瓶 锥 形瓶 烧杯 铁架台 玻璃棒 滴管 2 2 实验步骤 回流搅拌法 称取 30g 新鲜番茄 捣碎 放入 100 毫升三角瓶中 加入 15 毫升无水乙醇 装上搅拌装置和回流冷凝管 搅拌回流 5 分钟 抽滤 残渣中 加入 15 毫升萃取剂 搅拌回流 5 分钟 抽滤 合并抽滤所得液至于暗处 待用 4 2 3 结果与分析讨论 水浴搅拌过程中 随着搅拌的时间加长 以及水浴的温度升高 加入圆底 烧瓶内的无色萃取剂变成橙黄色 并且不断有气泡产生 不同萃取剂抽滤过程 所得液颜色呈浅黄色到橙红色 程度不等 所得液经过萃取剂润洗倒入分液漏 斗 液面呈现分层 上层为有机层 呈橙色 颜色有差别 有些萃取剂润洗时 加入偏多 该颜色仅作参考 下层为水层 静置一段时间后 颜色逐渐变浅 为淡黄色 3 番茄红素的含量测定方法 3 1 原料与试剂 正己烷 甲醇 无水乙醇 苏丹 号标准品 分析纯 3 2 仪器 TU 1810 紫外可见分光光度计 北京普析通用仪器有限公司 3 3 实验步骤 由于番茄红素标准品价格昂贵 且见光易分解 而苏丹 I 与番茄红素有类 似的特征吸收峰 故用苏丹 I 代替番茄红素标准品绘制标准曲线 准确称量 25mg 苏丹 I 用提取溶剂溶解并定容至 50mL 标准溶液浓度为 0 5mg mL 吸取 0 26 0 52 0 78 1 04 1 30mL 分别注入 50mL 的容量瓶中 均用无水乙 醇均定容至刻度 充分混合 它们分别相当于 0 5 1 0 1 5 2 0 2 5 g mL 的番茄红素 以提取溶剂作为空白 在 505nm 下测定吸光值并绘制标准曲线 未知样品用提取液定容于 500mL 容量瓶中 摇匀静置待测 3 4 结果与分析讨论 3 4 1 标准样品数据表格表 1 表 1 标准样品数据 浓度波长 序号编号类型 ug mL Abs 505 00 nm SDRSD 10标准样品0 00000 00010 00010 00000 0000 5 21标准样品0 50000 12100 12100 00000 0000 32标准样品1 00000 23720 23720 00000 0000 43标准样品1 50000 35620 35620 00000 0000 54标准样品2 00000 46720 46720 00000 0000 65标准样品2 50000 59300 59300 00000 0000 3 4 2 未知样品数据表格表 2 表 2 未知样品数据 浓度波长 序号编号类型 ug mL Abs 505 00 nm SDRSD 11未知样品2 20830 52150 52150 00000 0000 22未知样品2 21340 52270 52270 00000 0000 3 4 3 测量参数表格表 3 表 3 测量参数 光度模式单波长法 曲线评估无 曲线方程Abs f C 方程次数一次 公式Abs K1 C K0 校正方法浓度法 K00 00134 K10 23555 R 20 9999 6 重复测量无 自动切换样品池否 质量控制 零点插入否 3 4 4 扫描光谱图图 4 图 4 扫描光谱 3 4 5 结果分析与讨论 计算结果 未知样品的稀释液平均浓度 w 2 2083 2 2134 2 2 21085 ug mL 未知样品中番茄红素的百分含量 x 2 21085 500 106 30 100 0 0037 采用番茄红素在石油醚或者正己烷溶液中的 505nm 的吸收峰 而不用 472nm 的吸收峰 避免了 胡萝卜素等成分对测定的影响 这对于未经结晶纯 化的番茄红素的测定非常重要 在溶剂中加入 2 的二氯甲烷 大大增加了溶剂 对番茄红素的溶解度 避免了由于首次稀释时番茄红素不能全部溶解所带来的 测定误差 这对番茄红素粗提取物或者纯化后番茄红素的测定极为有利 以番 茄红素的消光系数来计算其浓度 避免了番茄红素标准样品的制约 检验 相关系数检验的结果表明 该方法可靠性高 不受本底影响 4 番茄红素的性质测定 4 1 pH 值对色素影响 7 取色素浓缩液 以乙酸乙酯稀释 分装 8 个 25mL 的容量瓶中 用盐酸和 NaOH 调 pH 值 测吸光度 结果见表 5 表 5 pH 值对色素的影响 pH 值135791113 A0 4450 4430 4520 5730 5820 5840 592 由表 5 可见 色素在碱性条件下稳定 适合于碱性环境中使用 4 2 色素的热稳定性 取色素浓缩液 以乙酸乙酯稀释 分装 3 个 25mL 的容量瓶中分别在 30 60 90 3 种不同温度随加热时间的增加 测其 A 值 观察变化 结果见表 6 表 6 温度对色素的影响 加热时间 min 温度 01020304050 300 3720 3660 3610 3680 3520 352 600 3720 3620 3590 3720 3630 354 900 3720 3600 3420 3690 3650 352 由表 6 可看出色素水溶液随温度变化很小 说明热稳定性较好 在生产实践 中应用是很理想的 4 3 色素光稳定性 取 2 组色素稀释液 调节 pH 值为 7 一组置于日光灯光处 一组避光保存 实验结果见表 7 表 7 自然光对色素的影响 时间 h 0246 A 光照 0 3600 3450 3320 321 A 避光 0 3600 3540 3500 348 由表 7 可看出番茄红素提取液在日光灯照射后有降低 说明