药物分析-第十五章

高职高专系列教材配套电子教案,药物分析,高等教育出版社,高等教育电子音像出版社,主编 张骏 方应权,（第2版）,第十五章 中药制剂分析,本 章 内 容,一、中药制剂的类型与质量分析方法的特点二、中药制剂的分析方法,特色制剂： 各种丸剂、散剂、煎膏剂、丹剂、 合剂、酒剂、酊剂、露剂等 现代制剂：片剂、注射剂、颗粒剂、滴丸等,一、中药制剂类型,第十五章 中药制剂分析,第一节 中药制剂的类型及质量分析特点,二、中药制剂质量的分析特点1. 化学成分的多样性与复杂性 (1) 物质结构差异大：既有有机成分，也有无机成分；既有非金属，也有金属物；既有有效成分，也有无效成分； （2） 多种类别的有机化合物共存：如，生物碱、黄酮、蒽醌、苷等 （3）含量差别悬殊,第十五章 中药制剂分析,第十五章 中药制剂分析,二、中药制剂质量的分析特点2. 原料药质量差别大 (1) 影响原料药材质量稳定的因素多：品种、规格、产地、生长环境、药用部位、采收季节、加工方法等 （2） 炮制方法有影响3. 中药制剂质量的评价标准与体系有特色以中医理论为指导原则，现代药品质量控制的理念与传统方法相结合；现代分析技术与传统方法相结合,二、中药制剂质量的分析特点 4. 中药制剂工艺及辅料的特殊性（1）工艺的多样性与不稳定性（2）辅料的多样性与质量不稳定性 5. 中药制剂杂质来源的多途径性（1）生产中引入（2）药材、辅料中引入（3）工艺中引入,第十五章 中药制剂分析,一、取样 原则：科学性、真实性和代表性二、供试品溶液的制备1.提取方法（1）萃取法：利用不同组分在不相溶溶剂中溶解度不同而提取的方法，根据应用，又可分为：单一溶剂萃取法、多个溶剂分段萃取法、溶液萃取法、固液萃取法、液液萃取法等。萃取中注意的问题： A. 萃取溶剂极性的选择；B. 弱酸、弱碱性成分萃取时pH的选择；C. 乳化的防止与消除；D. 萃取的回收率大小,第十五章 中药制剂分析,第二节 中药制剂分析的基本方法,（2）冷浸法：将溶剂加入样品粉末中，在室温下放置一定时间，组分随扩散从样品浸出的提取方法（3）回流提取法：在烧瓶中，固体粉末加入一定的有机溶剂，水浴加热至微沸提取溶解于有机溶剂的组分；本法适用于固体制剂，但对热不稳定或挥发性组分因组分热分解或逸失而不适用,第十五章 中药制剂分析,（4）连续回流提取法：利用索氏提取器连续提取；应用低沸点的溶剂，如甲醇、乙醚等例1：防风通圣丸的供试品溶液制备：,第十五章 中药制剂分析,样品细粉15g,三氯甲烷溶液,残渣,滤液,三氯甲烷溶液,稀硫酸，三氯甲烷，回流8h,蒸干,0.1mol/L氢氧化钠溶液使呈碱性，滤过,稀盐酸调节pH2-3，三氯甲烷提取，加热浓缩,（5）水蒸气蒸馏法：适用于可随水蒸气蒸出的挥发油等热稳定的小分子挥发性组分的提取。（6）超声提取法：利用超声波的助溶作用提取固体制剂中的组分，该法提取时间短。（7）超临界流体萃取法：当压力和温度超过物质的临界点时，兼具气、液两种性质单相态流体有利于高效、快速提取中药制剂中的多种组分。常用超临界流体有CO2和N2O,第十五章 中药制剂分析,2. 纯化方法（1）柱色谱法：常用；硅藻土、化学键合相、氨基键合相、腈基键合相、硅胶、氧化铝、聚酰胺及大孔树脂，其中中性氧化铝小柱多用。（2）萃取法（3）其他,第十五章 中药制剂分析,三、鉴别试验（一）鉴别目的与对象：确认所含药味的存在；应首选君药、臣药（二）方法1. 显微鉴别：借助显微镜对药材的切片、粉末、组织等进行纤维结构（组织、细胞、内含物质）特征进行辨识。本法师中药制剂主要的鉴别方法。,第十五章 中药制剂分析,2. 化学鉴别：利用药材中特定成分结构、官能团与一定试剂发生化学反应进行鉴别，专属性强，灵敏度高。3. 色谱鉴别：高效、灵敏（1）薄层色谱法A. 固定相选择：氧化铝适用于生物碱类成分；聚酰胺适用于黄酮类和酚类；纤维素适用于氨基酸类物质,第十五章 中药制剂分析,B. 点样：点状或条带状C. 展开剂：混合有机溶剂；通过加入不同比例极性不同的有机溶剂，调节合适的Rf值（0.2-0.8）。极性溶剂比例大，则Rf值大，反之，则Rf值小D. 检测：供试液主斑点与对照主斑点相对应,第十五章 中药制剂分析,第十五章 中药制剂分析,例2.牛黄上清丸中黄连及黄连素的鉴别：供试液2ul，对照药材溶液和对照品溶液各1ul，分别点样于硅胶G板，展开剂为苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨试液（12:6:3:3:1），紫外灯下检视。1-5：牛黄上清丸；6：黄连对照药材；7：黄连素,（2）气相色谱法（GC）：适用于挥发性成分的鉴别（3）高效液相色谱法4. 光谱鉴别法：紫外分光光度法、红外分光光度法等,第十五章 中药制剂分析,四、杂质检查1. 水分（1）烘干法:2-5供试品，置于干燥恒重称量瓶（5mm厚），100-105干燥5h，精称，继续干燥1h，精称，直至恒重。根据重量减失计算含水量（%）。本法适用于不含或少含挥发性成分的药品。（2）甲苯法：利用水与甲苯在69.3共沸蒸出，收集馏出液，分层后测定水的含量。,第十五章 中药制剂分析,例3. 甲苯法测定白芷中水分含量,第十五章 中药制剂分析,供试品，精称，置A中,加甲苯200ml置A，再自冷凝管加甲苯至B狭细部,加热，至每秒馏出2滴,水量不再增加为止，冲洗冷凝管部的甲苯,继续蒸馏 5 min，检读水量,第十五章 中药制剂分析,分析：白芷中水分较大，可选用甲苯法测定水分。,读取水分的体积,加入甲苯,供试品甲苯,注意：甲苯应蒸馏后，无水使用；仪器应清洁、干燥；本法适用于含挥发性成分药品的水分测定，不适于微量水分的测定,返 回,（3）减压干燥法：本法适用于测定含有挥发性成分的贵重药品的水分检查（4）气相色谱法：以纯化水为对照，无水乙醇为溶剂，测定贵重药材及其制剂的含水量。系统适用性试验：色谱柱：二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球载体，柱温：140-150；检测器：热导检测器；水峰理论板数应大于1000，乙醇峰理论板数应大于150；水与乙醇分离度应大于2；水峰相对面积相对偏差应不大于3.0%,第十五章 中药制剂分析,2. 总灰分和酸不溶性灰分总灰分：药材或制剂经加热炽灼、灰化遗留的无机物，包括无机盐、泥土、砂石等。例4. 当归总灰分和酸不溶性灰分测定A. 空坩埚550恒重：28.5625 g，28.5624 gB. 取样: 3.0245 gC. 炽灼炭化，550灰化；D. 坩埚+样品恒重：28.6691 g，28.6688 gE. F. 酸不溶性灰分: 上述灰分加稀盐酸10 ml，水浴，滤过，滤渣干燥、炽灼至恒重,第十五章 中药制剂分析,G. 550坩埚+样品恒重：28.5788 g， 28.5787 gH. 计算：I. 判断：总灰分3.7%（限度），合格；酸不溶性灰分 2.0%（限度），合格.,第十五章 中药制剂分析,3. 重金属：重金属指铅、汞、镉等对人体有毒金属杂质。方法有两种：原子吸收分光光度法和电感耦合离子体质谱法4. 砷盐5. 残留农药,第十五章 中药制剂分析,五、含量测定（一）含量测定对象君药及贵重药无法测定君药时，可依次选择臣药和其他药味有效成分明确的，可测定有效成分含量成分类别清楚的，可测定该类别总成分所测成分应归属某单一味药所测成分最好与中医用药的功能主治相近无法测定含量的，选择适当溶剂，测定浸出物含量,第十五章 中药制剂分析,（二）常用测定方法1. 高效液相色谱法（1）极性小的待测物用反相色谱；极性大的待测物可用正相色谱（2）等度洗脱与梯度洗脱（3）检测器：紫外检测器最常用（4）色谱系统适用性检测：理论板数、分离度、重复性和拖尾因子,第十五章 中药制剂分析,2. 薄层色谱扫描法（TLCS）：用一束一定波长、一定强度的紫外或可见光对薄层板进行扫描，测定薄层板上的样品斑点对光的吸收强度或斑点经激发后所产生的荧光强度的方法。常见的测定方式有：（1）反射法与透射法（2）线性扫描与锯齿扫描（3）单波长测定与双波长测定,第十五章 中药制剂分析,第十五章 中药制剂分析,3. 气相色谱法（1）色谱柱：填充柱与毛细管柱（2）载气：常用氮气（3）进样：直接进样、顶空进样（4）检测器：FID、TCD、ECD、MS，FID最常用， 有机氯农药常用ECD,第十五章 中药制剂分析,例5. 血栓心脉宁胶囊的含量测定测定对象（君药中的有效成分）：芦丁色谱条件与系统适用性试验：C18烷基硅烷键合硅胶为固定相，甲醇-水-冰醋酸（45:54:1）流动相，检测波长：257 nm，理论板数按芦丁计算不低于3000.对照品溶液制备：120减