HPLC+在血红蛋白病中的应用伯乐

地中海贫血的防治,人体不同发育时期的血红蛋白及组成,Hb Gower1 (22 ) ：胚胎血红蛋白 。Hb Gower2 (22 ) ：胚胎血红蛋白 。 Hb Portland （2 2 ） ：胚胎血红蛋白 。 HbF（22 ）： 为胎儿血红蛋白，出生前及新生儿期占80%，出生6个月后降至不足1%。 HbA（22）：成人主要血红蛋白，在成人及6岁以上儿童的红细胞中占90%，孕晚期、新生儿红细胞中约20%。 HbA2（ 22 ）：占2.5-3.5%，地贫病人中含量上升， 地贫、缺铁性贫血、成高铁红细胞贫血病人中含量降低。,血红蛋白病,定义：由于某种珠蛋白基因缺陷引起血红蛋白分子构成或合成速率异常所致的遗传性血液病。根据其发病机制可分为异常血红蛋白病和地中海贫血两类,地中海贫血的定义和分类,定义：是由于珠蛋白基因的缺失或突变所致肽链合成速率降 低，导致链和非链的合成不平衡，所引起的遗传性溶血性疾病。分类：组成珠蛋白的肽链有4种，即、链，分别由其相应的基因编码，这些基因的缺失或点突变可造成各种肽链的合成障碍, 致使血红蛋白的组分改变。通常将地中海贫血分为、等4种类型，其中以、地中海贫血最为常见。,地中海贫血分布,主要见于地中海地区、印度、非洲、东南亚地区及我国南方等地。我国以广西、广东、海南、江西、湖南、 四川等地多见。WHO估计全球地中海贫血携带者有1.8亿人，每年出生重型地中海贫血患者有20万以上。,地中海贫血携带率,地区 地贫 地贫 合计广西 17.55 6.43 23.98广东 8.53 2.54 11.07四川 1.92 2.18 4.1香港 5.02 3.41 8.43台湾 4.2 0 1.10 5.30,地贫,珠蛋白基因簇位于16p13.3，每条染色体各有2个珠蛋基因，一对染色体共有4个珠蛋白基因。大多数地贫是由于珠蛋白基因的缺失所致，少数由基因点突变造成。故分缺失型地贫非缺失型地贫,缺失型地贫,1、标准型地贫 缺失累及同条染色体上紧密连锁的2、1两个珠蛋白基因，缺失约20kb的基因组的DNA片段，基因型为/-SEA。是东南亚和国内南方地区、香港及台湾等地最常见类型，亦称为东南亚缺失型地贫。2、静止型地贫 - 4.2/（左缺失）：缺失一个含2珠蛋白基因在内的4.2kb的DNA片段。 - 3.7 /（右缺失）：缺失一个含部分1和 部分 2珠蛋白基因在内的3.7kb的DNA片段。,非缺失型地贫,目前报道有40多种非缺失型地贫，国内常见有以下3 种：1 、HbCS ：广西占1.21%，珠蛋白基因终止密码子突变（TAA CAA），此时移码延至第173位上出现的另一个新的终止密码子，结果生成了一种极不稳定mRNA.2 、HbQS（T T C C）：0.36%3、HbWS（G G A A）：1.55%,地贫临床分类,静止型地贫轻型地贫中间型地贫重型地贫,静止型地贫诊断,基因型：- 3.7/、-4.2/ 、 / T 。CSQS ，4.2、3.7WS。无临床症状。 血象正常， Hb正常，MCV 、MCH多数下降。Hb电泳正常。,轻型地贫诊断,基因型：/- - 、- 3.7/-4.2 、- 3.7/-3.7 、- 4.2/-4.2 、T /- 。大多无临床症状。Hb正常或轻度下降，MCV82、MCH60%，HbPortland1029% ， 微量HbH，没有HbA、HbA2 、HbF。,巴氏水肿儿,地中海贫血,地贫：珠蛋白基因的缺陷导致珠蛋白合成障碍。珠蛋白基因簇位于11p15.5，地贫的发生主要是由于基因的点突变，少数为基因缺失。至今发现的地贫点突变达200多种，国内已发现38种，广西常见的突变有以下10种：,基因突变 比例 Codons 41/42 (TTCT) 48.37Codon 17 (AT) 27.4028 (AG) 5.35IVS-II-654 (CT) 5.26Codon 26 (GA) 4.51Codons 71/72 (+A) 4.51IVS-I-1 (GA) 3.01Codon 43 (GT) 1.2529 (AG) 0.25Codons 27/28 (+C) 0.08,轻型地贫,无症状或轻度贫血。98%地贫杂合子MCV、MCH下降。Hb电泳HbA2 4-8%，50%患者HbF增高，约为1-3% 。基因检测为地贫杂合子。,中间型地贫,临床症状介于轻型和重型之间，幼童期间出现症状，肝脾轻度或中度肿大，生长发育障碍较轻，骨骼改变较轻。依据病情给予输血和去铁治疗。中度贫血，MCV、MCH 下降。Hb电泳HbF增高。基因检测为地贫双重杂合子或合并地贫。,重型地贫诊断,出生后3-6个月出现症状，呈慢性进行性溶血性贫血，脸色苍白，黄疸，肝脾肿大，头颅变大、额部隆起、颧高、鼻梁塌陷，两眼距增宽，形成地贫特殊面容，生长发育障碍，容易合并感染。并发症： 含铁血黄素沉着症，心力衰竭等，常于童年期夭。重度贫血， MCV 、MCH 下降。外周血涂片红细胞体积小，形态不一，靶型红细胞常见，网织红细胞增高。Hb电泳HbF30%，HbA缺乏基因检测为地贫双重杂合子或纯合子。,地贫患儿,地中海贫血的预防,第一道防线 婚前检查 男女双方在结婚前应到有条件的综合医院、妇幼保健院等机构进行遗传咨询及相关检查。（了解自己是否为地贫基因携带者）第二道防线 产前筛查和基因诊断（诊断自己是否怀上地贫胎儿）产前筛查时期: (1)绒毛膜采样检查：孕后8-11周进行； (2)羊水穿刺检查：孕后16-21周进行； (3)脐带血穿刺检查：孕后18-24周进行。,地中海贫血处理要点,1、红细胞平均体积（MCV）、红细胞平均血红蛋白含量（MCH）、Hb是筛查地贫常用的最重要指标。2、MCV 82100fL，MCH 2735pg。MCV低于82应疑为地贫，需做进一步确诊，配偶亦要做进一步的排除。3、血常规要用血细胞分析仪，注意质控。4、Hb电泳正常不等于无地贫。5、夫妇MCV、MCH均降低，须双方地贫基因检查确诊，为同类型地贫才进行产前诊断。6、夫妇一方为标准型地贫，另一方须检查血常规、电泳及 地贫基因以彻底排除地贫以防漏诊。,地中海贫血的治疗,一般治疗输血治疗药物治疗脾切除或脾动脉栓塞术造血干细胞移植基因治疗,一般治疗,轻型携带者，一般不需治疗或仅行一般性治疗。中间型地中海贫血与蚕豆病一样应避免感染和使用氧化性药物。应注意营养和休息，预防感染, 口服叶酸、维生素C 等以补充造血原料，忌用铁剂。,输血治疗,中间型地贫一般不输血，但在感染、应激、手术等情况下，可适当给予浓缩红细胞输注。重型地贫 ,高量规则输血联合去铁治疗是基本的治疗措施。高量或超高量输血，更有利于保证患儿的正常生长发育，抑制骨髓外造血，减轻肝脾肿大，减少肠道铁吸收减轻骨骼畸形和慢性低氧血症,并减轻心脏负担以延长患儿的生存期，使其生长发育良好。,药物治疗,铁螯合剂治疗：重型地贫患儿, 由于反复长期的输血而产生铁负荷过重,导致含铁血黄素沉着症, 可驱铁治疗。基因活化治疗：用化学药物用于地贫患儿,刺激其珠蛋白基因(基因）表达增加,改善临床症状，称为基因活化治疗。其中以5-氮杂胞苷和羟基脲研究较深入。,脾切除或脾动脉栓塞术,切脾适应证:中间型地贫患儿,可合成不同程度的链与链,形成HbA,4包涵体较少,不同形态的红细胞进入体循环而后在脾内破坏,出现骨髓外溶血,故脾切除