植物病理学实习心得体会

1/15植物病理学实习心得体会植物病理学实习总结报告学院：资源环境学院年级：XX级专业：植物保护微生物工程组别：第三小组姓名：戴泽翰学号：XX30XX08指导老师：李敏慧、刘琼光、周国辉、徐大高、杨媚、谢辉、何艺郡目录一、前言-3二、实习目的与意义-3三、实习内容与方法-3实验一植物病害标本的采集和制作-4实验二植物病原的分离与培养-8实验三植物病原真菌玻片标本制作-12实验四植物病原线虫的分离及形态观察-14实验五植物病毒检测-15四、实习结果与分析-18五、收获与体会-19六、参考文献-202/15植物病理学实习总结报告戴泽翰XX30XX0808植保微生物1班一、前言植物病理学是主要研究引起农作物病害发生的各种生物与非生物引子及其致病机制、病原物与寄主间相互关系和控制病害发生、减轻发病程度、减少病害所致损失的原理及具体措施的一个重要农业学科。学习基本的植物病理学、流行学知识，掌握常见农业病害鉴别和病原物采集、分离等技能，是对作为高等农科院校植保专业学生提出的要求。为巩固和印证所学的植物病理知识，增强学生对本地区主要作物及主要植物病害的直观认识，我校资环学院为植保专业安排了植物病理学课的实习，以加强学生理论结合实际，提高分析问题和解决问题的能力，二、实习目的与意义巩固和印证所学植物病理学基础理论知识熟练掌握植物病理学实验操作技能通过室内外观察，认识本地区主要作物及主要植物病害的形态特征加强理论联系实际，提高分析问题和解决问题的能力三、实习内容与方法植物病害标本的采集和制作及常见病害鉴定植物病原的分离与培养3/15植物病原真菌玻片标本制作线虫病害标本的采集、分离与鉴定植物病毒检测实验一植物病害标本的采集和制作及常见病害鉴定一、实验目的植物病害标本是植物病害及其分布的事务性记载，有了标本即可在室外观察的基础上，开展室内各方面的工作，特别是病害诊断和病原物的分离鉴定工作，没有合格的标本更无从谈起。因此，病害标本的采集和制作是植物病害研究和实验的基本建设工作，植病标本的采取和制作是植保人员必须掌握的的基本技术之一。通过本次标本采集和制作实践实习，学习标本采集和制作的常用方法二、实验步骤标本采集1、外出实习地点华农大农场华农大增城宁西基地广州白云区蔬菜地2、采集方式与标本采集要求直接从病害植株以手、刀、剪刀提取病样。症状应具有典型性。标本应有典型的病状和病症，最好有不同阶段和不同部位的症状。这样才能使标本起到帮助人们正确识别病害的作用。4/15真菌病害标本应采集有子实体的。对于真菌病害来说，鉴定病原物是正确诊断病害的重要条件之一，因此要求真菌病害标本必须有病菌的子实体。每种标本上的病害种类应力求单纯。如果一份标本上同时有几种病害，就会混淆视线，影响鉴定，这样就没有适用价值。采集时应进行必要的记载，以辅助标本不足。记载的内容应包括：寄主名称、发病情况、环境条件、以及采集日期、地点、采集人姓名等。寄主的鉴定也很重要，有些病害如锈病，不知道寄主是无法鉴定的。对于不认识的寄主植物。应将寄主鉴定所必需的部分，如枝、叶、花及果实等部分都采集齐全。适于干制的标本，应随采随压于标本夹中，尤其容易干燥卷缩的标本如水稻、小麦的叶片，最好立即夹在厚书本中，否则叶片失水卷缩后无法展平。柔软多汁或腐烂的标本，应用纸袋或标本纸包好，然后置于标本箱中，以免污染和挤坏标本，妨碍鉴定。黑白粉病、锈病、霜霉类标本等由于病菌孢子极易散落，所以采集时应用纸袋或标本纸包好后，再置于采集夹中或采集箱中，以免混杂妨碍鉴定。每种标本采集的数量不宜过少，以便在制作和应用中留有余地。标本制作5/151本实验采取干制法制作腊叶标本。2基本原理：利用标本纸快速把病样标本脱水，并加压把标本压成美观的平面标本。干燥愈快愈能保持标本原有的色泽。3操作：把适于压制的病样如植物的茎、叶以及去掉果肉的果皮等，整形后分层压在标本夹中，放一层标本纸放一层标本，每个标本夹的总厚度以三寸左右厚为宜，用绳子将标本夹压紧。每隔一至两天就打开标本夹检查标本纸的干湿程度，及时更换较湿的标本纸。在第一次换纸时，同时将标本整形，使其达到既美观又便于观察的要求。将完全干燥的病样标本用透明胶、双面胶等固定在白纸上，纸张右下角写上标签实验结果1、制作了丝瓜霜霉病、玉米小斑病、水稻纹枯病、水稻白叶枯病、玉米黑粉病、茶轮斑病、竹黑痣病、玫瑰黑斑病、稻曲病的标本。图1-1植物病理学教学实习报告专业：森林与观赏植物保护姓名：孙赛金6/15学号：092001110日期：XX年6月1日目录实习一培养基的制作及灭菌实习二植物病原菌的分离培养实习三植物病害的接种实习四林木种子的病理检验实习五野外植物病害调查报告实习六参观江苏省检验检疫局报告实习七：实习总结报告实习一培养基的制作及灭菌一.目的要求1.了解培养真菌及细菌最常用的两种培养基制作的方法和选择的不同培养基的意义。2.了解培养基和实验室常用玻璃器皿灭菌方法的要领和原理。二.内容步骤1.培养基的制作：制作马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基和牛肉汁、蛋白胨、琼脂培养基。马铃薯、蔗糖、琼脂培养基的配制：去皮马铃薯100g7/15蔗糖10g琼脂9g水500ml按组为单位，每组500ml。将马铃薯切成片，加足水煮沸半小时，用纱布滤去马铃薯渣，滤液内加入糖和琼脂完全溶化，并加入适量的水保持原体积，分装在试管中，12毫升30管。分装时注意不要将培养基滴到试管口上，加棉塞等待灭菌。该培养基的营养成份适应大多数真菌的生长，且配置后呈微酸性，所以也无需调节PH值。牛肉汁、蛋白胨、琼脂培养基的制作：牛肉浸膏蛋白胨6g琼脂水600ml按组为单位，每组600ml。在600ml水中加入一定量的牛肉浸膏和蛋白胨，溶化后用NaOH溶液和HCL溶液试纸3L酸度计指示下，调节PH值到微碱性。加入琼脂，溶化后分装在试管中加棉塞等待灭菌。分装还是12毫升的30管。2.灭菌干热灭菌：8/15是利用热空气杀死微生物的作用。适用于干热灭菌的物品有玻璃器皿等。灭菌之前用纸包好，放在烘箱内。调节温度，是温度上升到160180摄氏度之间，保持一小时。注意：不要超过180摄氏度，以免使包装纸燃烧。物品要清洁、干燥，以防器皿破裂和以后难以洗涤；灭菌过程中不得开烘箱门，结束时待温度自然下降至50摄氏度一下，再开门取物，否则器皿容易破裂；具橡胶部件的仪器不得以此法灭菌。高压蒸汽灭菌：主要利用穿透力强的高温水蒸汽杀死微生物。待灭菌物品用纸或其它东西密封，放入锅内。灭菌锅在排除了空气的情况下，水汽的温度会超过100摄氏度。当压力在两个大气压时蒸汽可达121摄氏度。此种压力保持2030分钟可基本上杀死一切微生物及孢子。如进行土壤灭菌，因其孔隙多，需2小时才行。高压蒸汽灭菌的步骤下：锅内加水到止水点。将物品放入灭菌锅内，盖上盖子并拧紧螺丝。下面加热，待指针到5磅时，打开气门排除空气，标志是见到白色蒸汽有力冲出为止。关闭气门继续加热，压力上升到15磅，减小火力，保持在15磅压力下2030分钟。9/15灭火。打开排气门排除蒸汽，使压力约在5分钟内降到零。启盖、取物。做斜面的趁热将试管斜靠在别的物体上，冷凝后即成斜面培养基。三作业1.配置两种培养基并灭菌，制作灭菌水，留给下面实验用。2.哪种培养基要调节PH值？牛肉汁、蛋白胨、琼脂培养基需要调节PH值马铃薯、蔗糖、琼脂培养基的配制普通植物病理学实习报告11植物保护1班#￥一、实习目的通过两周的课程教学实习，巩固和加深对课堂所学知识的理解，将所学的理论知识用于分析实践问题，学会灵活运用课程知识解决生产实践问题，使对知识的掌握上一个台阶。通过实际操作和训练，掌握课程实践教学大纲所规定的专业基本操作和实践技能，主要包括：病害标本采集方法、病害调查方法、病害田间诊断方法、不同病原类型的田间识别和症状观察、培养基制备、病原真菌和细菌的分离培养、线虫的分离和形态观察、病10/15原真菌的玻片标本制作技术、病害鉴定技术、植物病害过塑标本和镜框标本制作法等。二、实习内容与方法植物病害标本的采集和制作及常见病害鉴定植物病原的分离与培养植物病原真菌玻片标本制作植物病害过塑标本的制作线虫的分离三、实验步骤标本采集1、外出实习地点华农大农场华农大增城宁西基地广州白云区蔬菜地2、采集方式与标本采集要求直接从病害植株以手、刀、剪刀提取病样。症状应具有典型性。标本应有典型的病状和病症，最好有不同阶段和不同部位的症状。这样才能使标本起到帮助人们正确识别病害的作用。真菌病害标本应采集有子实体的。对于真菌病害来说，鉴定病原物是正确诊断病害的重要条件之一，因此要求真菌病害标本必须有病菌的子实体。每种标本上的病害种类应力求单纯。如果一份标本上同时有几种病害，就会混淆视线，影响鉴定，这样就没有适用价值。采集时应进行必要的记载，以辅助标本不足。记载11/15的内容应包括：寄主名称、发病情况、环境条件、以及采集日期、地点、采集人姓名等。寄主的鉴定也很重要，有些病害如锈病，不知道寄主是无法鉴定的。对于不认识的寄主植物。应将寄主鉴定所必需的部分，如枝、叶、花及果实等部分都采集齐全。适于干制的标本，应随采随压于标本夹中，尤其容易干燥卷缩的标本如水稻、小麦的叶片，最好立即夹在厚书本中，否则叶片失水卷缩后无法展平。柔软多汁或腐烂的标本，应用纸袋或标本纸包好，然后置于标本箱中，以免污染和挤坏标本，妨碍鉴定。黑白粉病、锈病、霜霉类标本等由于病菌孢子极易散落，所以采集时应用纸袋或标本纸包好后，再置于采集夹中或采集箱中，以免混杂妨碍鉴定。每种标本采集的数量不宜过少，以便在制作和应用中留有余地。标本制作把适于压制的病样如植物的茎、叶以及去掉果肉的果皮等，整形后分层压在标本夹中，放一层标本纸放一层标本，并写上标签每个标本夹的总厚度以三寸左右厚为宜，用绳子将标本夹压紧。每隔一至两天就打开标本夹检查标本纸的干湿程度，及时更换较湿的标本纸。在第一次换纸时，同时将标本整形，使其达到既美观又便于观察的要求。12/15植物病原的分离与培养实验前准备清洁环境：分离工作严格说应在无菌条下进行，无菌室或无菌箱是分离不可缺少的设施。若限于条件实验只能在普通房间进行时，必须对房间进行彻底扫除，清洁环境、搞好卫生。地上多洒些水，以消除室内尘埃，分离开始前准备好一切用品，避免工作过程中频繁走动，以破坏环境带来杂菌，工作台上铺好湿毛巾，点燃酒精灯。实验材料及用品准备1病组织材料玉米小斑病病叶水稻纹枯病病叶水稻白叶枯病病叶2用品准备%升汞溶液；95%酒精；1000ppm链霉素；瓶装牛肉膏蛋白胨培养基；瓶装马铃薯琼脂培养基；此外，还有以下备品，无菌水1瓶，灭菌培养皿6付，灭菌1毫升吸管2支，解剖剪、解剖刀和镊子各1把，移植环，移植钩、酒精灯、珐琅盘和试管架各1个，毛巾1条，玻璃铅笔1支及火柴等。实验步骤玉米小斑病与水稻纹枯病原分离1、取样。取患玉米小斑病、水稻纹枯病的病样，分别切取材料2-3mm长的病健交界处。2、表面消毒。将病组织用清水洗净，接着放到75%酒13/15精里浸泡30s，然后放到%升汞里浸泡1min，最后用无菌水洗3次。3、培养。把材料放到PDA培养基上并在25培养箱里培养23天，观察结果。水稻白叶枯病原分离1消毒：将剪下的植物组织用清水洗干净，然后用75%的酒精浸泡30秒，在用%的升汞洗1分钟，最后用无菌水洗涤3次。2捣碎：取用一个灭菌小皿，向内滴加12滴无菌水，然后灭菌剪刀剪碎已洗涤好的组织，放入水中静置5-10分钟，制备成菌悬液。3划线：用接种环取一环菌悬液进行平板划线。4培养：将平板倒置，写标签，至于28-30摄氏度培养，2天后，观察分离结果。植物病原真菌玻片标本制作1.内容、材料和方法实验材料：苦瓜霜霉病病叶、竹子黑痣病病叶实验器材：解剖针、剪刀、载玻片、盖玻片、无菌水、立体显微镜2.实验步骤苦瓜霜霉病病原装片制作1取苦瓜霜霉病病叶，用剃刀或解剖针轻轻刮取苦瓜霜霉病病叶上的白色粉状物。2在载玻片上点一滴绵蓝乳酚油，将针尖或刀片浸于绵蓝乳酚油中，使锈粉进入漂散于绵蓝乳酚油滴中。重复以上操作，待获得足够锈粉后，盖上盖玻片。贴上标签。14/153显微镜下观察。竹子黑痣病病原装片制作。1取竹子黑痣病病叶，选取带黑色突起较多的部位，用刀片切取*1cm规格的薄片。2.在立体显微镜下，徒手切片。2切得所需薄片后，置于绵蓝乳酚油的载玻片上，盖上盖玻片。用钝物轻轻压平，置于显微镜下观察。并贴上标签。植物病害过塑标本的制作材料：熨斗，过塑机等实验步骤1.选取特征明显，典型的植物病害样本用熨斗烫平。2.制作植物病害标签。3.一个样本对应一个标签放在一起，过塑。线虫病害标本的采集、分离与鉴定1.内容、材料和方法塑料袋，铁铲，贝曼漏斗，解剖镜，显微镜，培养皿，酒精灯，解剖针等2.实验步骤1，采样线虫多在植物生