第15章 甾体激素类药物的分析

第十五章,甾体激素类药物的分析,基本结构：环戊烷并多氢菲,A,B,C,D,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,一、基本结构及分类,分类：,甾体激素,肾上腺皮质激素,性激素,雄性激素及蛋白同化激素,孕激素,雌激素,二、结构与性质,1. 肾上腺皮质激素,2. 雄性激素及蛋白同化激素,3. 孕激素,4. 雌激素,二、鉴别试验,（一）与强酸的呈色反应,甾体激素类药物,呈色,H2SO4 H3PO4 HClO4 HCl,（母核）,(二) 官能团的反应,肾上腺皮质激素药物,呈色,四氮唑盐费林试液多伦试液OH,1 C17 醇酮基,还原性,A. 呈色反应,肾上腺皮质激素药物,Cu2O橙红色,碱性酒石酸铜,B. 沉淀反应,Ag黑色,氨制硝酸银,甾体类激素药物,黄色的腙,羰基试剂,2. C3酮基和C20酮基,常用的羰基试剂：2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼,黄体酮,蓝紫色,亚硝基铁 氰化纳,其他甾体,淡橙色不显色,3. 甲酮基呈色反应,雌激素类药物,红色偶 氮染料,重氮苯磺酸,4. 酚羟基,含炔基的甾体激素,白色银盐沉淀,硝酸银,5. 乙炔基,有机氟,F,有机破坏,有机氯,Cl,6. 有机卤素,茜素氟蓝 硝酸亚铈,硝酸硝酸银,AgCl,蓝色配合物,-3-酮 240nm,苯环 280nm,（三） UV法,（四） IR法,（五） TLC法,主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别,（六） HPLC法,主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别（如：醋酸曲安奈德软膏、醋酸氟轻松软膏）,三、 杂质检查,（一）有关物质检查,定义 与标示药物结构不同的甾体化合物都称为“有关物质”,（1）TLC法（高低浓度对比法）,判定方法： 规定杂质斑点数目 规定杂质斑点颜色,（2）HPLC法（高低浓度对比法）,判定方法： 规定杂质峰数目 规定杂质峰面积,（二）游离磷酸的检查,地塞米松磷酸钠氢化可的松磷酸钠倍他米松磷酸钠氢化泼尼松磷酸钠,对照品法,（三）有机溶剂残留量的检查 甲醇和丙酮,甲醇 0.3%,丙酮 0.5%,GC法,USP、BP、JP均采用,RPHPLC（大多内标法）,特点 用样量少，灵敏度高，分离效 果好，测定速度快例：黄体酮的含量测定：ODS柱；甲醇-水（65：35）；254nm内标：己烯雌酚,（甾体激素类药物常含有结构相似的其他甾体杂质，对利用结构特征设计的比色法有干扰）,四、含量测定,（二）UV法,-3-酮 240nm（）,肾上腺皮质激素雄性激素和蛋白同化激素孕激素,苯环 280nm（）,雌激素,（三）比色法,弱、非分光光度活性药物,强分光光度活性药物,化学反应,肾上腺皮质激素类,C17 -醇酮基,强还原性,1. 原理,四氮唑比色法,制备对照液 制备供试液,加入四氮唑盐,有色产物,484nm,AX CX,AR,标示量（%）=,AX,AR V标示量,100%,2、方法：以醋酸地塞米松为例,3. 讨论,（1） 基团对反应速度的影响,C11= O C11OH,C21OH C21-酯,（2） 溶剂、水分的影响,含水量5%,含水10%A10%含水30%几无反应, 无水乙醇,（3） O2与光线的影响,反应过程反应产物,怕光,避光、快速,O2影响颜色强度和稳定性,隔绝空气、 快速、充N2,（4）碱的种类及加入顺序,反应应在强碱性（pH13.75）条件下进行以氢氧化四甲基铵的结果最佳,加入顺序：,（5） 温度与时间,t甲瓒分解,肾上腺皮质激素、 雄性激素和蛋白同化激素、孕激素,C3酮基,1. 原理,2.测定方法,3.讨论,反应速度,（1）,C3= O C17= O 、 C20= O C11= O 不反应,反应专属性 C3酮基,（2）溶剂的选择,异烟肼盐酸盐甲醇、乙醇,无水甲醇无水乙醇,原理,雌激素,1、熟悉本类药物的分类，掌握其结构 特征与分析方法的关系2、熟悉某些官能团的呈色反应，了解其他鉴别方法3、掌握本类药物中其他甾体的检查方 法，了解其他特殊杂质的检查,第十章 复习内容,4、掌握四氮唑比色法、异烟肼比色法 的原理、方法及测定条件。了解 UV法、Kober反应比色法及HPLC 法在其含量测定中的应用,.Kober反应是指雌激素类药物与_共热