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实验四糖发酵实验 1 一 目的要求 1 了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用 2 掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法 2 二 基本原理 糖发酵试验是最常用的生化反应 在肠道细菌的鉴定上尤为重要 绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源 但是它们在分解糖的能力上有很大的差异 有些细菌能分解某种糖并产酸 如乳酸 醋酸 丙酸等 和气体 如氢 甲烷 二氧化碳等 有些细菌只产酸不产气 例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气 伤寒杆菌能分解葡萄糖产酸不产气 不能分解乳糖 普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气 不能分解乳糖 3 二 基本原理 酸的产生可利用指示剂来断定 在配制培养基时预先加入溴甲酚紫 Ph5 2 黄色 6 8 紫色 当发酵产酸时 可使培养基由紫色变为黄色 气体的产生可由发酵管中倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明 4 三 实验材料 1 大肠杆菌 普通变形杆菌 Proteusvulgaris 斜面各1支 2 盛有葡萄糖发酵培养基的试管和乳糖发酵培养基的试管各3支 内装有倒置的德汉氏小管 试管架 接种环等 5 图1糖类发酵试验 6 四 操作步骤 1 编号用记号笔在各试管上分别标明发酵培养基名称和所接种的菌名 2 接种取盛有葡萄糖发酵培养基的试管3支 按编号1支接种大肠杆菌 另1支接种普通变形杆菌 第3支不接种 作为对照 另取乳糖发酵培养基试管3支 同样1支接种大肠杆菌 1支接种普通变形杆菌 第3支不接种 作为对照 3 将上述已接种的葡萄糖和乳糖发酵试管和对照管置37 温室中培养24小时 7 注意事项 接种后应轻轻摇动试管 使其均匀 防止倒置的小管进入气泡 否则会造成假象 得出错误答案 8 9 10 11 观察结果 观察结果时 看各管颜色变化及杜氏小管有无气泡 产酸产气用 表示 只产酸不产气用 表示 不产酸也不产气用 表示 12
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